| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4页 |
| 缩略词表 | 第5-9页 |
| 第一章 前言 | 第9-17页 |
| 1.1 水稻的研究现状 | 第9页 |
| 1.2 植物胁迫的研究进展 | 第9-12页 |
| 1.2.1 植物胁迫的研究进展概述 | 第9-10页 |
| 1.2.2 干旱和盐胁迫的研究进展 | 第10页 |
| 1.2.3 植物表皮细胞与干旱和盐胁迫的关系 | 第10-11页 |
| 1.2.4 气孔与干旱和盐胁迫的关系 | 第11-12页 |
| 1.2.5 ABA与干旱和盐胁迫的关系 | 第12页 |
| 1.3 印迹法观察植物表皮 | 第12-13页 |
| 1.4 水稻转基因技术的研究进展 | 第13-14页 |
| 1.5 植物组织化学检测的原理及应用 | 第14-15页 |
| 1.6 本研究的意义 | 第15-17页 |
| 第二章 材料与方法 | 第17-27页 |
| 2.1 材料 | 第17页 |
| 2.1.1 水稻 | 第17页 |
| 2.1.2 菌种 | 第17页 |
| 2.1.3 载体 | 第17页 |
| 2.2 方法 | 第17-27页 |
| 2.2.1 水稻种植 | 第17-18页 |
| 2.2.2 牙齿合成树脂印迹技术 | 第18页 |
| 2.2.3 水稻生理实验 | 第18页 |
| 2.2.3.1 盐胁迫实验 | 第18页 |
| 2.2.3.2 离体叶片的失水实验 | 第18页 |
| 2.2.4 水稻表型观察与统计 | 第18-19页 |
| 2.2.4.1 气孔密度的统计 | 第19页 |
| 2.2.4.2 气孔开度的统计 | 第19页 |
| 2.2.5 载体构建 | 第19-24页 |
| 2.2.5.1 CTAB法提取水稻DNA | 第19-20页 |
| 2.2.5.2 目的片段的扩增 | 第20页 |
| 2.2.5.3 胶回收 | 第20页 |
| 2.2.5.4 加A与连接反应 | 第20页 |
| 2.2.5.5 CaCl_2法制取感受态E.coli细胞 | 第20-21页 |
| 2.2.5.6 重组载体进行转化感受态E.coli细胞 | 第21-22页 |
| 2.2.5.7 E.coli阳性克隆的筛选 | 第22页 |
| 2.2.5.8 酶切验证 | 第22页 |
| 2.2.5.9 质粒的提取 | 第22页 |
| 2.2.5.10 测序及序列比对 | 第22-23页 |
| 2.2.5.11 表达载体的构建 | 第23页 |
| 2.2.5.12 CaCl_2法制备农杆菌EHA105感受态细胞 | 第23-24页 |
| 2.2.5.13 表达载体转化农杆菌EHA105 | 第24页 |
| 2.2.5.14 农杆菌EHA105阳性克隆的筛选及鉴定 | 第24页 |
| 2.2.6 水稻转基因技术 | 第24-26页 |
| 2.2.6.1 水稻中花11愈伤组织的诱导 | 第24-25页 |
| 2.2.6.2 农杆菌侵染水稻愈伤组织 | 第25页 |
| 2.2.6.3 农杆菌与水稻愈伤组织的共培养与除去农杆菌 | 第25页 |
| 2.2.6.4 转化后的愈伤组织的筛选 | 第25页 |
| 2.2.6.5 分化培养 | 第25-26页 |
| 2.2.6.6 生根培养 | 第26页 |
| 2.2.6.7 过渡移栽 | 第26页 |
| 2.2.7 转基因植株的GUS染色 | 第26-27页 |
| 第三章 结果与分析 | 第27-52页 |
| 3.1 245em对干旱和盐胁迫敏感等的表型鉴定 | 第27-35页 |
| 3.1.1 245em的干旱与盐胁迫实验 | 第27-34页 |
| 3.1.1.1 245em的干旱胁迫处理实验 | 第27-28页 |
| 3.1.1.2 245em的盐胁迫处理实验 | 第28-30页 |
| 3.1.1.3 245em的表皮细胞表型变化使其对干旱和盐胁迫敏感 | 第30页 |
| 3.1.1.4 245em的气孔密度升高使其对干旱更敏感 | 第30-31页 |
| 3.1.1.5 245em的离体叶片失水率与相对水含量 | 第31-32页 |
| 3.1.1.6 干旱时245em气孔关闭受到部分抑制使其对干旱敏感 | 第32-33页 |
| 3.1.1.7 245em的根系发达程度变弱使其对干旱和盐胁迫敏感 | 第33-34页 |
| 3.1.2 245em其他生理特征的变化 | 第34-35页 |
| 3.2 340对干旱和盐胁迫敏感等的表型鉴定 | 第35-44页 |
| 3.2.1 340的干旱和盐胁迫实验 | 第35-42页 |
| 3.2.1.1 340的干旱胁迫处理实验 | 第35-37页 |
| 3.2.1.2 340的盐胁迫处理实验 | 第37-38页 |
| 3.2.1.3 340的气孔变化使其对干旱敏感 | 第38页 |
| 3.2.1.4 干旱时340刺毛直立比例降低使其对干旱敏感 | 第38-39页 |
| 3.2.1.5 340的气孔密度变化 | 第39-40页 |
| 3.2.1.6 340叶片持水能力降低使其对干旱敏感 | 第40页 |
| 3.2.1.7 340的根系发达程度变弱使其对干旱和盐胁迫敏感 | 第40-41页 |
| 3.2.1.8 340气孔张开程度变大使其对干旱敏感 | 第41-42页 |
| 3.2.2 340的其他生理特征的变化 | 第42-44页 |
| 3.2.2.1 340发育期植株矮化、叶耳消失 | 第42页 |
| 3.2.2.2 340部分叶与茎夹角变大 | 第42-43页 |
| 3.2.2.3 340根与根系中轴夹角变大 | 第43-44页 |
| 3.3 OsPIPE启动子连接GUS基因的载体构建 | 第44-47页 |
| 3.3.1 OsPIPE自身启动子顺式作用元件预测 | 第44页 |
| 3.3.2 OsPIPE启动子连接pUCm-T载体 | 第44-45页 |
| 3.3.3 proOsPIPE::GUS表达载体的构建 | 第45-46页 |
| 3.3.4 proOsPIPE::GUS表达载体转化根癌农杆菌EHA105菌株 | 第46-47页 |
| 3.4 水稻转基因技术体系的优化 | 第47-50页 |
| 3.4.1 水稻转基因实验过程 | 第47-48页 |
| 3.4.2 适宜浓度的VB1能够促进水稻愈伤组织的分化 | 第48页 |
| 3.4.3 6-BA对愈伤组织的再分化影响的初步研究 | 第48-49页 |
| 3.4.4 透气性对再分化效率的影响 | 第49页 |
| 3.4.5 温度对再分化效率的影响 | 第49页 |
| 3.4.6 愈伤组织再分化效率影响因素的综合分析 | 第49-50页 |
| 3.5 OsPIPE的表达模式分析 | 第50-52页 |
| 3.5.1 转基因愈伤组织中的GUS表达 | 第50-51页 |
| 3.5.2 OsPIPE在转基因植株中的表达模式分析 | 第51-52页 |
| 第四章 讨论 | 第52-57页 |
| 4.1 245em与340突变体对干旱和盐胁迫敏感等的表型分析 | 第52-54页 |
| 4.1.1 245em对干旱和盐胁迫敏感等的表型分析 | 第52页 |
| 4.1.2 340对干旱和盐胁迫敏感等的表型分析 | 第52-53页 |
| 4.1.3 对245em与340突变体表型统计的准确性和误差分析 | 第53-54页 |
| 4.2 水稻转基因技术体系的优化 | 第54-55页 |
| 4.3 OsPIPE的表达模式分析 | 第55-56页 |
| 4.4 小结 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-61页 |
| 致谢 | 第61页 |
