| 缩略词表 | 第6-8页 |
| 中文摘要 | 第8-10页 |
| 英文摘要 | 第10-11页 |
| 前言 | 第12-16页 |
| 第一章 全人源蜱传脑炎病毒单克隆抗体筛选 | 第16-37页 |
| 第一节 疫苗免疫及体液免疫应答 | 第16-19页 |
| 1 材料和方法 | 第16-17页 |
| 1.1 实验材料和试剂 | 第16页 |
| 1.2 实验方法 | 第16-17页 |
| 1.2.1 疫苗免疫及血液样本采集 | 第16页 |
| 1.2.2 ELISA检测血清抗体滴度 | 第16-17页 |
| 2 实验结果 | 第17-18页 |
| 3 分析讨论 | 第18-19页 |
| 第二节 流式细胞分选及单细胞PCR技术扩增抗体基因 | 第19-27页 |
| 1 材料和方法 | 第19-24页 |
| 1.1 实验材料和试剂 | 第19页 |
| 1.2 实验方法 | 第19-24页 |
| 1.2.1 人外周血单核细胞分离 | 第19-20页 |
| 1.2.2 流式细胞仪分选单个抗体分泌细胞 | 第20页 |
| 1.2.3 PCR扩增抗体基因 | 第20-24页 |
| 2 实验结果 | 第24-25页 |
| 2.1 外周血单核细胞分离及流式细胞分选 | 第24页 |
| 2.2 抗体基因扩增 | 第24-25页 |
| 2.3 抗体基因序列分析 | 第25页 |
| 3 分析讨论 | 第25-27页 |
| 第三节 蜱传脑炎病毒单克隆抗体筛选 | 第27-37页 |
| 1 材料和方法 | 第27-32页 |
| 1.1 实验材料和试剂 | 第27页 |
| 1.2 实验方法 | 第27-32页 |
| 1.2.1 单克隆抗体线性表达框构建 | 第27-31页 |
| 1.2.2 抗体线性表达框转染及表达 | 第31页 |
| 1.2.3 Dot Blot检测抗体表达 | 第31页 |
| 1.2.4 ELISA实验筛选蜱传脑炎病毒结合单抗 | 第31-32页 |
| 2 实验结果 | 第32-36页 |
| 2.1 扩增抗体线性表达框 | 第32-34页 |
| 2.2 线性表达框表达 Dot Blot 鉴定 | 第34页 |
| 2.3 ELISA筛选结合单抗 | 第34-36页 |
| 3 分析讨论 | 第36-37页 |
| 第二章 蜱传脑炎病毒抗原E和NS1 蛋白表达 | 第37-54页 |
| 第一节 抗原E和NS1蛋白原核表达纯化 | 第37-48页 |
| 1 材料和方法 | 第37-43页 |
| 1.1 实验材料和试剂 | 第37页 |
| 1.2 实验方法 | 第37-43页 |
| 1.2.1 原核表达质粒构建 | 第37-40页 |
| 1.2.2 重组蛋白诱导表达 | 第40-41页 |
| 1.2.3 重组蛋白大量表达及纯化 | 第41-42页 |
| 1.2.4 蛋白印迹实验 | 第42页 |
| 1.2.5 ELISA 实验 | 第42页 |
| 1.2.6 兔抗多克隆抗体制备及检测 | 第42-43页 |
| 2 实验结果 | 第43-46页 |
| 2.1 质粒构建及鉴定 | 第43-44页 |
| 2.2 重组蛋白诱导表达及纯化 | 第44-45页 |
| 2.3 抗原蛋白与阳性血清蛋白印迹实验结果 | 第45-46页 |
| 2.4 抗原蛋白与血清多抗 ELISA 实验结果 | 第46页 |
| 3 分析讨论 | 第46-48页 |
| 第二节 抗原E和NS1蛋白真核表达鉴定 | 第48-54页 |
| 1 材料和方法 | 第48-50页 |
| 1.1 实验材料和试剂 | 第48页 |
| 1.2 实验方法 | 第48-50页 |
| 1.2.1 真核表达质粒构建 | 第48-49页 |
| 1.2.2 质粒表达与鉴定 | 第49-50页 |
| 2 实验结果 | 第50-52页 |
| 2.1 p DC316/pr ME 和 p DC316/NS1 质粒构建 | 第50-52页 |
| 2.2 p DC316/pr ME 和 p DC316/NS1 质粒表达 WB 鉴定 | 第52页 |
| 3 分析讨论 | 第52-54页 |
| 第三章 蜱传脑炎病毒中和单抗筛选及抗原抗体相互作用研究 | 第54-62页 |
| 第一节 蜱传脑炎病毒中和单抗筛选 | 第54-59页 |
| 1 材料和方法 | 第54-55页 |
| 1.1 实验材料和试剂 | 第54页 |
| 1.2 实验方法 | 第54-55页 |
| 1.2.1 抗体表达质粒构建 | 第54页 |
| 1.2.2 抗体质粒转染及表达 | 第54页 |
| 1.2.3 抗体纯化 | 第54-55页 |
| 1.2.4 细胞中和实验 | 第55页 |
| 2 实验结果 | 第55-57页 |
| 2.1 抗体表达质粒构建 | 第55-56页 |
| 2.2 抗体表达与纯化 | 第56页 |
| 2.3 细胞中和实验结果 | 第56-57页 |
| 3 分析讨论 | 第57-59页 |
| 第二节 蜱传脑炎病毒抗原抗体相互作用研究 | 第59-62页 |
| 1 材料和方法 | 第59-60页 |
| 1.1 实验材料和试剂 | 第59页 |
| 1.2 实验方法 | 第59-60页 |
| 1.2.1 抗原抗体ELISA检测分析 | 第59页 |
| 1.2.2 抗原抗体蛋白印迹检测分析 | 第59-60页 |
| 2 实验结果 | 第60-61页 |
| 2.1 抗原抗体ELISA检测分析结果 | 第60页 |
| 2.3 抗原抗体蛋白印迹检测分析结果 | 第60-61页 |
| 3 分析讨论 | 第61-62页 |
| 结论与展望 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-65页 |
| 附录 | 第65-69页 |
| 个人简历 | 第69-70页 |
| 致谢 | 第70页 |
