| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5页 |
| 第一章 绪论 | 第9-20页 |
| 1.1 人参皂苷概述 | 第9-11页 |
| 1.1.1 人参的药用研究 | 第9页 |
| 1.1.2 人参的活性成分 | 第9-10页 |
| 1.1.3 人参皂苷对机体的作用 | 第10-11页 |
| 1.1.3.1 人参皂苷对中枢神经系统的作用 | 第10页 |
| 1.1.3.2 人参皂苷对心血管系统的作用 | 第10页 |
| 1.1.3.3 人参皂苷对免疫系统的作用 | 第10页 |
| 1.1.3.4 人参皂苷对内分泌系统的作用 | 第10-11页 |
| 1.1.3.5 人参皂苷的抗衰老作用 | 第11页 |
| 1.1.3.6 人参皂苷的抗肿瘤作用 | 第11页 |
| 1.2 人参皂苷CK概述 | 第11-12页 |
| 1.2.1 人参皂苷CK的研究背景 | 第11-12页 |
| 1.2.2 人参皂苷CK的分子结构 | 第12页 |
| 1.2.3 人参皂苷CK的优势 | 第12页 |
| 1.3 细胞凋亡 | 第12-18页 |
| 1.3.1 细胞凋亡的基本机制 | 第13-14页 |
| 1.3.1.1 线粒体凋亡途径 | 第13页 |
| 1.3.1.2 内质网凋亡途径 | 第13页 |
| 1.3.1.3 死亡受体途径 | 第13-14页 |
| 1.3.2 凋亡基因 | 第14-15页 |
| 1.3.2.1 Bcl-2家族 | 第14页 |
| 1.3.2.2 Caspase家族 | 第14-15页 |
| 1.3.2.3 MAPK家族 | 第15页 |
| 1.3.3 细胞凋亡的检测方法 | 第15-17页 |
| 1.3.3.1 依据形态特征的检测方法 | 第15-16页 |
| 1.3.3.2 DAPI染色法 | 第16页 |
| 1.3.3.3 FDA-PI-Hoechst三重染色法 | 第16页 |
| 1.3.3.4 TUNEL检测法 | 第16页 |
| 1.3.3.5 流式细胞分析法 | 第16-17页 |
| 1.3.3.6 酶联免疫吸附法 | 第17页 |
| 1.3.3.7 线粒体势能检测 | 第17页 |
| 1.3.4 活性氧诱导细胞凋亡的作用机制 | 第17-18页 |
| 1.3.4.1 活性氧对生物膜的损伤 | 第17页 |
| 1.3.4.2 活性氧对蛋白质的氧化损伤 | 第17-18页 |
| 1.3.4.3 活性氧对DNA的氧化损伤 | 第18页 |
| 1.3.4.4 活性氧影响信号转导和基因表达 | 第18页 |
| 1.4 立题依据和研究内容 | 第18-20页 |
| 第二章 材料与方法 | 第20-32页 |
| 2.1 实验材料 | 第20-23页 |
| 2.1.1 材料 | 第20-22页 |
| 2.1.2 仪器设备 | 第22-23页 |
| 2.2 试剂配制 | 第23-24页 |
| 2.2.1 磷酸盐缓冲溶液(PBS) | 第23页 |
| 2.2.2 RPMI 1640培养基 | 第23页 |
| 2.2.3 胰蛋白酶 | 第23页 |
| 2.2.4 Hoechst33342溶液 | 第23页 |
| 2.2.5 蛋白免疫印迹用试剂 | 第23-24页 |
| 2.3 实验方法 | 第24-32页 |
| 2.3.1 膀胱癌T24细胞的常规培养 | 第24-25页 |
| 2.3.1.1 细胞复苏 | 第24页 |
| 2.3.1.2 细胞培养 | 第24-25页 |
| 2.3.1.3 细胞传代 | 第25页 |
| 2.3.1.4 细胞冻存 | 第25页 |
| 2.3.2 MTT比色法检测细胞活力 | 第25-26页 |
| 2.3.3 流式细胞术检测细胞凋亡(Annexin V/PI双染法) | 第26-27页 |
| 2.3.4 Hoechst 33342染色 | 第27页 |
| 2.3.5 细胞内ROS水平检测 | 第27-28页 |
| 2.3.6 细胞内GSH含量检测 | 第28页 |
| 2.3.7 蛋白免疫印迹 | 第28-31页 |
| 2.3.7.1 细胞总蛋白提取 | 第28-29页 |
| 2.3.7.2 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第29页 |
| 2.3.7.3 转膜 | 第29页 |
| 2.3.7.4 封闭 | 第29-30页 |
| 2.3.7.5 一抗孵育 | 第30页 |
| 2.3.7.6 洗去一抗 | 第30页 |
| 2.3.7.7 二抗孵育 | 第30页 |
| 2.3.7.8 洗去二抗 | 第30页 |
| 2.3.7.9 ECL显影 | 第30-31页 |
| 2.3.8 统计分析 | 第31-32页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第32-42页 |
| 3.1 人参皂苷对膀胱癌T24细胞存活率的影响 | 第32-33页 |
| 3.2 人参皂苷CK对膀胱癌T24细胞凋亡的影响 | 第33-35页 |
| 3.2.1 形态学观察结果 | 第33-34页 |
| 3.2.2 Annexin V-FITC/PI双染检测细胞凋亡 | 第34-35页 |
| 3.3 人参皂苷CK诱导T24细胞凋亡机制的探讨 | 第35-40页 |
| 3.3.1 人参皂苷CK对T24细胞内ROS的影响 | 第35-36页 |
| 3.3.2 人参皂苷CK对T24细胞内还原型GSH的影响 | 第36页 |
| 3.3.3 人参皂苷CK对细胞中Bcl-2和Bax蛋白表达的影响 | 第36-37页 |
| 3.3.4 人参皂苷CK对细胞中Caspase-3和Caspase-9蛋白表达的影响 | 第37-38页 |
| 3.3.5 人参皂苷CK对T24细胞中p38MAPK蛋白表达的影响 | 第38页 |
| 3.3.6 p38MAPK抑制剂拮抗人参皂苷CK诱导T24细胞凋亡途径 | 第38-40页 |
| 3.4 讨论 | 第40-42页 |
| 第四章 结论 | 第42-43页 |
| 参考文献 | 第43-47页 |
| 致谢 | 第47页 |
