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拟南芥BR调控蛋白PMRP的功能分析

摘要第4-6页
英文摘要第6-8页
缩写词表第9-13页
1 引言第13-20页
    1.1 BR在植物中的分布及生物学功能第13-15页
        1.1.1 BRs的分类及化学结构第13-14页
        1.1.2 BRs在植物体内的分布及生理功能第14-15页
    1.2 PMRP的研究进展第15-17页
        1.2.1 PMRP的生物功能分析第15-16页
        1.2.2 START保守结构域的功能第16-17页
        1.2.3 拟南芥中含START结构域的蛋白质家族及其生物学功能第17页
    1.3 对PMRP进行生物学功能分析的重要意义第17-20页
2 材料和方法第20-35页
    2.1 供试拟南芥、载体及菌株第20页
    2.2 供试试剂第20页
    2.3 主要仪器第20-21页
    2.4 供试培养基、染色液、营养液、溶液第21-22页
        2.4.1 供试培养基第21页
        2.4.2 拟南芥营养液配方第21-22页
        2.4.3 溶液配制第22页
    2.5 引物设计软件第22页
    2.6 BR对Col-0野生型拟南芥中PMRP基因表达的影响第22-25页
        2.6.1 拟南芥的种植第22-23页
        2.6.2 拟南芥幼苗总RNA的提取、纯化及检测第23-24页
        2.6.3 DNA第一条链的合成第24页
        2.6.4 BR对Col-0野生型拟南芥中PMRP基因表达的影响第24-25页
    2.7 PMRP基因过表达植株的获得第25-28页
        2.7.1 PMRP过表达载体的构建第25-26页
        2.7.3 大肠杆菌感受态的制备及转化第26-27页
        2.7.4 碱裂解法小量提取质粒第27页
        2.7.5 农杆菌感受态GV3101的制备与转化第27-28页
        2.7.6 沾花法转化野生型拟南芥及阳性苗的筛选第28页
        2.7.7 过表达PMRP转基因拟南芥的验证第28页
    2.8 PMRP在野生型拟南芥不同组织中的表达量分析第28-29页
        2.8.1 不同组织部位中PMRP基因的表达量变化第28-29页
        2.8.2 不同生长期的根组织中PMRP基因的表达量变化第29页
        2.8.3 不同生长期的茎中PMRP基因的表达量分析第29页
        2.8.4 不同生长期的莲座叶中PMRP基因的表达量分析第29页
        2.8.5 不同生长期的茎生叶中PMRP基因的表达量分析第29页
    2.9 PMRP基因的亚细胞定位分析第29-30页
        2.9.1 PMRP基因的亚细胞定位载体的构建第29-30页
        2.9.2 原生质体的制备第30页
        2.9.3 原生质体转化第30页
        2.9.4 激光共聚焦显微镜下PMRP-GFP融合蛋白的亚细胞定位分析第30页
    2.10 PMRP酵母双杂交诱饵表达载体的构建第30-31页
    2.11 PMRP组织定位分析第31-33页
        2.11.1 拟南芥DNA的提取第31页
        2.11.2 PMRP基因启动子连接GUS报告基因载体的构建第31页
        2.11.3 PMRP基因启动子片段的制备第31-32页
        2.11.4 PMRP基因的组织定位分析第32-33页
    2.12 BR对拟南芥极性相关基因的调控第33页
    2.13 PMRP过表达植株中极性基因的表达量变化第33页
    2.14 琼脂糖印迹法观察表皮细胞排列第33-34页
    2.15 拟南芥花青素含量的测定第34-35页
3 结果与分析第35-55页
    3.1 BRs对PMRP基因表达量的影响第35页
    3.2 PMRP在拟南芥中的表达模式分析第35-44页
        3.2.1 PMRP基因组织定位载体的构建第35-39页
        3.2.2 PMRP在拟南芥中的亚细胞定位第39-41页
        3.2.3 PMRP在拟南芥不同组织的表达量分析第41-44页
    3.3 拟南芥中PMRP的生物学功能分析第44-53页
        3.3.1 PMRP-OE转基因植株的获得第44-46页
        3.3.2 对PMRP-OE转基因植株的叶片长度统计第46-47页
        3.3.3 对PMRP-OE转基因植株中花青素含量的测定第47页
        3.3.4 对PMRP-OE转基因植株根长的测定第47-48页
        3.3.5 PMRP-OE转基因植株叶片的表皮细胞形态学观察第48-49页
        3.3.6 PMRP-OE转基因植株叶片的表皮毛观察第49页
        3.3.7 PMRP基因T-DNA插入突变体分析第49页
        3.3.8 PMRP基因T-DNA插入突变体表型及PMRP基因分析第49-50页
        3.3.9 pmrp叶片表皮细胞的形态观察第50-51页
        3.3.10 PMRP影响叶片近远轴形态结构的机理分析第51-53页
    3.4 PMRP互作蛋白的筛选第53-55页
        3.4.1 酵母双杂交诱饵表达载体的构建第53-55页
4 讨论第55-58页
5 结论第58-59页
参考文献第59-64页
在读期间发表的学术论文第64-66页
作者简历第66-67页
致谢第67-68页

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