摘要 | 第4-6页 |
英文摘要 | 第6-8页 |
缩写词表 | 第9-13页 |
1 引言 | 第13-20页 |
1.1 BR在植物中的分布及生物学功能 | 第13-15页 |
1.1.1 BRs的分类及化学结构 | 第13-14页 |
1.1.2 BRs在植物体内的分布及生理功能 | 第14-15页 |
1.2 PMRP的研究进展 | 第15-17页 |
1.2.1 PMRP的生物功能分析 | 第15-16页 |
1.2.2 START保守结构域的功能 | 第16-17页 |
1.2.3 拟南芥中含START结构域的蛋白质家族及其生物学功能 | 第17页 |
1.3 对PMRP进行生物学功能分析的重要意义 | 第17-20页 |
2 材料和方法 | 第20-35页 |
2.1 供试拟南芥、载体及菌株 | 第20页 |
2.2 供试试剂 | 第20页 |
2.3 主要仪器 | 第20-21页 |
2.4 供试培养基、染色液、营养液、溶液 | 第21-22页 |
2.4.1 供试培养基 | 第21页 |
2.4.2 拟南芥营养液配方 | 第21-22页 |
2.4.3 溶液配制 | 第22页 |
2.5 引物设计软件 | 第22页 |
2.6 BR对Col-0野生型拟南芥中PMRP基因表达的影响 | 第22-25页 |
2.6.1 拟南芥的种植 | 第22-23页 |
2.6.2 拟南芥幼苗总RNA的提取、纯化及检测 | 第23-24页 |
2.6.3 DNA第一条链的合成 | 第24页 |
2.6.4 BR对Col-0野生型拟南芥中PMRP基因表达的影响 | 第24-25页 |
2.7 PMRP基因过表达植株的获得 | 第25-28页 |
2.7.1 PMRP过表达载体的构建 | 第25-26页 |
2.7.3 大肠杆菌感受态的制备及转化 | 第26-27页 |
2.7.4 碱裂解法小量提取质粒 | 第27页 |
2.7.5 农杆菌感受态GV3101的制备与转化 | 第27-28页 |
2.7.6 沾花法转化野生型拟南芥及阳性苗的筛选 | 第28页 |
2.7.7 过表达PMRP转基因拟南芥的验证 | 第28页 |
2.8 PMRP在野生型拟南芥不同组织中的表达量分析 | 第28-29页 |
2.8.1 不同组织部位中PMRP基因的表达量变化 | 第28-29页 |
2.8.2 不同生长期的根组织中PMRP基因的表达量变化 | 第29页 |
2.8.3 不同生长期的茎中PMRP基因的表达量分析 | 第29页 |
2.8.4 不同生长期的莲座叶中PMRP基因的表达量分析 | 第29页 |
2.8.5 不同生长期的茎生叶中PMRP基因的表达量分析 | 第29页 |
2.9 PMRP基因的亚细胞定位分析 | 第29-30页 |
2.9.1 PMRP基因的亚细胞定位载体的构建 | 第29-30页 |
2.9.2 原生质体的制备 | 第30页 |
2.9.3 原生质体转化 | 第30页 |
2.9.4 激光共聚焦显微镜下PMRP-GFP融合蛋白的亚细胞定位分析 | 第30页 |
2.10 PMRP酵母双杂交诱饵表达载体的构建 | 第30-31页 |
2.11 PMRP组织定位分析 | 第31-33页 |
2.11.1 拟南芥DNA的提取 | 第31页 |
2.11.2 PMRP基因启动子连接GUS报告基因载体的构建 | 第31页 |
2.11.3 PMRP基因启动子片段的制备 | 第31-32页 |
2.11.4 PMRP基因的组织定位分析 | 第32-33页 |
2.12 BR对拟南芥极性相关基因的调控 | 第33页 |
2.13 PMRP过表达植株中极性基因的表达量变化 | 第33页 |
2.14 琼脂糖印迹法观察表皮细胞排列 | 第33-34页 |
2.15 拟南芥花青素含量的测定 | 第34-35页 |
3 结果与分析 | 第35-55页 |
3.1 BRs对PMRP基因表达量的影响 | 第35页 |
3.2 PMRP在拟南芥中的表达模式分析 | 第35-44页 |
3.2.1 PMRP基因组织定位载体的构建 | 第35-39页 |
3.2.2 PMRP在拟南芥中的亚细胞定位 | 第39-41页 |
3.2.3 PMRP在拟南芥不同组织的表达量分析 | 第41-44页 |
3.3 拟南芥中PMRP的生物学功能分析 | 第44-53页 |
3.3.1 PMRP-OE转基因植株的获得 | 第44-46页 |
3.3.2 对PMRP-OE转基因植株的叶片长度统计 | 第46-47页 |
3.3.3 对PMRP-OE转基因植株中花青素含量的测定 | 第47页 |
3.3.4 对PMRP-OE转基因植株根长的测定 | 第47-48页 |
3.3.5 PMRP-OE转基因植株叶片的表皮细胞形态学观察 | 第48-49页 |
3.3.6 PMRP-OE转基因植株叶片的表皮毛观察 | 第49页 |
3.3.7 PMRP基因T-DNA插入突变体分析 | 第49页 |
3.3.8 PMRP基因T-DNA插入突变体表型及PMRP基因分析 | 第49-50页 |
3.3.9 pmrp叶片表皮细胞的形态观察 | 第50-51页 |
3.3.10 PMRP影响叶片近远轴形态结构的机理分析 | 第51-53页 |
3.4 PMRP互作蛋白的筛选 | 第53-55页 |
3.4.1 酵母双杂交诱饵表达载体的构建 | 第53-55页 |
4 讨论 | 第55-58页 |
5 结论 | 第58-59页 |
参考文献 | 第59-64页 |
在读期间发表的学术论文 | 第64-66页 |
作者简历 | 第66-67页 |
致谢 | 第67-68页 |