| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 目录 | 第10-12页 |
| 缩略词表 | 第12-13页 |
| 引言 | 第13-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-26页 |
| 1.1 低温微生物概述 | 第14-15页 |
| 1.1.1 低温环境微生物概述 | 第14-15页 |
| 1.2 低温微生物的国内外研究现状及应用前景 | 第15-16页 |
| 1.3 嗜冷酵母菌 | 第16-24页 |
| 1.3.1 嗜冷酵母菌概述 | 第16页 |
| 1.3.2 全球嗜冷酵母的多样性与生态学 | 第16-18页 |
| 1.3.3 嗜冷酵母的适冷策略 | 第18-20页 |
| 1.3.4 嗜冷酵母的生物应用 | 第20-21页 |
| 1.3.5 酵母菌分类概述 | 第21-22页 |
| 1.3.6 目前嗜冷酵母菌研究面临的问题和未来的前景 | 第22-24页 |
| 1.4 本课题的立题意义 | 第24页 |
| 1.5 本课题主要研究内容 | 第24-25页 |
| 1.6 研究路线 | 第25-26页 |
| 第二章 天山冰川低温酵母菌多样性研究 | 第26-39页 |
| 2.1 引言 | 第26页 |
| 2.2 实验材料 | 第26-28页 |
| 2.2.1 天山冰川水样的采集 | 第26页 |
| 2.2.2 药品和试剂 | 第26-27页 |
| 2.2.3 实验主要仪器 | 第27-28页 |
| 2.2.4 主要培养基 | 第28页 |
| 2.3 实验方法 | 第28-29页 |
| 2.3.1 冰川低温酵母菌的分离 | 第28-29页 |
| 2.3.2 菌种的活化分离纯化及保种 | 第29页 |
| 2.4 冰川可培养酵母菌的生长特性 | 第29-32页 |
| 2.4.1 形态观察 | 第29页 |
| 2.4.2 低温酵母菌生理生化测定 | 第29-30页 |
| 2.4.3 低温酵母菌的DNA提取 | 第30页 |
| 2.4.4 26S rDNA基因序列同源性分析 | 第30-31页 |
| 2.4.5 26S rDNA基因扩增 | 第31页 |
| 2.4.6 ITS序列分析法 | 第31页 |
| 2.4.7 PCR反应程序 | 第31页 |
| 2.4.8 PCR产物的测序 | 第31页 |
| 2.4.9 构建系统发育树 | 第31-32页 |
| 2.5 结果与分析 | 第32-38页 |
| 2.5.1 天山冰川可培养酵母菌的生理生化 | 第32-33页 |
| 2.5.2 26S rDNA基因D1/D2区域序列的系统发育分析 | 第33-36页 |
| 2.5.3 ITS区域序列的系统发育分析 | 第36-38页 |
| 2.6 本章小结 | 第38-39页 |
| 第三章 宏基因学组技术建立天山冰川微生物基因文库 | 第39-45页 |
| 3.1 引言 | 第39页 |
| 3.2 实验材料 | 第39-40页 |
| 3.2.1 融水样品 | 第39页 |
| 3.2.2 菌株、载体、工具酶与主要试剂 | 第39页 |
| 3.2.3 培养基 | 第39-40页 |
| 3.3 实验方法 | 第40-42页 |
| 3.3.1 天山冰川微生物26S rDNA PCR扩增 | 第40页 |
| 3.3.2 扩增产物琼脂糖凝胶电泳 | 第40页 |
| 3.3.3 天山冰川微生物26S rDNA文库的构建文库的构建 | 第40-41页 |
| 3.3.4 阳性克隆的筛选 | 第41页 |
| 3.3.5 26S rDNA序列测定与系统发育树构建 | 第41-42页 |
| 3.4 结果与分析 | 第42-44页 |
| 3.4.1 阳性克隆筛选结果 | 第42页 |
| 3.4.2 天山冰川低温微生物基因片段文库的构建 | 第42-44页 |
| 3.5 本章小结 | 第44-45页 |
| 第四章 天山冰川产低温酶菌株多样性分析 | 第45-54页 |
| 4.1 引言 | 第45页 |
| 4.2 实验材料 | 第45页 |
| 4.2.1 菌株 | 第45页 |
| 4.2.2 主要试剂和仪器 | 第45页 |
| 4.2.3 筛选培养基 | 第45页 |
| 4.3 实验方法 | 第45-47页 |
| 4.3.1 产低温酶菌株的筛选方法 | 第45-46页 |
| 4.3.2 产酶菌株生理生化鉴定 | 第46页 |
| 4.3.3 产酶菌株26S rRNA基因PCR扩增 | 第46-47页 |
| 4.3.4 产酶菌株系统发育分析 | 第47页 |
| 4.3.5 产酶菌株MSP-PCR指纹图谱分析 | 第47页 |
| 4.4 结果与分析 | 第47-53页 |
| 4.4.1 产酶菌株筛选结果 | 第47-49页 |
| 4.4.2 产酶菌株生理生化结果 | 第49-50页 |
| 4.4.3 产酶菌株系统发育分析 | 第50-51页 |
| 4.4.4 产酶菌株MSP-PCR指纹图谱分析 | 第51-52页 |
| 4.4.5 产酶菌株系统多样性分析 | 第52-53页 |
| 4.5 本章小结 | 第53-54页 |
| 第五章 结论与展望 | 第54-56页 |
| 5.1 结论 | 第54页 |
| 5.2 展望 | 第54-55页 |
| 5.3 本文的主要创新点 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-61页 |
| 致谢 | 第61-62页 |
| 作者简介 | 第62-63页 |
| 导师评阅表 | 第63页 |
