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水体镉暴露对稀有鮈鲫肝脏毒性及脂代谢影响的初步研究

摘要第9-12页
Abstract第12-15页
第1章 文献综述第16-41页
    1.1 水体镉污染对鱼类毒性研究进展第16-31页
        1.1.1 镉在鱼组织中生物累积情况及半致死毒性效应第16-19页
        1.1.2 镉的环境内分泌干扰属性第19-23页
        1.1.3 镉对鱼类肝、肾、鳃等器官的损害第23-24页
        1.1.4 镉对鱼类血液和生理生化指标的影响第24-25页
        1.1.5 镉暴露对鱼类代谢的影响第25页
        1.1.6 镉对鱼类的生物毒性机制第25-29页
        1.1.7 镉生物毒性的保护剂第29-31页
    1.2 脂质代谢研究进展第31-39页
        1.2.1 脂滴的形成、生长和降解第32-34页
        1.2.2 脂滴的功能第34页
        1.2.3 相关因子对脂滴形成的影响第34-37页
        1.2.4 脂滴紊乱与相关疾病第37-38页
        1.2.5 细胞核脂滴第38-39页
    1.3 研究目标及意义第39-41页
第2章 水体镉暴露对稀有鮈鲫肝脏结构的影响第41-89页
    2.1 材料与方法第41-43页
        2.1.1 实验鱼的来源与驯养第41-42页
        2.1.2 水体镉暴露第42页
        2.1.3 组织结构材料处理第42页
        2.1.4 超微结构材料处理第42-43页
        2.1.5 生长指标测量及油红O染色第43页
    2.2 结果第43-80页
        2.2.1 慢性镉处理后雌性稀有鮈鲫的生长第43-44页
        2.2.2 未经镉暴露雌性稀有鮈鲫肝脏组织学结构第44-46页
        2.2.3 水体急性镉暴露后雌性稀有鮈鲫肝脏组织学结构第46-51页
        2.2.4 水体 0-100 μg/L镉暴露 5w雌性稀有鮈鲫肝脏组织学结构第51-60页
        2.2.5 水体 5-50 μg/L镉暴露 12w雌性稀有鮈鲫肝脏组织学结构第60-62页
        2.2.6 未经镉暴露雌性稀有鮈鲫肝脏超微结构第62-63页
        2.2.7 水体急性镉暴露后雌性稀有鮈鲫肝脏超微结构第63-68页
        2.2.8 水体 5-100 μg/L镉暴露 5w后雌性稀有鮈鲫肝脏超微结构第68-74页
        2.2.9 水体 5-75 μg/L镉暴露 12w后雌性稀有鮈鲫肝脏超微结构第74-78页
        2.2.10 水体 0-100 μg/L镉暴露 5w或 12w雌性稀有鮈鲫肝脏脂滴沉积第78-80页
    2.3 讨论第80-88页
        2.3.1 水体镉暴露对鱼类生长影响第80页
        2.3.2 稀有鮈鲫肝脏的显微与超微结构特点第80-82页
        2.3.3 镉暴露对稀有鮈鲫肝脏形态结构以及肝细胞的毒理影响第82-88页
    小结第88-89页
第3章 稀有鮈鲫Beclin1基因分子克隆及水体镉暴露对其表达的影响第89-104页
    3.1 材料与方法第90-94页
        3.1.1 实验鱼的来源与驯养第90页
        3.1.2 水体镉暴露及取材第90页
        3.1.3 总RNA提取和cDNA合成第90-91页
        3.1.4 稀有鮈鲫Beclin1基因(rmBeclin1)的分子克隆第91页
        3.1.5 稀有鮈鲫Beclin1基因序列分析第91页
        3.1.6 稀有鮈鲫Beclin1基因的时空表达模式第91-92页
        3.1.7 实时荧光定量PCR(RT-qPCR)第92页
        3.1.8 数据分析第92-94页
    3.2 结果第94-101页
        3.2.1 稀有鮈鲫rmBeclin1基因cDNA序列和氨基酸序列第94-96页
        3.2.2 序列和进化树分析第96页
        3.2.3 rmBeclin1基因的时空表达第96-97页
        3.2.4 水体镉暴露后rmBeclin1基因的表达第97-101页
    3.3 讨论第101-103页
        3.3.1 rmBeclin1基因的序列结构特点第101页
        3.3.2 rmBeclin1基因的时空表达特点第101-102页
        3.3.3 水体镉暴露对稀有鮈鲫rmBeclin1基因表达的影响第102-103页
    小结第103-104页
第4章 水体镉暴露对稀有鮈鲫代谢相关生理指标及脂滴形成相关基因表达的影响第104-122页
    4.1 材料与方法第105-107页
        4.1.1 实验鱼饲养第105页
        4.1.2 水体镉暴露第105页
        4.1.3 静止代谢率第105页
        4.1.4 组织蛋白提取第105页
        4.1.5 血清分离第105页
        4.1.6 生理指标检测第105-106页
        4.1.7 总RNA提取与逆转录第106页
        4.1.8 实时荧光定量PCR(RT-qPCR)第106-107页
        4.1.9 SDS-PAGE电泳和Western blot第107页
        4.1.10 数据分析第107页
    4.2 结果第107-117页
        4.2.1 急性镉暴露对血清和肝脏代谢指标的影响第107-110页
        4.2.2 水体镉暴露 5w对血清和肝脏代谢指标的影响第110-114页
        4.2.3 水体急性镉暴露后稀有鮈鲫脂滴形成与脂代谢相关基因的转录情况第114-115页
        4.2.4 水体镉暴露 5w后稀有鮈鲫脂滴形成与脂代谢相关基因的转录情况第115-117页
    4.3 讨论第117-121页
        4.3.1 水体镉暴露对稀有鮈鲫肝脏代谢功能的影响第117-118页
        4.3.2 水体镉暴露对鱼类脂肪代谢及脂滴形成的影响第118-121页
    小结第121-122页
第5章 水体镉暴露对稀有鮈鲫H-P-I轴及下游信号的影响第122-146页
    5.1 材料与方法第123-124页
        5.1.1 实验鱼饲养和水体镉暴露处理、取材第123页
        5.1.2 组织总RNA提取及逆转录第123页
        5.1.3 RT-qPCR检测镉暴露后相关基因的表达第123-124页
        5.1.4 酶联免疫吸附(ELISA)第124页
        5.1.5 SDS-PAGE电泳和Western blot第124页
        5.1.6 数据处理和统计分析第124页
    5.2 结果第124-139页
        5.2.1 水体急性镉暴露第124-133页
        5.2.2 水体慢性镉暴露第133-139页
    5.3 讨论第139-144页
        5.3.1 水体急性镉暴露对雌性稀有鮈鲫H-P-I轴激素及信号通路的影响第139-142页
        5.3.2 水体慢性镉暴露后对稀有鮈鲫H-P-I轴激素及其信号通路的影响第142-144页
    小结第144-146页
第6章 水体镉暴露诱导的稀有鮈鲫肝脏毒性及脂代谢紊乱潜在分子机制研究第146-169页
    6.1 材料与方法第146-149页
        6.1.1 实验鱼饲养、水体镉暴露以及取材第146页
        6.1.2 实验鱼肝脏总RNA提取、建库以及RNA测序第146-147页
        6.1.3 转录组数据分析、组装和注释第147页
        6.1.4 基因表达的定量以及差异表达基因分析第147页
        6.1.5 实时荧光定量PCR(RT-qPCR)第147-149页
        6.1.6 ELISA检测第149页
        6.1.7 数据处理和统计分析第149页
    6.2 结果第149-162页
        6.2.1 转录组测序、组装和注释第149-152页
        6.2.2 水体 75 μg/L镉暴露 5w后雌性稀有鮈鲫肝脏差异表达基因第152-155页
        6.2.3 实时荧光定量PCR验证差异表达基因第155-156页
        6.2.4 差异表达基因在急性以及其它浓度慢性镉暴露处理组的表达第156-157页
        6.2.5 急、慢性镉暴露对稀有鮈鲫生长激素家族激素的影响第157-160页
        6.2.6 急、慢性镉暴露对稀有鮈鲫机体炎症水平的影响第160-162页
    6.3 讨论第162-168页
        6.3.1 稀有鮈鲫肝脏转录组第162页
        6.3.2 水体镉暴露对稀有鮈鲫生长的干扰第162-165页
        6.3.3 水体镉暴露与肝细胞离子平衡及氧化应激第165-166页
        6.3.4 水体镉暴露与炎症第166页
        6.3.5 水体镉暴露与脂代谢紊乱第166-168页
        6.3.6 肝脏组织筛选出的用于镉污染检测的生物标记第168页
    小结第168-169页
结论与展望第169-171页
参考文献第171-202页
致谢第202-204页
发表文章目录第204-206页

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