摘要 | 第9-12页 |
Abstract | 第12-15页 |
第1章 文献综述 | 第16-41页 |
1.1 水体镉污染对鱼类毒性研究进展 | 第16-31页 |
1.1.1 镉在鱼组织中生物累积情况及半致死毒性效应 | 第16-19页 |
1.1.2 镉的环境内分泌干扰属性 | 第19-23页 |
1.1.3 镉对鱼类肝、肾、鳃等器官的损害 | 第23-24页 |
1.1.4 镉对鱼类血液和生理生化指标的影响 | 第24-25页 |
1.1.5 镉暴露对鱼类代谢的影响 | 第25页 |
1.1.6 镉对鱼类的生物毒性机制 | 第25-29页 |
1.1.7 镉生物毒性的保护剂 | 第29-31页 |
1.2 脂质代谢研究进展 | 第31-39页 |
1.2.1 脂滴的形成、生长和降解 | 第32-34页 |
1.2.2 脂滴的功能 | 第34页 |
1.2.3 相关因子对脂滴形成的影响 | 第34-37页 |
1.2.4 脂滴紊乱与相关疾病 | 第37-38页 |
1.2.5 细胞核脂滴 | 第38-39页 |
1.3 研究目标及意义 | 第39-41页 |
第2章 水体镉暴露对稀有鮈鲫肝脏结构的影响 | 第41-89页 |
2.1 材料与方法 | 第41-43页 |
2.1.1 实验鱼的来源与驯养 | 第41-42页 |
2.1.2 水体镉暴露 | 第42页 |
2.1.3 组织结构材料处理 | 第42页 |
2.1.4 超微结构材料处理 | 第42-43页 |
2.1.5 生长指标测量及油红O染色 | 第43页 |
2.2 结果 | 第43-80页 |
2.2.1 慢性镉处理后雌性稀有鮈鲫的生长 | 第43-44页 |
2.2.2 未经镉暴露雌性稀有鮈鲫肝脏组织学结构 | 第44-46页 |
2.2.3 水体急性镉暴露后雌性稀有鮈鲫肝脏组织学结构 | 第46-51页 |
2.2.4 水体 0-100 μg/L镉暴露 5w雌性稀有鮈鲫肝脏组织学结构 | 第51-60页 |
2.2.5 水体 5-50 μg/L镉暴露 12w雌性稀有鮈鲫肝脏组织学结构 | 第60-62页 |
2.2.6 未经镉暴露雌性稀有鮈鲫肝脏超微结构 | 第62-63页 |
2.2.7 水体急性镉暴露后雌性稀有鮈鲫肝脏超微结构 | 第63-68页 |
2.2.8 水体 5-100 μg/L镉暴露 5w后雌性稀有鮈鲫肝脏超微结构 | 第68-74页 |
2.2.9 水体 5-75 μg/L镉暴露 12w后雌性稀有鮈鲫肝脏超微结构 | 第74-78页 |
2.2.10 水体 0-100 μg/L镉暴露 5w或 12w雌性稀有鮈鲫肝脏脂滴沉积 | 第78-80页 |
2.3 讨论 | 第80-88页 |
2.3.1 水体镉暴露对鱼类生长影响 | 第80页 |
2.3.2 稀有鮈鲫肝脏的显微与超微结构特点 | 第80-82页 |
2.3.3 镉暴露对稀有鮈鲫肝脏形态结构以及肝细胞的毒理影响 | 第82-88页 |
小结 | 第88-89页 |
第3章 稀有鮈鲫Beclin1基因分子克隆及水体镉暴露对其表达的影响 | 第89-104页 |
3.1 材料与方法 | 第90-94页 |
3.1.1 实验鱼的来源与驯养 | 第90页 |
3.1.2 水体镉暴露及取材 | 第90页 |
3.1.3 总RNA提取和cDNA合成 | 第90-91页 |
3.1.4 稀有鮈鲫Beclin1基因(rmBeclin1)的分子克隆 | 第91页 |
3.1.5 稀有鮈鲫Beclin1基因序列分析 | 第91页 |
3.1.6 稀有鮈鲫Beclin1基因的时空表达模式 | 第91-92页 |
3.1.7 实时荧光定量PCR(RT-qPCR) | 第92页 |
3.1.8 数据分析 | 第92-94页 |
3.2 结果 | 第94-101页 |
3.2.1 稀有鮈鲫rmBeclin1基因cDNA序列和氨基酸序列 | 第94-96页 |
3.2.2 序列和进化树分析 | 第96页 |
3.2.3 rmBeclin1基因的时空表达 | 第96-97页 |
3.2.4 水体镉暴露后rmBeclin1基因的表达 | 第97-101页 |
3.3 讨论 | 第101-103页 |
3.3.1 rmBeclin1基因的序列结构特点 | 第101页 |
3.3.2 rmBeclin1基因的时空表达特点 | 第101-102页 |
3.3.3 水体镉暴露对稀有鮈鲫rmBeclin1基因表达的影响 | 第102-103页 |
小结 | 第103-104页 |
第4章 水体镉暴露对稀有鮈鲫代谢相关生理指标及脂滴形成相关基因表达的影响 | 第104-122页 |
4.1 材料与方法 | 第105-107页 |
4.1.1 实验鱼饲养 | 第105页 |
4.1.2 水体镉暴露 | 第105页 |
4.1.3 静止代谢率 | 第105页 |
4.1.4 组织蛋白提取 | 第105页 |
4.1.5 血清分离 | 第105页 |
4.1.6 生理指标检测 | 第105-106页 |
4.1.7 总RNA提取与逆转录 | 第106页 |
4.1.8 实时荧光定量PCR(RT-qPCR) | 第106-107页 |
4.1.9 SDS-PAGE电泳和Western blot | 第107页 |
4.1.10 数据分析 | 第107页 |
4.2 结果 | 第107-117页 |
4.2.1 急性镉暴露对血清和肝脏代谢指标的影响 | 第107-110页 |
4.2.2 水体镉暴露 5w对血清和肝脏代谢指标的影响 | 第110-114页 |
4.2.3 水体急性镉暴露后稀有鮈鲫脂滴形成与脂代谢相关基因的转录情况 | 第114-115页 |
4.2.4 水体镉暴露 5w后稀有鮈鲫脂滴形成与脂代谢相关基因的转录情况 | 第115-117页 |
4.3 讨论 | 第117-121页 |
4.3.1 水体镉暴露对稀有鮈鲫肝脏代谢功能的影响 | 第117-118页 |
4.3.2 水体镉暴露对鱼类脂肪代谢及脂滴形成的影响 | 第118-121页 |
小结 | 第121-122页 |
第5章 水体镉暴露对稀有鮈鲫H-P-I轴及下游信号的影响 | 第122-146页 |
5.1 材料与方法 | 第123-124页 |
5.1.1 实验鱼饲养和水体镉暴露处理、取材 | 第123页 |
5.1.2 组织总RNA提取及逆转录 | 第123页 |
5.1.3 RT-qPCR检测镉暴露后相关基因的表达 | 第123-124页 |
5.1.4 酶联免疫吸附(ELISA) | 第124页 |
5.1.5 SDS-PAGE电泳和Western blot | 第124页 |
5.1.6 数据处理和统计分析 | 第124页 |
5.2 结果 | 第124-139页 |
5.2.1 水体急性镉暴露 | 第124-133页 |
5.2.2 水体慢性镉暴露 | 第133-139页 |
5.3 讨论 | 第139-144页 |
5.3.1 水体急性镉暴露对雌性稀有鮈鲫H-P-I轴激素及信号通路的影响 | 第139-142页 |
5.3.2 水体慢性镉暴露后对稀有鮈鲫H-P-I轴激素及其信号通路的影响 | 第142-144页 |
小结 | 第144-146页 |
第6章 水体镉暴露诱导的稀有鮈鲫肝脏毒性及脂代谢紊乱潜在分子机制研究 | 第146-169页 |
6.1 材料与方法 | 第146-149页 |
6.1.1 实验鱼饲养、水体镉暴露以及取材 | 第146页 |
6.1.2 实验鱼肝脏总RNA提取、建库以及RNA测序 | 第146-147页 |
6.1.3 转录组数据分析、组装和注释 | 第147页 |
6.1.4 基因表达的定量以及差异表达基因分析 | 第147页 |
6.1.5 实时荧光定量PCR(RT-qPCR) | 第147-149页 |
6.1.6 ELISA检测 | 第149页 |
6.1.7 数据处理和统计分析 | 第149页 |
6.2 结果 | 第149-162页 |
6.2.1 转录组测序、组装和注释 | 第149-152页 |
6.2.2 水体 75 μg/L镉暴露 5w后雌性稀有鮈鲫肝脏差异表达基因 | 第152-155页 |
6.2.3 实时荧光定量PCR验证差异表达基因 | 第155-156页 |
6.2.4 差异表达基因在急性以及其它浓度慢性镉暴露处理组的表达 | 第156-157页 |
6.2.5 急、慢性镉暴露对稀有鮈鲫生长激素家族激素的影响 | 第157-160页 |
6.2.6 急、慢性镉暴露对稀有鮈鲫机体炎症水平的影响 | 第160-162页 |
6.3 讨论 | 第162-168页 |
6.3.1 稀有鮈鲫肝脏转录组 | 第162页 |
6.3.2 水体镉暴露对稀有鮈鲫生长的干扰 | 第162-165页 |
6.3.3 水体镉暴露与肝细胞离子平衡及氧化应激 | 第165-166页 |
6.3.4 水体镉暴露与炎症 | 第166页 |
6.3.5 水体镉暴露与脂代谢紊乱 | 第166-168页 |
6.3.6 肝脏组织筛选出的用于镉污染检测的生物标记 | 第168页 |
小结 | 第168-169页 |
结论与展望 | 第169-171页 |
参考文献 | 第171-202页 |
致谢 | 第202-204页 |
发表文章目录 | 第204-206页 |