| 中文摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 英文缩写词 | 第13-15页 |
| 前言 | 第15-17页 |
| 第一篇 文献综述 | 第17-57页 |
| 第1章 猪血凝性脑脊髓炎病毒的研究进展 | 第17-25页 |
| 1.1 PHEV的结构研究概述 | 第17-22页 |
| 1.1.1 PHEV的结构及特征 | 第17-18页 |
| 1.1.2 PHEV的基因组结构及其编码蛋白的生物学特征 | 第18-22页 |
| 1.2 PHEV致病机制 | 第22-25页 |
| 第2章 哺乳动物细胞自噬的研究进展 | 第25-51页 |
| 2.1 细胞自噬的一般介绍 | 第25页 |
| 2.2 细胞自噬的分类 | 第25-31页 |
| 2.2.1 巨自噬 | 第25-27页 |
| 2.2.2 微自噬 | 第27-28页 |
| 2.2.3 伴侣介导的自噬 | 第28-31页 |
| 2.3 自噬调节机制 | 第31-38页 |
| 2.3.1 巨自噬的调节机制 | 第31-32页 |
| 2.3.2 自噬体的形成 | 第32-33页 |
| 2.3.3 自噬体的对接和融合 | 第33-34页 |
| 2.3.4 自噬的潜在的核调节机制 | 第34-38页 |
| 2.4 病毒与细胞自噬 | 第38-51页 |
| 2.4.1 病毒对自噬的影响 | 第39-42页 |
| 2.4.2 自噬与病毒的关系 | 第42-51页 |
| 第3章 Snapin蛋白的研究进展 | 第51-57页 |
| 3.1 Snapin蛋白概述 | 第51页 |
| 3.2 Snapin蛋白的主要功能 | 第51-54页 |
| 3.2.1 Snapin调控物质在体内的运输 | 第51-52页 |
| 3.2.2 Snapin能够维持神经突触稳态 | 第52-54页 |
| 3.3 Snapin与病原微生物 | 第54-57页 |
| 3.3.1 Snapin与相应病原体的蛋白的相互作用 | 第54页 |
| 3.3.2 Snapin与神经退行性疾病的相关性 | 第54-57页 |
| 第二篇 研究内容 | 第57-111页 |
| 第1章 猪血凝性脑脊髓炎病毒感染诱导N2a细胞自噬的发生 | 第57-81页 |
| 1.1 材料与试剂 | 第57-58页 |
| 1.1.1 细胞、病毒和质粒 | 第57-58页 |
| 1.1.2 试剂 | 第58页 |
| 1.1.3 主要仪器设备 | 第58页 |
| 1.2 实验方法 | 第58-64页 |
| 1.2.1 相关溶液配制 | 第58-59页 |
| 1.2.2 PHEV的扩增与病毒增殖的定量PCR检测方法 | 第59-60页 |
| 1.2.3 利用透射电镜观察自噬体 | 第60-61页 |
| 1.2.4 GFP-LC3B转染细胞检测病毒对LC3的影响 | 第61页 |
| 1.2.5 Western blot对自噬相关基因的检测 | 第61-62页 |
| 1.2.6 PHEV诱导细胞自噬流的检测 | 第62-63页 |
| 1.2.7 药物配制及细胞处理 | 第63页 |
| 1.2.8 CCK-8 试验检测药物对N2a细胞活性的检测 | 第63-64页 |
| 1.3 实验结果 | 第64-77页 |
| 1.3.1 GFP-LC3质粒的酶切鉴定 | 第64页 |
| 1.3.2 利用透射电镜观察PHEV感染N2a细胞后诱导自噬体样结构的形成 | 第64-66页 |
| 1.3.3 PHEV感染N2a细胞后诱导GFP-LC3荧光斑点的形成 | 第66-67页 |
| 1.3.4 PHEV感染N2a细胞后引起自噬相关蛋白的变化 | 第67-68页 |
| 1.3.5 PHEV诱导自噬体生成但抑制自噬溶酶体降解 | 第68-75页 |
| 1.3.6 药物刺激自噬对PHEV的影响 | 第75-77页 |
| 1.4 讨论 | 第77-79页 |
| 1.5 小结 | 第79-81页 |
| 第2章 酵母双杂交筛选与PHEV S1蛋白相互作用的自噬相关蛋白 | 第81-99页 |
| 2.1 材料与试剂 | 第81-85页 |
| 2.1.1 细胞与菌株 | 第81页 |
| 2.1.2 载体 | 第81-82页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第82-83页 |
| 2.1.4 主要仪器和设备 | 第83页 |
| 2.1.5 主要溶液及试剂的配制 | 第83-85页 |
| 2.2 实验方法 | 第85-90页 |
| 2.2.1 PHEV-S1基因目的片段的扩增 | 第85-87页 |
| 2.2.2 p MD18-T-PHEV-S1重组克隆载体的构建 | 第87页 |
| 2.2.3 诱饵载体的构建 | 第87-89页 |
| 2.2.4 PHEV-S1诱饵蛋白筛选酵母双杂交c DNA文库 | 第89-90页 |
| 2.2.5 酵母回转实验（即重组诱饵载体p GBKT7-PHEV-S1与猎物质粒p GADT7-Snapin共转化酵母感受态细胞） | 第90页 |
| 2.3 实验结果 | 第90-95页 |
| 2.3.1 PHEV-S1基因目的片段的扩增 | 第90-91页 |
| 2.3.2 p MD18-T-PHEV-S1重组克隆载体的构建结果 | 第91页 |
| 2.3.3 诱饵重组载体的构建结果 | 第91-92页 |
| 2.3.4 诱饵蛋白的自激活检测和毒性检测 | 第92页 |
| 2.3.5 重组蛋白在酵母细胞中的表达情况 | 第92-93页 |
| 2.3.6 PHEV-S1诱饵蛋白筛选酵母双杂交c DNA文库 | 第93-94页 |
| 2.3.7 酵母回转实验结果 | 第94-95页 |
| 2.4 讨论 | 第95-97页 |
| 2.5 小结 | 第97-99页 |
| 第3章 Snapin蛋白在PHEV感染中的功能分析 | 第99-111页 |
| 3.1 材料与试剂 | 第99-101页 |
| 3.1.1 细胞、菌株、病毒及相关载体 | 第99页 |
| 3.1.2 相关试剂、抗体和试剂盒 | 第99-100页 |
| 3.1.3 主要的实验仪器 | 第100页 |
| 3.1.4 主要溶液的配制 | 第100-101页 |
| 3.2 实验方法 | 第101-103页 |
| 3.2.1 检测Snapin在PHEV感染中的变化 | 第101页 |
| 3.2.2 间接/直接免疫荧光实验 | 第101-102页 |
| 3.2.3 免疫共沉淀实验 | 第102页 |
| 3.2.4 Snapin si RNA干扰效率检测 | 第102-103页 |
| 3.3 实验结果 | 第103-108页 |
| 3.3.1 PHEV感染后Snapin的变化 | 第103-104页 |
| 3.3.2 直接免疫荧光对PHEV-S1和Snapin的互作进行检测 | 第104页 |
| 3.3.3 PHEV S1蛋白与Snapin相互作用 | 第104-105页 |
| 3.3.4 Snapin影响PHEV的复制 | 第105-106页 |
| 3.3.5 利用间接免疫荧光检测Snapin在PHEV感染后的N2a细胞中的定位变化 | 第106页 |
| 3.3.6 利用间接免疫荧光和WB检测PHEV感染的N2a细胞中的Snapin与LC3 | 第106-107页 |
| 3.3.7 Western blot检测过表达Snapin与干扰Snapin后相关蛋白的变化 | 第107-108页 |
| 3.4 讨论 | 第108-110页 |
| 3.5 小结 | 第110-111页 |
| 结论 | 第111-113页 |
| 参考文献 | 第113-143页 |
| 攻读博士期间发表的学术论文 | 第143-145页 |
| 导师及作者简介 | 第145-147页 |
| 致谢 | 第147页 |
