| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 引言 | 第9-10页 |
| 第一部分 文献综述 | 第10-21页 |
| 一、程序性细胞坏死的研究进展 | 第11-15页 |
| (一) 程序性细胞坏死的启动 | 第11页 |
| (二) 程序性细胞坏死的信号转导 | 第11-12页 |
| (三) 程序性细胞坏死的执行 | 第12-14页 |
| (四) 程序性细胞坏死的清除 | 第14页 |
| (五) 程序性细胞坏死在机体生理和病理过程中的作用 | 第14页 |
| (六) 程序性细胞坏死抑制剂 | 第14-15页 |
| 二、p53的研究进展 | 第15-17页 |
| (一) p53基因概述 | 第15页 |
| (二) p53与细胞死亡 | 第15-16页 |
| (三) p53抑制剂 | 第16-17页 |
| 三、亲环素D的研究进展 | 第17-20页 |
| (一) 亲环素蛋白家族 | 第17页 |
| (二) 亲环素D | 第17-18页 |
| (三) 线粒体通透性转换孔和亲环素D在细胞坏死中所起的作用 | 第18-19页 |
| (四) 亲环素D的抑制剂 | 第19-20页 |
| 四、本研究的目的与意义 | 第20-21页 |
| 第二部分 实验材料与方法 | 第21-35页 |
| 一、实验材料 | 第21-24页 |
| (一) 实验仪器 | 第21页 |
| (二) 实验试剂 | 第21-22页 |
| (三) 主要溶液的配制 | 第22-24页 |
| 二、实验方法 | 第24-35页 |
| (一) 构建CypD真核表达载体 | 第24-28页 |
| (二) 构建p53与CypD相互作用调节剂筛选模型 | 第28-30页 |
| (三) 细胞培养相关技术 | 第30-31页 |
| (四) 磷酸钙法转染细胞 | 第31页 |
| (五) 蛋白免疫印迹分析 | 第31-32页 |
| (六) 荧光素酶活性检测 | 第32-33页 |
| (七) β-半乳糖苷酶活性检测 | 第33页 |
| (八) 细胞的化合物处理 | 第33-34页 |
| (九) 台盼蓝染色 | 第34页 |
| (十) MTT实验 | 第34页 |
| (十一) 统计学分析方法 | 第34-35页 |
| 第三部分 实验结果 | 第35-49页 |
| 一、CypD真核表达载体的构建及基因表达验证 | 第35-37页 |
| (一) CypD真核表达载体的构建 | 第35-36页 |
| (二) CypD的真核表达验证 | 第36-37页 |
| 二、构建CypD与p53相互作用调节剂筛选模型 | 第37-39页 |
| (一) CypD与p53相互作用调节剂筛选模型的构建 | 第37-38页 |
| (二) CypD与p53相互作用调节剂筛选模型的活性检测 | 第38-39页 |
| 三、筛选抑制CypD与p53相互作用的中药化合物 | 第39-46页 |
| 四、目标化合物对细胞坏死的保护作用 | 第46-49页 |
| (一) 利用H_2O_2诱导HEK293T细胞坏死 | 第46-47页 |
| (二) 检测目标化合物对细胞坏死的保护作用 | 第47-49页 |
| 第四部分 讨论 | 第49-53页 |
| 一、构建CypD与p53相互作用调节剂筛选模型 | 第49-50页 |
| 二、筛选抑制CypD与p53相互作用的中药化合物 | 第50-51页 |
| 三、确认目标化合物的作用效果 | 第51-53页 |
| 第五部分 结论 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-61页 |
| 附录 | 第61-63页 |
| 致谢 | 第63-64页 |
| 作者简介 | 第64页 |
