| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5页 |
| 缩略语对照表 | 第6-10页 |
| 第一章 绪论 | 第10-19页 |
| 1.1 肺癌简介 | 第10-11页 |
| 1.2 非小细胞肺癌的临床治疗 | 第11-15页 |
| 1.2.1 顺铂与非小细胞肺癌的临床治疗 | 第11-12页 |
| 1.2.2 非小细胞肺癌顺铂耐药 | 第12-15页 |
| 1.3 新一代测序技术简介 | 第15-18页 |
| 1.3.1 新一代测序技术的原理和应用 | 第15-17页 |
| 1.3.2 新一代测序技术在在顺铂耐药研究中的应用 | 第17-18页 |
| 1.4 立题背景及意义 | 第18-19页 |
| 第二章 人肺腺癌A549细胞顺铂耐药株的构建 | 第19-27页 |
| 2.1 引言 | 第19页 |
| 2.2 材料与设备 | 第19-21页 |
| 2.2.1 细胞株 | 第19页 |
| 2.2.2 主要试剂 | 第19页 |
| 2.2.3 实验仪器 | 第19-20页 |
| 2.2.4 主要溶液的配制 | 第20-21页 |
| 2.3 实验方法 | 第21-23页 |
| 2.3.1 细胞的复苏 | 第21页 |
| 2.3.2 细胞的传代和保藏 | 第21页 |
| 2.3.3 A549顺铂耐药株的构建 | 第21-22页 |
| 2.3.4 细胞耐药性检测 | 第22页 |
| 2.3.5 耐药株与敏感株细胞生长速率比较 | 第22-23页 |
| 2.3.6 耐药株与敏感株细胞细胞凋亡比较 | 第23页 |
| 2.4 实验结果 | 第23-26页 |
| 2.4.1 A549顺铂耐药株形态特征 | 第23-24页 |
| 2.4.2 耐药指数确定 | 第24-25页 |
| 2.4.3 细胞生长曲线及倍增时间 | 第25页 |
| 2.4.4 细胞凋亡情况比较 | 第25-26页 |
| 2.5 小结 | 第26-27页 |
| 第三章 全转录组测序与顺铂耐药相关基因的研究 | 第27-42页 |
| 3.1 引言 | 第27页 |
| 3.2 设备与材料 | 第27-28页 |
| 3.2.1 主要仪器设备 | 第27-28页 |
| 3.2.2 实验材料 | 第28页 |
| 3.3 实验方法 | 第28-30页 |
| 3.3.1 细胞总RNA的提取 | 第28-29页 |
| 3.3.2 转录组测序 | 第29页 |
| 3.3.3 差异表达基因分析 | 第29-30页 |
| 3.3.4 差异基因准确性验证 | 第30页 |
| 3.3.5 差异表达基因功能注释和分析 | 第30页 |
| 3.4 实验结果 | 第30-39页 |
| 3.4.1 RNA质量 | 第30页 |
| 3.4.2 测序数据质量 | 第30-31页 |
| 3.4.3 差异表达基因筛选 | 第31-33页 |
| 3.4.4 测序结果验证 | 第33-34页 |
| 3.4.5 基因及信号通路功能注释 | 第34-39页 |
| 3.4 讨论 | 第39-41页 |
| 3.5 小结 | 第41-42页 |
| 第四章 AKR1家族与A549细胞顺铂耐受的关联研究 | 第42-55页 |
| 4.1 引言 | 第42-43页 |
| 4.2 材料和设备 | 第43-45页 |
| 4.2.1 细胞株 | 第43页 |
| 4.2.2 主要试剂 | 第43页 |
| 4.2.3 主要仪器设备 | 第43-44页 |
| 4.2.4 主要溶液配制 | 第44-45页 |
| 4.3 实验方法 | 第45-47页 |
| 4.3.1 AKR家族基因表达分析 | 第45页 |
| 4.3.2 细胞培养 | 第45页 |
| 4.3.3 抑制剂实验 | 第45-46页 |
| 4.3.4 RNA干扰实验 | 第46页 |
| 4.3.5 细胞活性检测 | 第46页 |
| 4.3.6 细胞凋亡实验 | 第46-47页 |
| 4.4 实验结果 | 第47-52页 |
| 4.4.1 AKR1基因差异表达情况 | 第47页 |
| 4.4.2 AKR1抑制剂细胞毒性 | 第47-48页 |
| 4.4.3 AKR1抑制剂对细胞顺铂敏感性的影响 | 第48-50页 |
| 4.4.4 AKR1基因敲减对A549/DDP细胞顺铂敏感性的影响 | 第50-51页 |
| 4.4.5 AKR1基因敲减对顺铂诱导的细胞凋亡的影响 | 第51-52页 |
| 4.5 讨论 | 第52-53页 |
| 4.6 小结 | 第53-55页 |
| 全文总结 | 第55-57页 |
| 参考文献 | 第57-63页 |
| 攻读硕士学位期间取得的科研成果 | 第63-64页 |
| 致谢 | 第64-65页 |
| 作者简介 | 第65页 |
