摘要 | 第6-8页 |
Abstract | 第8-9页 |
英文缩略表 | 第16-17页 |
第一章 引言 | 第17-24页 |
1.1 大豆脂肪酸概述 | 第17-18页 |
1.1.1 大豆脂肪酸组分 | 第17页 |
1.1.2 脂肪酸的主要功能 | 第17页 |
1.1.3 脂肪酸含量测定 | 第17-18页 |
1.1.4 大豆脂肪酸遗传机制 | 第18页 |
1.2 脂肪酸合成路径及相关调节 | 第18-20页 |
1.2.1 大豆脂肪酸合成路径 | 第18-19页 |
1.2.2 脂肪酸合成关键酶调节 | 第19页 |
1.2.3 脂肪酸相关转录因子调节 | 第19-20页 |
1.2.4 Dof转录因子调节 | 第20页 |
1.3 大豆脂肪酸QTL定位 | 第20-21页 |
1.4 脂肪酸相关基因克隆研究及技术 | 第21-23页 |
1.4.1 脂肪酸关键酶基因克隆 | 第21页 |
1.4.2 脂肪酸相关转录因子基因克隆 | 第21-22页 |
1.4.3 SNPs检测 | 第22页 |
1.4.4 RT-PCR技术 | 第22-23页 |
1.5 本研究的目的与意义 | 第23-24页 |
第二章 定性定量检测大豆脂肪酸组分的气相色谱方法 | 第24-32页 |
2.1 材料方法 | 第24-25页 |
2.1.1 供试材料 | 第24页 |
2.1.2 试验试剂 | 第24页 |
2.1.3 脂肪酸组分的气相色谱检测条件 | 第24页 |
2.1.4 脂肪酸标准曲线的制作 | 第24页 |
2.1.5 豆粉脂肪酸提取 | 第24-25页 |
2.1.6 粗脂肪的NIRS检测 | 第25页 |
2.1.7 数据统计分析 | 第25页 |
2.2 结果分析 | 第25-28页 |
2.2.1 大豆脂肪酸组分的定性分析 | 第25页 |
2.2.2 脂肪酸甲酯标准曲线的制作 | 第25页 |
2.2.3 两种大豆脂肪酸提取方法测定效果比较 | 第25-26页 |
2.2.4 方法重现性分析 | 第26-28页 |
2.3 讨论 | 第28-31页 |
2.3.1 不同脂肪酸检测方法的比较 | 第28-31页 |
2.3.2 豆粉中的脂肪酸甲酯化充分与否是保证检测准确性的关键 | 第31页 |
2.4 本章小结 | 第31-32页 |
第三章 基于SSR标记的大豆脂肪酸加性及上位性QTL分析 | 第32-45页 |
3.1 材料与方法 | 第32-33页 |
3.1.1 试验材料与田间设计 | 第32页 |
3.1.2 大豆籽粒脂肪酸的提取与检测 | 第32页 |
3.1.3 分子标记与基因型分析 | 第32-33页 |
3.1.4 连锁图谱构建和数据分析 | 第33页 |
3.2 结果与分析 | 第33-41页 |
3.2.1 大豆籽粒脂肪酸各组分含量的表型分析 | 第33-36页 |
3.2.2 大豆脂肪酸组分相关性分析 | 第36页 |
3.2.3 大豆脂肪酸主要组分QTL定位分析 | 第36-38页 |
3.2.4 大豆脂肪酸QTL间信息比对分析 | 第38-39页 |
3.2.5 大豆脂肪酸上位性QTL分析 | 第39-41页 |
3.3 讨论 | 第41-44页 |
3.3.1 脂肪酸为数量性状受环境影响 | 第41-42页 |
3.3.2 控制脂肪酸组分QTL间的比较分析 | 第42-44页 |
3.3.3 微效QTL的局限性 | 第44页 |
3.4 本章小结 | 第44-45页 |
第四章 基于SNP标记的大豆脂肪酸组分的QTL分析 | 第45-55页 |
4.1 材料与方法 | 第45页 |
4.1.1 试验材料 | 第45页 |
4.1.2 试验方法 | 第45页 |
4.2 结果与分析 | 第45-49页 |
4.2.1 大豆RIL群体脂肪酸组分分析 | 第45-47页 |
4.2.2 与脂肪酸组分相关的加性QTL分析 | 第47-48页 |
4.2.3 与脂肪酸组分相关的上位性QTL分析 | 第48页 |
4.2.4 与脂肪酸组分相关的环境互作QTL分析 | 第48-49页 |
4.3 讨论 | 第49页 |
4.3.1 基于SNP标记构建的高密度图谱定位结果与基于SSR标记定位结果的比较 | 第49页 |
4.3.2 脂肪酸相关QTL区间内及同一连锁群上相关基因分析 | 第49页 |
4.4 本章小结 | 第49-55页 |
第五章 调控大豆脂肪酸合成的相关候选基因筛选、克隆及表达模式分析 | 第55-68页 |
5.1 试验材料与试剂 | 第55-57页 |
5.1.1 试验材料 | 第55页 |
5.1.2 菌株 | 第55页 |
5.1.3 工具酶及生化试剂 | 第55页 |
5.1.4 主要机器设备 | 第55-56页 |
5.1.5 PCR引物 | 第56-57页 |
5.2 试验方法 | 第57-59页 |
5.2.1 不同时期大豆种子脂肪酸的提取 | 第57页 |
5.2.2 GC气相色谱法检测大豆种子中脂肪酸含量 | 第57页 |
5.2.3 大豆叶片DNA、RNA提取及cDNA的合成 | 第57页 |
5.2.4 目的片段的克隆及产物回收 | 第57页 |
5.2.5 目的DNA片段与T载体的连接及大肠杆菌感受态细胞的转化 | 第57页 |
5.2.6 质粒DNA的提取 | 第57页 |
5.2.7 基因编码序列的获得与比较分析 | 第57-58页 |
5.2.8 Gm08DOF-1 和Gm20MYB-1 的差异性引物的群体检测 | 第58页 |
5.2.9 Real-time PCR分析 | 第58-59页 |
5.2.10 数据整理与统计分析 | 第59页 |
5.3 结果与分析 | 第59-66页 |
5.3.1 两个转录因子的编码序列的比对 | 第59-60页 |
5.3.2 两个转录因子基因与脂肪酸组分的连锁关系分析 | 第60-63页 |
5.3.3 种子发育过程中脂肪酸含量变化趋势 | 第63-64页 |
5.3.4 两基因的时空表达变化与脂肪酸含量的相关性 | 第64页 |
5.3.5 脂肪酸合成相关酶基因的表达变化与脂肪酸含量的相关性 | 第64-66页 |
5.4 讨论 | 第66-67页 |
5.4.1 基于参考基因组序列对比,可加速精细QTL区间相关基因的克隆与功能验证 | 第66页 |
5.4.2 大豆脂肪酸在不同品种种子发育过程中积累变化存在差异 | 第66页 |
5.4.3 调节脂肪酸合成相关酶基因的表达可能改变大豆种子中的脂肪酸配比 | 第66-67页 |
5.5 本章小结 | 第67-68页 |
第六章 全文结论 | 第68-70页 |
参考文献 | 第70-77页 |
附录 | 第77-80页 |
致谢 | 第80-81页 |
作者简介 | 第81页 |