摘要 | 第5-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
缩略表 | 第8-12页 |
1 引言 | 第12-23页 |
1.1 胚胎体外培养研究背景 | 第12页 |
1.1.1 哺乳动物的早期胚胎体外培养研究背景 | 第12页 |
1.1.2 小鼠早期胚胎体外培养研究背景 | 第12页 |
1.2 早期胚胎体外培养体系的建立 | 第12-18页 |
1.2.1 早期胚胎体外培养体系:培养基 | 第12-13页 |
1.2.2 早期胚胎体外培养体系:共培养 | 第13-14页 |
1.2.3 早期胚胎体外培养体系:胚胎密度 | 第14页 |
1.2.4 早期胚胎体外培养体系:培养系统 | 第14-18页 |
1.3 早期胚胎体内发育环境 | 第18-19页 |
1.3.1 早期胚胎在输卵管内的动态变化 | 第18-19页 |
1.3.2 输卵管内环境的周期性变化 | 第19页 |
1.4 胚胎体外发育的量化标准与质量评估 | 第19-20页 |
1.5 嵌合体的制备 | 第20-21页 |
1.5.1 诱导多能干细胞概述 | 第20页 |
1.5.2 恒河猴胚胎内细胞团样干细胞的建立 | 第20-21页 |
1.5.3 诱导多能干细胞的验证方法 | 第21页 |
1.6 本研究的意义及其主要内容 | 第21-23页 |
2 材料与方法 | 第23-41页 |
2.1 实验材料 | 第23-25页 |
2.1.1 实验试剂及药品 | 第23页 |
2.1.2 实验仪器与耗材 | 第23-24页 |
2.1.3 主要试剂配置 | 第24-25页 |
2.2 实验动物 | 第25-27页 |
2.2.1 实验小鼠的饲养与管理 | 第25页 |
2.2.2 小鼠发情判定 | 第25-26页 |
2.2.3 结扎雄鼠的制备 | 第26页 |
2.2.4 受体母鼠的准备 | 第26-27页 |
2.2.5 小鼠超数排卵 | 第27页 |
2.2.6 拾卵针的制备 | 第27页 |
2.2.7 胚胎收集 | 第27页 |
2.3 胚胎培养方法的建立 | 第27-31页 |
2.3.1 设计原理 | 第27-28页 |
2.3.2 材料 | 第28页 |
2.3.3 制作方法 | 第28-30页 |
2.3.4 毛细管培养 | 第30页 |
2.3.5 微滴培养 | 第30-31页 |
2.4 胚胎发育判定方法 | 第31-34页 |
2.4.1 胚胎发育观察判定标准 | 第31-32页 |
2.4.2 囊胚细胞染色计数 | 第32页 |
2.4.3 胚胎贴壁能力检测 | 第32-33页 |
2.4.4 胚胎移植--非手术法 | 第33-34页 |
2.5 恒河猴内胚层样可诱导多能干细胞与小鼠体外培养胚胎的嵌合实验 | 第34-39页 |
2.5.1 细胞准备 | 第34-35页 |
2.5.2 显微注射 | 第35-37页 |
2.5.3 胚胎移植及剖腹产 | 第37页 |
2.5.4 小鼠胚胎免疫组化 | 第37-38页 |
2.5.5 小鼠全胚免疫荧光鉴定 | 第38-39页 |
2.6 实验设计 | 第39-40页 |
2.6.1 不同毛细管粗细规格比较 | 第39页 |
2.6.2 不同转速比较 | 第39页 |
2.6.3 不同培养方法对小鼠 2-细胞胚胎发育率的影响 | 第39页 |
2.6.4 不同培养方法对小鼠 2-细胞胚胎单胚胎发育率的影响 | 第39-40页 |
2.6.5 不同培养方法对小鼠受精卵发育率的影响 | 第40页 |
2.6.6 毛细管培养法与体内胚胎发育情况的比较 | 第40页 |
2.6.7 嵌合体的制备 | 第40页 |
2.6.8 嵌合体胚胎的培养 | 第40页 |
2.7 统计学分析 | 第40-41页 |
3 结果与分析 | 第41-48页 |
3.1 不同毛细管粗细规格比较 | 第41页 |
3.2 不同转速比较 | 第41页 |
3.3 2-细胞胚胎微滴培养与毛细管培养 | 第41-42页 |
3.4 2-细胞微滴单个胚胎培养与毛细管单个胚胎培养 | 第42页 |
3.5 1-细胞胚胎培养 | 第42-45页 |
3.6 毛细管培养法与体内发育情况的比较 | 第45页 |
3.7 嵌合体胚胎的制备 | 第45-47页 |
3.8 毛细管培养嵌合体胚胎 | 第47-48页 |
4 讨论 | 第48-51页 |
4.1 毛细管培养法优于微滴培养 | 第48页 |
4.2 毛细管培养法的优势 | 第48页 |
4.3 毛细管培养法模拟了输卵管内环境 | 第48-49页 |
4.4 毛细管培养法支持单个胚胎培养 | 第49页 |
4.5 毛细管培养法与体内发育同步 | 第49-50页 |
4.6 异种胚胎嵌合体的制备、培养、与鉴定 | 第50-51页 |
5 结论 | 第51-52页 |
参考文献 | 第52-58页 |
在读期间发表的论文 | 第58-59页 |
作者简历 | 第59-60页 |
致谢 | 第60-61页 |