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浮丝藻中微囊藻毒素基因的检测技术及在环境中变异研究

摘要第6-8页
Abstract第8-10页
第一章 文献综述第16-32页
    1.1 藻毒素对土壤和水体的环境意义第16-23页
        1.1.1 蓝藻毒素介绍第16-17页
        1.1.2 藻毒素土壤中的危害第17-20页
        1.1.3 水体中的危害第20-23页
    1.2 微囊藻毒素的研究第23-26页
        1.2.1 MC的结构第23-24页
        1.2.2 MC的毒性第24-25页
        1.2.3 MC的迁移和转化第25-26页
    1.3 微囊藻毒素基因的研究第26-32页
        1.3.1 mcy的基因组成及其功能第27-28页
        1.3.2 不同蓝藻mcy基因的对比第28-29页
        1.3.3 微囊藻毒素基因(mcy)的变异第29-32页
第二章 研究内容与方法第32-38页
    2.1 选题依据第32-34页
        2.1.1 土壤藻类广泛分布第32页
        2.1.2 藻类毒素的环境危害第32页
        2.1.3 微囊藻毒素基因簇(mcy)研究的必要性第32-33页
        2.1.4 浮丝藻的选择第33-34页
        2.1.5 未培养的研究方法第34页
    2.2 研究目的和意义第34-35页
        2.2.1 研究目的第34-35页
        2.2.2 研究意义第35页
    2.3 研究内容第35-36页
        2.3.1 单个浮丝藻的微量DNA提取及保存技术第35页
        2.3.2 微囊藻毒素基因的引物体系设计第35页
        2.3.3 浮丝藻中微囊藻毒素基因簇内的变异第35-36页
        2.3.4 转座子ISPlr1在mcy基因内的变化研究第36页
        2.3.5 各变异在地理上和时间上的变化及其相互关系第36页
    2.4 主要的研究方法与技术第36-37页
        2.4.1 单个浮丝藻的采样及分离技术第36页
        2.4.2 超声波提取浮丝藻DNA第36页
        2.4.3 安捷伦2100生物芯片分析技术第36-37页
        2.4.4 Phire热启动植物聚合酶的直接PCR技术第37页
    2.5 技术路线第37-38页
第三章 单个浮丝藻的DNA提取及保存第38-50页
    3.1 材料和方法第39-41页
        3.1.1 供试样品第39页
        3.1.2 试验设计第39-40页
        3.1.3 DNA提取第40页
        3.1.4 DNA扩增第40-41页
        3.1.5 数据分析第41页
        3.1.6 试剂第41页
    3.2 试验结果第41-48页
        3.2.1 单个浮丝藻DNA质量分析第41-42页
        3.2.2 超声波制备浮丝藻DNA参数优化第42-45页
        3.2.3 DNA保存技术第45-48页
    3.3 讨论第48页
    3.4 本章小结第48-50页
第四章 极限条件下微囊藻毒素基因簇引物体系的建立第50-63页
    4.1 材料方法第51-53页
        4.1.1 供试DNA样品第51页
        4.1.2 实验设计第51-53页
        4.1.3 DNA扩增第53页
        4.1.4 试剂第53页
    4.2 结果分析第53-61页
        4.2.1 引物设计限制条件第53-56页
        4.2.2 mcy基因簇的引物体系设计第56-59页
        4.2.3 引物体系的检测第59-61页
    4.3 讨论第61-62页
        4.3.1 浮丝藻DNA的利用第61页
        4.3.2 微囊藻毒素的全序列引物第61-62页
    4.4 本章小结第62-63页
第五章 微囊藻毒素基因簇内的变异第63-74页
    5.1 材料和方法第63-65页
        5.1.1 样品的采集第63页
        5.1.2 浮丝藻的分离第63-64页
        5.1.3 DNA的提取第64页
        5.1.4 保守序列分析第64页
        5.1.5 DNA扩增第64-65页
    5.2 结果分析第65-69页
        5.2.1 微囊藻毒素基因内簇内发现的变异第65-67页
        5.2.2 微囊藻毒素基因簇内的重复序列第67页
        5.2.3 mcy基因变异在亚种群中的变化第67-68页
        5.2.4 微囊藻毒素基因变异间的进化第68-69页
    5.3 讨论第69-72页
        5.3.1 mcy基因中变异的发现第69-71页
        5.3.2 特殊重复序列的意义第71页
        5.3.3 mcy基因变异间的互相关系第71-72页
        5.3.4 mcy基因变异的系统发育年龄第72页
    5.4 本章小结第72-74页
第六章 转座子ISPlr1在mcy基因内的变化研究第74-81页
    6.1 材料和方法第74-75页
        6.1.1 DNA样品第74页
        6.1.2 引物设计第74-75页
        6.1.3 DNA扩增第75页
    6.2 结果分析第75-79页
        6.2.1 转座子ISPlr1的插入位点第75-76页
        6.2.2 转座子ISPlr1插入的正向重复序列第76-77页
        6.2.3 转座子ISPlr1的方向第77-79页
    6.3 讨论第79-80页
        6.3.1 转座子的灵活性第79页
        6.3.2 转座子与RR序列第79-80页
    6.4 本章小结第80-81页
第七章 微囊藻毒素基因变异在时间和空间上的分布第81-90页
    7.1 材料和方法第81-83页
        7.1.1 采样第81-82页
        7.1.2 DNA提取第82-83页
        7.1.3 DNA扩增第83页
    7.2 结果与分析第83-88页
        7.2.1 浮丝藻长度与DNA扩增结果间关系第83-84页
        7.2.2 地理分布对浮丝藻微囊藻毒素基因的影响第84-86页
        7.2.3 季节变化对浮丝藻微囊藻毒素基因的影响第86-88页
    7.3 讨论第88页
        7.3.1 浮丝藻长度与DNA扩增结果间关系第88页
        7.3.2 mcy基因变异的时空变化第88页
    7.4 本章小结第88-90页
第八章 硫酸盐对厌氧水稻土中光合与铁循环过程的影响第90-100页
    8.1 材料与方法第91-92页
        8.1.1 供试土壤第91页
        8.1.2 试验设计和培养方法第91页
        8.1.3 采样及检测方法第91页
        8.1.4 数据分析第91-92页
    8.2 研究结果第92-96页
        8.2.1 暗光条件下Fe(II)含量变化第92-93页
        8.2.2 Chl a浓度变化第93-95页
        8.2.3 光照条件下Fe(II)的变化第95-96页
        8.2.4 pH变化第96页
    8.3 讨论第96-99页
        8.3.1 铁还原过程第96-97页
        8.3.2 光合过程第97-98页
        8.3.3 铁氧化过程第98页
        8.3.4 pH变化第98-99页
    8.4 小结第99-100页
第九章 中国典型水稻土中硫酸盐变化对土壤藻的影响第100-112页
    9.1 材料方法第101-102页
        9.1.1 样品采集第101页
        9.1.2 实验设计第101页
        9.1.3 实验分析与测定第101-102页
        9.1.4 数据分析第102页
    9.2 结果分析第102-108页
        9.2.1 不同浓度硫酸盐淹水培养后对Chl a含量变化的影响第102-103页
        9.2.2 不同浓度硫酸盐淹水培养后对DOC含量变化的影响第103-105页
        9.2.3 硫酸盐淹水培养水稻土后藻类种群的变化第105-106页
        9.2.4 硫酸盐淹水培养水稻土后SUVA254的变化第106页
        9.2.5 硫酸盐淹水培养水稻土后荧光指数的变化第106-107页
        9.2.6 三维荧光及平行因子分析第107-108页
    9.3 讨论第108-110页
        9.3.1 硫酸盐对藻类群落的影响第108-109页
        9.3.2 硫酸盐对DOC的影响第109-110页
        9.3.3 硫酸盐对DOM的影响第110页
    9.4 本章小结第110-112页
第十章 结论与展望第112-115页
    10.1 本文的主要结论第112-114页
    10.2 论文创新点第114页
    10.3 有待进一步研究的问题第114-115页
参考文献第115-130页
缩略词第130-131页
致谢第131-132页
作者简介第132页

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