| 中文摘要 | 第3-5页 |
| 英文摘要 | 第5-6页 |
| 主要缩略词 | 第11-13页 |
| 1 绪论 | 第13-27页 |
| 1.1 提出问题和意义 | 第14-17页 |
| 1.2 国内外研究现状 | 第17-24页 |
| 1.2.1 Stat3在UVB诱导皮肤癌中的作用 | 第17-19页 |
| 1.2.2 新一代原癌基因CIRP | 第19-24页 |
| 1.3 研究目的以及研究内容 | 第24-27页 |
| 1.3.1 研究目的 | 第24页 |
| 1.3.2 主要研究内容 | 第24-25页 |
| 1.3.3 本研究的创新性 | 第25-27页 |
| 2 CIRP在皮肤癌细胞以及UVB诱导的角质细胞中的表达 | 第27-47页 |
| 2.1 前言 | 第27-28页 |
| 2.2 实验仪器、材料与试剂 | 第28-30页 |
| 2.2.1 实验仪器 | 第28页 |
| 2.2.2 实验材料与试剂 | 第28-30页 |
| 2.3 实验方法 | 第30-39页 |
| 2.3.1 细胞复苏、培养及冻存 | 第30-31页 |
| 2.3.2 Western blot | 第31-33页 |
| 2.3.3 总RNA提取以及反转录 | 第33页 |
| 2.3.4 重组载体构建（pLNCX2-GFP, pLNCX2-GFP-CIRP） | 第33-37页 |
| 2.3.5 质粒瞬时转染 | 第37页 |
| 2.3.6 构建稳定表达GFP以及GFP-CIRP融合蛋白的HaCaT细胞株 | 第37-38页 |
| 2.3.7 UVB照射处理 | 第38页 |
| 2.3.8 免疫荧光染色 | 第38-39页 |
| 2.3.9 数据统计分析 | 第39页 |
| 2.4 实验结果 | 第39-44页 |
| 2.4.1 细胞培养 | 第39-40页 |
| 2.4.2 CIRP在皮肤癌细胞以及低剂量UVB诱导的角质细胞中表达上调 | 第40页 |
| 2.4.3 重组质粒pLNCX2-GFP和pLNCX2-GFP-CIRP的构建 | 第40-43页 |
| 2.4.4 低剂量UVB照射处理后CIRP在角质细胞中的定位 | 第43-44页 |
| 2.5 讨论 | 第44-45页 |
| 2.6 本章小结 | 第45-47页 |
| 3 低剂量UVB慢性暴露诱导角质细胞转化 | 第47-57页 |
| 3.1 前言 | 第47页 |
| 3.2 实验仪器、材料与试剂 | 第47-49页 |
| 3.2.1 实验仪器 | 第47-48页 |
| 3.2.2 实验材料与试剂 | 第48-49页 |
| 3.3 实验方法 | 第49-52页 |
| 3.3.1 UVB照射处理 | 第49-50页 |
| 3.3.2 Western blot | 第50-51页 |
| 3.3.3 细胞活性检测 | 第51页 |
| 3.3.4 克隆生成实验 | 第51页 |
| 3.3.5 数据统计分析 | 第51-52页 |
| 3.4 实验结果 | 第52-54页 |
| 3.4.1 低剂量UVB慢性暴露诱导HaCaT细胞转化 | 第52-53页 |
| 3.4.2 不同剂量UVB照射处理后HaCaT和HaCaTt细胞的生存能力 | 第53-54页 |
| 3.5 讨论 | 第54-55页 |
| 3.6 本章小结 | 第55-57页 |
| 4 沉默CIRP基因对角质细胞响应UVB照射的影响 | 第57-75页 |
| 4.1 前言 | 第57-58页 |
| 4.2 实验仪器、材料与试剂 | 第58-61页 |
| 4.2.1 实验仪器 | 第58-59页 |
| 4.2.2 实验材料与试剂 | 第59-61页 |
| 4.3 实验方法 | 第61-65页 |
| 4.3.1 CIRP shRNA重组载体构建 | 第61-63页 |
| 4.3.2 质粒瞬时转染 | 第63页 |
| 4.3.3 构建稳定表达scrambled-shRNA以及CIRP-shRNA | 第63-64页 |
| 4.3.4 UVB照射处理 | 第64页 |
| 4.3.5 Western blot | 第64页 |
| 4.3.6 RNA干扰实验 | 第64页 |
| 4.3.7 细胞活性检测 | 第64-65页 |
| 4.3.8 数据统计分析 | 第65页 |
| 4.4 实验结果 | 第65-72页 |
| 4.4.1 重组质粒pLKO.1-scrambled-shRNA和pLKO.1-CIRP-shRNA | 第65-66页 |
| 4.4.2 构建shRNA稳定沉默CIRP基因的HaCaT细胞株 | 第66-67页 |
| 4.4.3 shRNA稳定沉默CIRP基因增强HaCaT细胞对UVB照射的敏感性 | 第67-69页 |
| 4.4.4 siRNA瞬时沉默CIRP基因增强HaCaT细胞对UVB照射的敏感性 | 第69-72页 |
| 4.5 讨论 | 第72-73页 |
| 4.6 本章小结 | 第73-75页 |
| 5 稳定过表达CIRP基因对角质细胞响应UVB照射的影响 | 第75-85页 |
| 5.1 前言 | 第75页 |
| 5.2 实验仪器、材料与试剂 | 第75-78页 |
| 5.2.1 实验仪器 | 第75-76页 |
| 5.2.2 实验材料与试剂 | 第76-78页 |
| 5.3 实验方法 | 第78-80页 |
| 5.3.1 CIRP过表达重组载体构建 | 第78-79页 |
| 5.3.2 质粒瞬时转染 | 第79页 |
| 5.3.3 构建稳定过表达CIRP的HaCaT细胞株 | 第79-80页 |
| 5.3.4 UVB照射处理 | 第80页 |
| 5.3.5 Western blot | 第80页 |
| 5.3.6 细胞活性检测 | 第80页 |
| 5.3.7 数据统计分析 | 第80页 |
| 5.4 实验结果 | 第80-84页 |
| 5.4.1 重组质粒pLenti CMV CIRP的构建 | 第80-82页 |
| 5.4.2 构建CIRP稳定过表达的HaCaT细胞株 | 第82-83页 |
| 5.4.3 稳定过表达CIRP基因降低HaCaT细胞对UVB照射的敏感性 | 第83-84页 |
| 5.5 讨论 | 第84页 |
| 5.6 本章小结 | 第84-85页 |
| 6 CIRP-p-Stat3调控低剂量UVB诱导的Bag-1/S表达变化 | 第85-99页 |
| 6.1 前言 | 第85页 |
| 6.2 实验仪器、材料与试剂 | 第85-88页 |
| 6.2.1 实验仪器 | 第85-86页 |
| 6.2.2 实验材料与试剂 | 第86-88页 |
| 6.3 实验方法 | 第88-91页 |
| 6.3.1 Bag-1/S过表达重组载体构建 | 第88-90页 |
| 6.3.2 质粒瞬时转染 | 第90页 |
| 6.3.3 构建稳定过表达Bag-1/S的HaCaT细胞株 | 第90页 |
| 6.3.4 药物S3I-201处理以及药物低剂量UVB联合处理HaCaT细胞 | 第90页 |
| 6.3.5 UVB照射处理 | 第90页 |
| 6.3.6 S3I-201的细胞毒性检测 | 第90-91页 |
| 6.3.7 Western blot | 第91页 |
| 6.3.8 细胞活性检测 | 第91页 |
| 6.3.9 数据统计分析 | 第91页 |
| 6.4 实验结果 | 第91-97页 |
| 6.4.1 低剂量UVB诱导Bag-1/S表达上调需要激活Stat3 | 第91-92页 |
| 6.4.2 构建Bag-1/S稳定过表达的HaCaT细胞株 | 第92-94页 |
| 6.4.3 CIRP-Stat3-Bag-1/S信号调控UVB照射后HaCaT细胞的存活和增殖 | 第94-97页 |
| 6.5 讨论 | 第97-98页 |
| 6.6 本章小结 | 第98-99页 |
| 7 CIRP以及Bag-1/S调控UVB诱导的角质细胞凋亡 | 第99-107页 |
| 7.1 前言 | 第99页 |
| 7.2 实验仪器、材料与试剂 | 第99-101页 |
| 7.2.1 实验仪器 | 第99-100页 |
| 7.2.2 实验材料与试剂 | 第100-101页 |
| 7.3 实验方法 | 第101-102页 |
| 7.3.1 RNA干扰实验 | 第101-102页 |
| 7.3.2 UVB照射处理 | 第102页 |
| 7.3.3 Western blot | 第102页 |
| 7.4 实验结果 | 第102-104页 |
| 7.4.1 CIRP和Bag-1/S调控UVB诱导的细胞凋亡 | 第102-103页 |
| 7.4.2 Bag-1/S过表达抑制UVB诱导的细胞凋亡 | 第103-104页 |
| 7.5 讨论 | 第104-105页 |
| 7.6 本章小结 | 第105-107页 |
| 8 结论与展望 | 第107-111页 |
| 8.1 主要结论 | 第107-109页 |
| 8.2 工作展望 | 第109-111页 |
| 致谢 | 第111-113页 |
| 参考文献 | 第113-131页 |
| 附录 作者在攻读博士学位期间发表论文及专利情况 | 第131页 |
