| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 第一章 前言 | 第8-19页 |
| 1 EpCAM的简介 | 第8-17页 |
| 1.1 EpCAM蛋白的结构和表达 | 第8-11页 |
| 1.2 EpCAM的活化 | 第11-12页 |
| 1.3 EpCAM的一般功能 | 第12-13页 |
| 1.4 EpCAM对癌细胞增殖的作用 | 第13-14页 |
| 1.5 EpCAM在肿瘤形成中的作用 | 第14页 |
| 1.6 EpCAM在癌症侵袭和转移中的作用 | 第14-16页 |
| 1.7 EpCAM在肿瘤诊断和治疗中的作用 | 第16页 |
| 1.8 EpCAM在癌细胞耐药性中的作用 | 第16-17页 |
| 2 单克隆抗体 | 第17页 |
| 3 噬菌体展示技术 | 第17-18页 |
| 4 抗体片段和人源单域抗体 | 第18-19页 |
| 第二章 材料和方法 | 第19-35页 |
| 1 实验材料 | 第19-25页 |
| 1.1 实验仪器 | 第19-20页 |
| 1.2 主要实验试剂 | 第20-21页 |
| 1.3 主要试剂的配制方法 | 第21-25页 |
| 2 实验方法 | 第25-35页 |
| 2.1 制备辅助噬菌体 | 第25-26页 |
| 2.2 制备噬菌体单域抗体文库 | 第26页 |
| 2.3 纯化噬菌体单域抗体文库 | 第26页 |
| 2.4 筛选噬菌体单域抗体文库 | 第26-27页 |
| 2.5 单克隆噬菌体ELSIA | 第27-28页 |
| 2.6 单域抗体的PCR扩增 | 第28-29页 |
| 2.7 DNA琼脂糖凝胶电泳 | 第29页 |
| 2.8 PCR产物的切胶回收 | 第29-30页 |
| 2.9 双酶切反应 | 第30-31页 |
| 2.10 酶连反应 | 第31页 |
| 2.11 DH5α和BL21（DE3）大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第31页 |
| 2.12 将连接产物或质粒转化感受态细胞 | 第31-32页 |
| 2.13 菌液PCR及DNA测序 | 第32页 |
| 2.14 质粒小量抽提 | 第32-33页 |
| 2.15 单域抗体的原核表达 | 第33-34页 |
| 2.16 表达的蛋白质的亲和纯化步骤 | 第34页 |
| 2.17 统计学分析 | 第34-35页 |
| 第三章 实验结果 | 第35-56页 |
| 1 噬菌体单域抗体文库的制备 | 第35页 |
| 2 抗原片段的选择和制备 | 第35-40页 |
| 3 噬菌体单域抗体文库的筛选 | 第40-42页 |
| 4 单克隆噬菌体单域抗体的初步筛选 | 第42-44页 |
| 5 单克隆噬菌体抗体与抗原结合特异性的分析 | 第44-45页 |
| 6 单域抗体的氨基酸序列 | 第45-47页 |
| 7 单克隆噬菌体单域抗体与完整的EpCAM蛋白结合的检测 | 第47-48页 |
| 8 单域抗体的表达纯化 | 第48-54页 |
| 9 纯化的单域抗体与EpCAM抗原结合的检测 | 第54-56页 |
| 第四章 讨论 | 第56-58页 |
| 第五章 结论 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-66页 |
| 在校期间发表论文情况 | 第66-67页 |
| 致谢 | 第67页 |