中文摘要 | 第1-4页 |
英文摘要 | 第4-10页 |
1 绪论 | 第10-18页 |
·问题的提出 | 第10-12页 |
·光对叶绿体发育的研究 | 第10-11页 |
·光信号传导途径的研究 | 第11-12页 |
·光输入途径的其它调节因子的研究 | 第12-15页 |
·LIR1 蛋白的研究进展 | 第15-16页 |
·课题研究的目的、意义 | 第16页 |
·课题研究的内容及技术路线 | 第16-17页 |
·研究内容 | 第16页 |
·研究技术路线 | 第16-17页 |
·本研究的创新点 | 第17-18页 |
2 OsLIR1 的克隆与生物信息学分析 | 第18-28页 |
·实验用品 | 第18-19页 |
·植物材料和菌株 | 第18页 |
·实验试剂 | 第18页 |
·主要的实验仪器 | 第18-19页 |
·引物序列 | 第19页 |
·实验方法 | 第19-21页 |
·水稻RNA 的提取 | 第19页 |
·水稻cDNA 的反转录 | 第19页 |
·OsLIR1 的克隆 | 第19-20页 |
·半定量RT-PCR 检测OsLIR1 的特异性表达 | 第20-21页 |
·结果与分析 | 第21-26页 |
·水稻RNA 的提取 | 第21页 |
·OsLIR1 的PCR 扩增 | 第21页 |
·OsLIR1 的酶切鉴定 | 第21-22页 |
·OsLIR1 的序列结果 | 第22页 |
·OsLIR1 的生物信息学分析 | 第22-26页 |
·OsLIR1 的组织特异性表达 | 第26页 |
·讨论 | 第26-28页 |
3 OsLIR1 超表达载体的构建及转基因烟草的功能鉴定 | 第28-34页 |
·实验用品 | 第28页 |
·植物材料及载体 | 第28页 |
·实验试剂及仪器 | 第28页 |
·培养基及缓冲液 | 第28页 |
·实验方法 | 第28-30页 |
·超表达载体g-pCAMBIA1301-OsLIR1 的构建 | 第28-29页 |
·植物表达载体转化农杆菌 | 第29页 |
·转基因烟草方法 | 第29-30页 |
·转基因烟草中OsLIR1 基因的转录水平检测 | 第30页 |
·结果与分析 | 第30-32页 |
·表达载体g-pCAMBIA1301-OsLIR1 的酶切鉴定 | 第30-31页 |
·载体g-pCAMBIA1301- OsLIR1 转化农杆菌的PCR 鉴定 | 第31页 |
·转基因烟草检测 | 第31-32页 |
·PCR 检测OsLIR1 在转基因烟草中的表达 | 第32页 |
·RT-PCR 检测OsLIR1 在转基因烟草中的表达 | 第32页 |
·讨论 | 第32-34页 |
4 OsLIR1 超表达和反义载体的构建及转化水稻的功能鉴定 | 第34-45页 |
·材料与试剂 | 第34页 |
·植物材料和菌株 | 第34页 |
·化学试剂 | 第34页 |
·培养基及缓冲液 | 第34页 |
·实验方法 | 第34-38页 |
·表达载体PCUPHN-OsLIR1 的构建 | 第34-35页 |
·干扰载体的构建 | 第35-36页 |
·转基因水稻方法 | 第36-37页 |
·转基因水稻OsLIR1 的超表达及干扰的转录水平检测 | 第37页 |
·OsLIR1 超表达转基因水稻根的叶绿体超微结构观察样品制备 | 第37-38页 |
·结果与分析 | 第38-43页 |
·载体的酶切鉴定 | 第38-39页 |
·载体转化农杆菌的PCR 鉴定 | 第39-40页 |
·g-pCAMBIA1301-OsLIR1 超表达载体转水稻 | 第40-42页 |
·g-pCAMBIA1301-OsLIR1 反义载体转水稻 | 第42-43页 |
·讨论 | 第43-45页 |
5 OsLIR1 启动子的克隆、生物信息学分析及遗传转化 | 第45-54页 |
·实验用品 | 第45页 |
·实验方法 | 第45-46页 |
·水稻DNA 的提取 | 第45页 |
·OsLIR1 启动子的克隆 | 第45页 |
·OsLIR1 启动子的序列分析 | 第45页 |
·OsLIR1 启动子表达载体的构建及转化农杆菌 | 第45-46页 |
·OsLIR1 启动子表达载体转洋葱的瞬时检测 | 第46页 |
·RT-PCR 检测转基因烟草的GUS 表达 | 第46页 |
·结果与分析 | 第46-53页 |
·OsLIR1 启动子的克隆 | 第46-47页 |
·OsLIR1 启动子的序列分析 | 第47-50页 |
·OsLIR1 启动子表达载体的酶切鉴定及转化 | 第50-51页 |
·洋葱的瞬时表达检测 | 第51页 |
·转基因烟草的表达检测 | 第51-52页 |
·RT-PCR 检测转基因烟草的启动子活性 | 第52-53页 |
·讨论 | 第53-54页 |
6 OsLIR1 的亚细胞定位 | 第54-57页 |
·实验用品 | 第54页 |
·实验方法 | 第54页 |
·g-pCAMBIA1301-OsLIR1-GFP 载体构建 | 第54页 |
·g-pCAMBIA1301-OsLIR1-GFP 转化烟草 | 第54页 |
·烟草原生质体的制备 | 第54页 |
·实验结果 | 第54-56页 |
·g-pCAMBIA1301-GFP 载体酶切鉴定 | 第54-55页 |
·g-pCAMBIA1301-OsLIR1-GFP 载体酶切鉴定 | 第55-56页 |
·g-pCAMBIA1301-OsLIR1-GFP 转基因烟草的定位检测 | 第56页 |
·讨论 | 第56-57页 |
7 结论和展望 | 第57-58页 |
·主要结论 | 第57页 |
·存在的不足和后续建议 | 第57-58页 |
致谢 | 第58-59页 |
参考文献 | 第59-66页 |
附录 | 第66-68页 |
附页 | 第66-68页 |
A. 作者攻读硕士学位期间发表的论文目录 | 第68页 |
B. 作者攻读硕士学位期间取得的科研成果 | 第68页 |