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水稻OsLIR1功能的初步研究

中文摘要第1-4页
英文摘要第4-10页
1 绪论第10-18页
   ·问题的提出第10-12页
     ·光对叶绿体发育的研究第10-11页
     ·光信号传导途径的研究第11-12页
   ·光输入途径的其它调节因子的研究第12-15页
   ·LIR1 蛋白的研究进展第15-16页
   ·课题研究的目的、意义第16页
   ·课题研究的内容及技术路线第16-17页
     ·研究内容第16页
     ·研究技术路线第16-17页
   ·本研究的创新点第17-18页
2 OsLIR1 的克隆与生物信息学分析第18-28页
   ·实验用品第18-19页
     ·植物材料和菌株第18页
     ·实验试剂第18页
     ·主要的实验仪器第18-19页
     ·引物序列第19页
   ·实验方法第19-21页
     ·水稻RNA 的提取第19页
     ·水稻cDNA 的反转录第19页
     ·OsLIR1 的克隆第19-20页
     ·半定量RT-PCR 检测OsLIR1 的特异性表达第20-21页
   ·结果与分析第21-26页
     ·水稻RNA 的提取第21页
     ·OsLIR1 的PCR 扩增第21页
     ·OsLIR1 的酶切鉴定第21-22页
     ·OsLIR1 的序列结果第22页
     ·OsLIR1 的生物信息学分析第22-26页
     ·OsLIR1 的组织特异性表达第26页
   ·讨论第26-28页
3 OsLIR1 超表达载体的构建及转基因烟草的功能鉴定第28-34页
   ·实验用品第28页
     ·植物材料及载体第28页
     ·实验试剂及仪器第28页
     ·培养基及缓冲液第28页
   ·实验方法第28-30页
     ·超表达载体g-pCAMBIA1301-OsLIR1 的构建第28-29页
     ·植物表达载体转化农杆菌第29页
     ·转基因烟草方法第29-30页
     ·转基因烟草中OsLIR1 基因的转录水平检测第30页
   ·结果与分析第30-32页
     ·表达载体g-pCAMBIA1301-OsLIR1 的酶切鉴定第30-31页
     ·载体g-pCAMBIA1301- OsLIR1 转化农杆菌的PCR 鉴定第31页
     ·转基因烟草检测第31-32页
     ·PCR 检测OsLIR1 在转基因烟草中的表达第32页
     ·RT-PCR 检测OsLIR1 在转基因烟草中的表达第32页
   ·讨论第32-34页
4 OsLIR1 超表达和反义载体的构建及转化水稻的功能鉴定第34-45页
   ·材料与试剂第34页
     ·植物材料和菌株第34页
     ·化学试剂第34页
     ·培养基及缓冲液第34页
   ·实验方法第34-38页
     ·表达载体PCUPHN-OsLIR1 的构建第34-35页
     ·干扰载体的构建第35-36页
     ·转基因水稻方法第36-37页
     ·转基因水稻OsLIR1 的超表达及干扰的转录水平检测第37页
     ·OsLIR1 超表达转基因水稻根的叶绿体超微结构观察样品制备第37-38页
   ·结果与分析第38-43页
     ·载体的酶切鉴定第38-39页
     ·载体转化农杆菌的PCR 鉴定第39-40页
     ·g-pCAMBIA1301-OsLIR1 超表达载体转水稻第40-42页
     ·g-pCAMBIA1301-OsLIR1 反义载体转水稻第42-43页
   ·讨论第43-45页
5 OsLIR1 启动子的克隆、生物信息学分析及遗传转化第45-54页
   ·实验用品第45页
   ·实验方法第45-46页
     ·水稻DNA 的提取第45页
     ·OsLIR1 启动子的克隆第45页
     ·OsLIR1 启动子的序列分析第45页
     ·OsLIR1 启动子表达载体的构建及转化农杆菌第45-46页
     ·OsLIR1 启动子表达载体转洋葱的瞬时检测第46页
     ·RT-PCR 检测转基因烟草的GUS 表达第46页
   ·结果与分析第46-53页
     ·OsLIR1 启动子的克隆第46-47页
     ·OsLIR1 启动子的序列分析第47-50页
     ·OsLIR1 启动子表达载体的酶切鉴定及转化第50-51页
     ·洋葱的瞬时表达检测第51页
     ·转基因烟草的表达检测第51-52页
     ·RT-PCR 检测转基因烟草的启动子活性第52-53页
   ·讨论第53-54页
6 OsLIR1 的亚细胞定位第54-57页
   ·实验用品第54页
   ·实验方法第54页
     ·g-pCAMBIA1301-OsLIR1-GFP 载体构建第54页
     ·g-pCAMBIA1301-OsLIR1-GFP 转化烟草第54页
     ·烟草原生质体的制备第54页
   ·实验结果第54-56页
     ·g-pCAMBIA1301-GFP 载体酶切鉴定第54-55页
     ·g-pCAMBIA1301-OsLIR1-GFP 载体酶切鉴定第55-56页
     ·g-pCAMBIA1301-OsLIR1-GFP 转基因烟草的定位检测第56页
   ·讨论第56-57页
7 结论和展望第57-58页
   ·主要结论第57页
   ·存在的不足和后续建议第57-58页
致谢第58-59页
参考文献第59-66页
附录第66-68页
 附页第66-68页
 A. 作者攻读硕士学位期间发表的论文目录第68页
 B. 作者攻读硕士学位期间取得的科研成果第68页

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