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家蚕二分浓核病毒感染的家蚕连续病理变化研究

摘要第5-7页
Abstract第7-8页
第一章 绪论第12-26页
    1.1 家蚕二分浓核病毒(BmBDV)研究简史第12-13页
    1.2 家蚕及家蚕病毒病第13-17页
        1.2.1 家蚕第13-16页
        1.2.2 家蚕病毒病第16-17页
    1.3 家蚕二分浓核病毒第17-22页
        1.3.1 家蚕对家蚕二分浓核病毒的敏感性第17-18页
        1.3.2 家蚕二分浓核病毒导致的家蚕病理变化第18-21页
        1.3.3 家蚕二分浓核病毒基因组结构简介第21-22页
    1.4 研究的目的及意义第22-23页
    1.5 研究内容和技术路线第23-26页
        1.5.1 主要研究内容第23-25页
        1.5.2 技术路线第25-26页
第二章 BmBDV感染对家蚕生长发育的影响第26-39页
    2.1 材料和试剂第26-27页
        2.1.1 病毒与家蚕第26页
        2.1.2 试剂第26页
        2.1.3 溶液的配制第26-27页
        2.1.4 仪器设备第27页
    2.2 实验方法第27-30页
        2.2.1 BmBDV粗提液的制备第27-28页
        2.2.2 BmBDV粗提液的PCR鉴定第28-29页
        2.2.3 BmBDV感染家蚕实验第29页
        2.2.4 五龄家蚕的感染与饲养第29-30页
        2.2.5 蛹重和蛹死亡率统计第30页
        2.2.6 子代卵及蚁蚕总DNA的提取第30页
    2.3 结果和分析第30-37页
        2.3.1 BmBDV粗提液PCR检测第30-31页
        2.3.2 不同发育阶段的幼虫对BmBDV的敏感性第31-32页
        2.3.3 BmBDV对家蚕生长发育的影响第32-33页
        2.3.4 BmBDV感染家蚕的典型病理症状第33-35页
        2.3.5 BmBDV感染对家蚕吐丝量和蛹发育的影响第35-36页
        2.3.6 BmBDV感染对家蚕子代的影响第36-37页
    2.4 讨论与小结第37-39页
第三章 BmBDV感染的家蚕中肠组织连续病理变化研究第39-51页
    3.1 材料和试剂第39-41页
        3.1.1 材料第39-40页
        3.1.2 试剂第40页
        3.1.3 试剂配制第40-41页
        3.1.4 仪器设备第41页
    3.2 实验方法第41-44页
        3.2.1 BmBDV感染组织的取材与固定第41页
        3.2.2 中肠组织的包埋与病理切片第41-42页
        3.2.3 HE染色第42-43页
        3.2.4 组织病变观察第43页
        3.2.5 免疫酶组织化学第43-44页
    3.3 实验结果及分析第44-50页
        3.3.1 组织连续病理变化第44-48页
        3.3.2 病变细胞的脱落第48-49页
        3.3.3 免疫组织化学第49-50页
    3.4 讨论与小结第50-51页
第四章 BmBDV的感染周期及其基因的转录时相研究第51-71页
    4.1 材料和试剂第52-54页
        4.1.1 材料第52页
        4.1.2 试剂的配制第52-53页
        4.1.3 仪器设备第53-54页
    4.2 实验方法第54-60页
        4.2.1 BmBDV荧光定量引物的设计与合成第54页
        4.2.2 实时荧光定量PCR标准品质粒的构建第54-57页
        4.2.3 标准品质粒拷贝数的计算第57页
        4.2.4 qPCR反应条件的优化及标准曲线的建立第57页
        4.2.5 蚕沙中病毒量的测定第57页
        4.2.6 组织的取材与保存第57-58页
        4.2.7 中肠总RNA的提取及cDNA第一链的合成第58-59页
        4.2.8 RT-PCR和RT-qPCR反应第59-60页
    4.3 实验结果及分析第60-69页
        4.3.1 标准品质粒的鉴定结果第60-62页
        4.3.2 BmBDV荧光定量标准曲线第62-65页
        4.3.3 BmBDV的感染周期研究第65页
        4.3.4 中肠总RNA的电泳鉴定结果第65-66页
        4.3.5 BmBDV感染四龄家蚕后的转录时相第66-68页
        4.3.6 BmBDV感染五龄家蚕后的转录时相第68-69页
    4.4 讨论与小结第69-71页
第五章 总结与展望第71-73页
    5.1 主要工作总结第71-72页
    5.2 工作展望第72-73页
参考文献第73-80页
致谢第80-82页
硕士期间研究成果第82页
参加课题第82页

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