摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
第一章 绪论 | 第12-26页 |
1.1 家蚕二分浓核病毒(BmBDV)研究简史 | 第12-13页 |
1.2 家蚕及家蚕病毒病 | 第13-17页 |
1.2.1 家蚕 | 第13-16页 |
1.2.2 家蚕病毒病 | 第16-17页 |
1.3 家蚕二分浓核病毒 | 第17-22页 |
1.3.1 家蚕对家蚕二分浓核病毒的敏感性 | 第17-18页 |
1.3.2 家蚕二分浓核病毒导致的家蚕病理变化 | 第18-21页 |
1.3.3 家蚕二分浓核病毒基因组结构简介 | 第21-22页 |
1.4 研究的目的及意义 | 第22-23页 |
1.5 研究内容和技术路线 | 第23-26页 |
1.5.1 主要研究内容 | 第23-25页 |
1.5.2 技术路线 | 第25-26页 |
第二章 BmBDV感染对家蚕生长发育的影响 | 第26-39页 |
2.1 材料和试剂 | 第26-27页 |
2.1.1 病毒与家蚕 | 第26页 |
2.1.2 试剂 | 第26页 |
2.1.3 溶液的配制 | 第26-27页 |
2.1.4 仪器设备 | 第27页 |
2.2 实验方法 | 第27-30页 |
2.2.1 BmBDV粗提液的制备 | 第27-28页 |
2.2.2 BmBDV粗提液的PCR鉴定 | 第28-29页 |
2.2.3 BmBDV感染家蚕实验 | 第29页 |
2.2.4 五龄家蚕的感染与饲养 | 第29-30页 |
2.2.5 蛹重和蛹死亡率统计 | 第30页 |
2.2.6 子代卵及蚁蚕总DNA的提取 | 第30页 |
2.3 结果和分析 | 第30-37页 |
2.3.1 BmBDV粗提液PCR检测 | 第30-31页 |
2.3.2 不同发育阶段的幼虫对BmBDV的敏感性 | 第31-32页 |
2.3.3 BmBDV对家蚕生长发育的影响 | 第32-33页 |
2.3.4 BmBDV感染家蚕的典型病理症状 | 第33-35页 |
2.3.5 BmBDV感染对家蚕吐丝量和蛹发育的影响 | 第35-36页 |
2.3.6 BmBDV感染对家蚕子代的影响 | 第36-37页 |
2.4 讨论与小结 | 第37-39页 |
第三章 BmBDV感染的家蚕中肠组织连续病理变化研究 | 第39-51页 |
3.1 材料和试剂 | 第39-41页 |
3.1.1 材料 | 第39-40页 |
3.1.2 试剂 | 第40页 |
3.1.3 试剂配制 | 第40-41页 |
3.1.4 仪器设备 | 第41页 |
3.2 实验方法 | 第41-44页 |
3.2.1 BmBDV感染组织的取材与固定 | 第41页 |
3.2.2 中肠组织的包埋与病理切片 | 第41-42页 |
3.2.3 HE染色 | 第42-43页 |
3.2.4 组织病变观察 | 第43页 |
3.2.5 免疫酶组织化学 | 第43-44页 |
3.3 实验结果及分析 | 第44-50页 |
3.3.1 组织连续病理变化 | 第44-48页 |
3.3.2 病变细胞的脱落 | 第48-49页 |
3.3.3 免疫组织化学 | 第49-50页 |
3.4 讨论与小结 | 第50-51页 |
第四章 BmBDV的感染周期及其基因的转录时相研究 | 第51-71页 |
4.1 材料和试剂 | 第52-54页 |
4.1.1 材料 | 第52页 |
4.1.2 试剂的配制 | 第52-53页 |
4.1.3 仪器设备 | 第53-54页 |
4.2 实验方法 | 第54-60页 |
4.2.1 BmBDV荧光定量引物的设计与合成 | 第54页 |
4.2.2 实时荧光定量PCR标准品质粒的构建 | 第54-57页 |
4.2.3 标准品质粒拷贝数的计算 | 第57页 |
4.2.4 qPCR反应条件的优化及标准曲线的建立 | 第57页 |
4.2.5 蚕沙中病毒量的测定 | 第57页 |
4.2.6 组织的取材与保存 | 第57-58页 |
4.2.7 中肠总RNA的提取及cDNA第一链的合成 | 第58-59页 |
4.2.8 RT-PCR和RT-qPCR反应 | 第59-60页 |
4.3 实验结果及分析 | 第60-69页 |
4.3.1 标准品质粒的鉴定结果 | 第60-62页 |
4.3.2 BmBDV荧光定量标准曲线 | 第62-65页 |
4.3.3 BmBDV的感染周期研究 | 第65页 |
4.3.4 中肠总RNA的电泳鉴定结果 | 第65-66页 |
4.3.5 BmBDV感染四龄家蚕后的转录时相 | 第66-68页 |
4.3.6 BmBDV感染五龄家蚕后的转录时相 | 第68-69页 |
4.4 讨论与小结 | 第69-71页 |
第五章 总结与展望 | 第71-73页 |
5.1 主要工作总结 | 第71-72页 |
5.2 工作展望 | 第72-73页 |
参考文献 | 第73-80页 |
致谢 | 第80-82页 |
硕士期间研究成果 | 第82页 |
参加课题 | 第82页 |