| 摘要 | 第4-6页 |
| abstract | 第6-7页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-18页 |
| 引言 | 第11页 |
| 1.1 转基因作物的全球发展概况 | 第11-12页 |
| 1.2 转基因产品的安全管理 | 第12-13页 |
| 1.3 转基因产品的检测方法 | 第13-15页 |
| 1.3.1 针对特定核酸序列的检测技术 | 第13-14页 |
| 1.3.2 针对外源基因表达产物蛋白质的检测方法 | 第14-15页 |
| 1.4 重组酶聚合酶等温核酸扩增技术 | 第15-16页 |
| 1.5 微滴数字PCR | 第16-18页 |
| 第二章 RPA技术快速检测转基因玉米Bt11 | 第18-26页 |
| 2.1 实验材料、试剂与仪器 | 第18-19页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第18页 |
| 2.1.2 实验试剂 | 第18-19页 |
| 2.1.3 实验仪器 | 第19页 |
| 2.2 实验方法 | 第19-22页 |
| 2.2.1 基因组DNA的提取 | 第19-20页 |
| 2.2.2 引物设计与筛选 | 第20页 |
| 2.2.3 RPA反应 | 第20-21页 |
| 2.2.4 转基因玉米Bt11特异性验证 | 第21页 |
| 2.2.5 RPA反应时间和温度优化 | 第21页 |
| 2.2.6 绝对灵敏度试验和相对灵敏度试验 | 第21-22页 |
| 2.3 实验结果分析与讨论 | 第22-26页 |
| 2.3.1 特异性检测Bt11引物筛选 | 第22页 |
| 2.3.2 特异性检测转基因玉米Bt11验证 | 第22-23页 |
| 2.3.3 反应时间和反应温度优化 | 第23-24页 |
| 2.3.4 灵敏度检测 | 第24页 |
| 2.3.5 总结与讨论 | 第24-26页 |
| 第三章 RPA荧光技术与荧光定量PCR在转基因产品检测上的比较 | 第26-40页 |
| 3.1 RPA荧光技术在检测转基因上的研究 | 第27-33页 |
| 3.1.1 实验材料、试剂与仪器 | 第27页 |
| 3.1.1.1 实验材料 | 第27页 |
| 3.1.1.2 实验试剂 | 第27页 |
| 3.1.1.3 实验仪器 | 第27页 |
| 3.1.2 试验方法 | 第27-30页 |
| 3.1.2.1 DNA提取 | 第27-28页 |
| 3.1.2.2 引物筛选与探针设计 | 第28-29页 |
| 3.1.2.3 RPA反应 | 第29页 |
| 3.1.2.4 nos终止子的引物验证 | 第29页 |
| 3.1.2.5 相对检测限测定 | 第29页 |
| 3.1.2.6 绝对检测限测定 | 第29-30页 |
| 3.1.3 实验结果分析 | 第30-32页 |
| 3.1.3.1 nos终止子的引物验证 | 第30页 |
| 3.1.3.2 相对检测限测定 | 第30-31页 |
| 3.1.3.3 绝对检测限测定 | 第31-32页 |
| 3.1.4 讨论 | 第32-33页 |
| 3.2 荧光定量PCR检测转基因玉米Bt11中nos终止子 | 第33-40页 |
| 3.2.1 实验材料、试剂与仪器 | 第33页 |
| 3.2.1.1 实验材料 | 第33页 |
| 3.2.1.2 实验试剂 | 第33页 |
| 3.2.1.3 实验仪器 | 第33页 |
| 3.2.2 试验方法 | 第33-35页 |
| 3.2.2.1 扩增引物 | 第33-34页 |
| 3.2.2.2 DNA提取与质粒制备 | 第34-35页 |
| 3.2.2.3 标准曲线的制备 | 第35页 |
| 3.2.2.4 扩增体系 | 第35页 |
| 3.2.2.5 反应程序 | 第35页 |
| 3.2.2.6 荧光定量PCR扩增 | 第35页 |
| 3.2.3 实验结果分析 | 第35-38页 |
| 3.2.3.1 标准曲线绘制 | 第35-36页 |
| 3.2.3.2 转基因玉米Bt11百分含量测定 | 第36-37页 |
| 3.2.3.3 转基因玉米Bt11中nos终止子相对检测限测定 | 第37-38页 |
| 3.2.3.4 转基因玉米Bt11中nos终止子绝对检测限测定 | 第38页 |
| 3.2.4 讨论 | 第38-40页 |
| 第四章 微滴数字PCR在转基因产品检测上的研究 | 第40-47页 |
| 4.1 实验材料、试剂与仪器 | 第40-41页 |
| 4.1.1 实验材料 | 第40页 |
| 4.1.2 实验试剂 | 第40-41页 |
| 4.1.3 实验仪器 | 第41页 |
| 4.2 试验方法 | 第41-42页 |
| 4.2.1 DNA提取 | 第41页 |
| 4.2.2 引物和探针 | 第41页 |
| 4.2.3 荧光定量PCR反应体系和条件 | 第41-42页 |
| 4.2.4 ddPCR反应体系和条件 | 第42页 |
| 4.2.5 荧光定量PCR计算转基因成分百分含量 | 第42页 |
| 4.2.6 微滴数字PCR方法计算外源基因拷贝数和百分含量 | 第42页 |
| 4.3 实验结果分析 | 第42-45页 |
| 4.3.1 荧光定量PCR拷贝数分析结果 | 第42-43页 |
| 4.3.2 ddPCR数据分析 | 第43-45页 |
| 4.4 讨论 | 第45-47页 |
| 第五章 全文小结 | 第47-49页 |
| 5.1 RPA技术快速检测转基因玉米Bt11 | 第47页 |
| 5.2 RPA荧光技术与荧光定量PCR在转基因产品检测上的比较 | 第47-48页 |
| 5.3 微滴数字PCR在转基因产品检测上的研究 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-55页 |
| 攻读硕士学位期间的论文及研究成果 | 第55-56页 |
| 致谢 | 第56页 |
