| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 第1章 前言 | 第10-24页 |
| 1.1 Cry毒素 | 第11-14页 |
| 1.1.1 Cry毒素的空间结构 | 第12页 |
| 1.1.2 Cry毒素的Domain I | 第12-13页 |
| 1.1.3 Cry毒素的Domain II | 第13页 |
| 1.1.4 Cry毒素的Domain III | 第13-14页 |
| 1.2 Cry毒素的杀虫机理模型 | 第14-16页 |
| 1.2.1 Cry毒素的穿孔机制模型 | 第14-15页 |
| 1.2.2 Cry毒素的信号转导模型 | 第15-16页 |
| 1.3 Cry毒素结合蛋白的鉴定 | 第16-22页 |
| 1.3.1 碱性磷酸酶（ALP） | 第16-17页 |
| 1.3.2 氨肽酶N（APN） | 第17-18页 |
| 1.3.3 钙黏蛋白（CAD） | 第18-19页 |
| 1.3.4 ABC转运蛋白家族（ABC transporter） | 第19-20页 |
| 1.3.5 其他Cry毒素的结合蛋白 | 第20-22页 |
| 1.4 研究目的与意义 | 第22页 |
| 1.5 研究内容 | 第22-24页 |
| 1.5.1 甜菜夜蛾与小菜蛾中肠液中Cry结合蛋白的分离 | 第22页 |
| 1.5.2 甜菜夜蛾与小菜蛾中肠液中Cry结合蛋白的鉴定 | 第22-23页 |
| 1.5.3 甜菜夜蛾与小菜蛾中肠液中Cry结合蛋白的理论结合验证 | 第23页 |
| 1.5.4 甜菜夜蛾与小菜蛾中肠液中Cry结合蛋白的克隆、表达及纯化 | 第23页 |
| 1.5.5 Cry7Ab4毒素活性区的表达及纯化 | 第23-24页 |
| 第2章 材料与方法 | 第24-58页 |
| 2.1 甜菜夜蛾中肠液Cry毒素结合蛋白的分离与鉴定 | 第24-34页 |
| 2.1.1 供试昆虫及Cry毒素 | 第24页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第24-25页 |
| 2.1.3 主要仪器和器材 | 第25页 |
| 2.1.4 甜菜夜蛾中肠液的提取 | 第25-26页 |
| 2.1.5 甜菜夜蛾中肠液Cry毒素结合蛋白的Pull-down Essay | 第26-27页 |
| 2.1.6 聚丙烯酰胺凝胶电泳分析Pull-down essay | 第27-31页 |
| 2.1.7 蛋白条带的LS-MS/MS鉴定 | 第31页 |
| 2.1.8 Discovery Studio 2.5 分子对接 | 第31-33页 |
| 2.1.9 蛋白质序列比对及空间结构比对 | 第33-34页 |
| 2.2 小菜蛾中肠液Cry毒素结合蛋白的分离与鉴定 | 第34-35页 |
| 2.2.1 供试昆虫与Cry毒素 | 第34页 |
| 2.2.2 主要试剂、仪器和器材 | 第34页 |
| 2.2.3 小菜蛾中肠液的提取 | 第34-35页 |
| 2.2.4 小菜蛾中肠液Cry毒素结合蛋白的Pull-down Essay | 第35页 |
| 2.2.5 聚丙烯酰胺凝胶电泳分析Pull-down essay | 第35页 |
| 2.2.6 蛋白条带的LS-MS/MS鉴定 | 第35页 |
| 2.3 甜菜夜蛾中肠液Cry结合蛋白POXC的表达及纯化 | 第35-49页 |
| 2.3.1 菌株和质粒 | 第35-36页 |
| 2.3.2 主要试剂 | 第36-37页 |
| 2.3.3 主要仪器 | 第37-38页 |
| 2.3.4 主要培养基 | 第38页 |
| 2.3.5 主要溶液的配制 | 第38页 |
| 2.3.6 Sepoxc基因克隆载体的构建 | 第38-40页 |
| 2.3.7 Sepoxc基因表达载体的构建 | 第40-45页 |
| 2.3.8 Sepoxc基因的诱导表达及纯化 | 第45-49页 |
| 2.4 小菜蛾中肠液Cry结合蛋白Dorsal的表达及纯化 | 第49-51页 |
| 2.4.1 菌株和质粒 | 第49页 |
| 2.4.2 主要试剂及仪器 | 第49-50页 |
| 2.4.3 Pxdorsal基因克隆载体及表达载体的构建 | 第50页 |
| 2.4.4 pGEX-Dorsal质粒在BL21(DE3)中的诱导表达 | 第50-51页 |
| 2.5 Cry7Ab4毒素活性区的表达及纯化 | 第51-58页 |
| 2.5.1 菌株和质粒 | 第51页 |
| 2.5.2 主要试剂及仪器 | 第51-52页 |
| 2.5.3 Cry7Ab4基因活性区克隆载体的构建 | 第52-54页 |
| 2.5.4 Cry7Ab4基因活性区表达载体的构建 | 第54-55页 |
| 2.5.5 Cry7Ab4基因的诱导表达及纯化 | 第55-58页 |
| 第3章 结果与分析 | 第58-76页 |
| 3.1 甜菜夜蛾中肠液中Cry1Ab1结合蛋白的分离与鉴定 | 第58-63页 |
| 3.2 甜菜夜蛾中肠液中Cry1Ab1结合蛋白SePOXC的克隆、表达与纯化 | 第63-68页 |
| 3.2.1 Sepoxc全基因合成及克隆载体的构建 | 第63-64页 |
| 3.2.2 Sepoxc基因表达载体的构建 | 第64-65页 |
| 3.2.3 Sepoxc基因的诱导表达 | 第65-66页 |
| 3.2.4 蛋白浓度标准曲线 | 第66-67页 |
| 3.2.5 SePOXC蛋白的纯化 | 第67-68页 |
| 3.3 小菜蛾中肠液中Cry1Ab1结合蛋白的分离与鉴定 | 第68-71页 |
| 3.4 小菜蛾dorsal基因的克隆、表达及纯化 | 第71-72页 |
| 3.4.1 Pxdorsal全基因合成及克隆载体及表达载体的构建 | 第71页 |
| 3.4.2 Pxdorsal基因的诱导表达 | 第71页 |
| 3.4.3 PxDorsal蛋白的纯化 | 第71-72页 |
| 3.5 Cry7Ab4基因的表达 | 第72-76页 |
| 3.5.1 Cry7Ab4基因活性区克隆载体的构建 | 第72-74页 |
| 3.5.2 Cry7Ab4基因活性区表达载体的构建 | 第74页 |
| 3.5.3 Cry7Ab4基因的诱导表达 | 第74-76页 |
| 第4章 讨论 | 第76-80页 |
| 4.1 小菜蛾Dorsal与昆虫免疫反应 | 第76-78页 |
| 4.2 甜菜夜蛾POXC功能的推测 | 第78-79页 |
| 4.3 Cry7Ab4毒素及其结合蛋白的分离鉴定 | 第79页 |
| 4.4 结论与后续工作 | 第79-80页 |
| 参考文献 | 第80-90页 |
| 致谢 | 第90-92页 |
| 个人简历、在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第92页 |
