| 摘要 | 第6-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 上篇 文献综述 | 第15-35页 |
| 第一章 小鼠卵母细胞成熟调控的研究进展 | 第15-35页 |
| 1.1 卵泡发育与卵母细胞成熟 | 第15-18页 |
| 1.1.1 卵巢的结构与发育 | 第15-16页 |
| 1.1.2 卵母细胞的发育过程 | 第16-17页 |
| 1.1.3 卵泡各类体细胞与卵母细胞发育的关系 | 第17页 |
| 1.1.4 激素控制与卵巢周期 | 第17-18页 |
| 1.2 卵母细胞减数分裂的停滞与恢复 | 第18-21页 |
| 1.2.1 卵母细胞第一次减数分裂停滞 | 第20-21页 |
| 1.2.2 卵母细胞第一次减数分裂恢复 | 第21页 |
| 1.3 卵母细胞减数分裂停滞与恢复的调控机理 | 第21-33页 |
| 1.3.1 cAMP、cGMP和PDE3A在卵母细胞成熟过程中的作用 | 第22-24页 |
| 1.3.2 细胞间隙连接在卵母细胞成熟过程中的作用 | 第24-25页 |
| 1.3.3 CNP/NPR2 信号网络在卵母细胞成熟过程中的作用 | 第25-29页 |
| 1.3.4 EGF信号网络在卵母细胞成熟过程中的作用 | 第29-33页 |
| 1.4 研究目的与意义 | 第33-34页 |
| 1.5 研究思路与方法 | 第34-35页 |
| 下篇 试验研究 | 第35-98页 |
| 第二章 试验用小鼠卵母细胞成熟与体外受精的测定 | 第35-44页 |
| 2.1 引言 | 第35-36页 |
| 2.2 材料与方法 | 第36-39页 |
| 2.2.1 仪器用具 | 第36页 |
| 2.2.2 材料试剂 | 第36页 |
| 2.2.3 试验动物 | 第36-37页 |
| 2.2.4 切片制备与苏木精-伊红（HE）染色 | 第37页 |
| 2.2.5 超数排卵后卵丘卵母细胞复合体的分离 | 第37页 |
| 2.2.6 免疫组织化学法 | 第37-38页 |
| 2.2.7 小鼠卵母细胞的IVF和胚胎的体外培养 | 第38页 |
| 2.2.8 卵母细胞的IVM | 第38-39页 |
| 2.2.9 卵母细胞免疫荧光法 | 第39页 |
| 2.3 结果与分析 | 第39-43页 |
| 2.3.1 PMSG处理后卵母细胞的发育 | 第39-40页 |
| 2.3.2 小鼠卵母细胞的IVF和胚胎的体外培养 | 第40-41页 |
| 2.3.3 卵母细胞的IVM与染色体形态观察 | 第41-43页 |
| 2.4 讨论 | 第43页 |
| 2.5 小结 | 第43-44页 |
| 第三章 EGF/EGFR系统相关基因敲除鼠的繁育与鉴定 | 第44-62页 |
| 3.1 引言 | 第44页 |
| 3.2 材料与方法 | 第44-50页 |
| 3.2.1 仪器用具 | 第44页 |
| 3.2.2 材料试剂 | 第44-45页 |
| 3.2.3 试验动物 | 第45页 |
| 3.2.4 配种方案 | 第45-47页 |
| 3.2.5 基因型鉴定 | 第47-48页 |
| 3.2.6 排卵前卵泡的分离与培养 | 第48-49页 |
| 3.2.7 卵巢颗粒细胞的分离 | 第49页 |
| 3.2.8 Western Blot检测蛋白表达水平 | 第49-50页 |
| 3.2.9 切片制备与HE染色 | 第50页 |
| 3.2.10 超数排卵后卵丘卵母细胞复合体的分离 | 第50页 |
| 3.2.11 统计学分析 | 第50页 |
| 3.3 结果与分析 | 第50-60页 |
| 3.3.1 小鼠的基因型鉴定 | 第50-52页 |
| 3.3.2 Egfrfl/flCyp19Cre/+小鼠卵母细胞发育相关表型的研究 | 第52-55页 |
| 3.3.3 Egfrdelta/flCyp19Cre/+小鼠卵母细胞发育相关表型的研究 | 第55-60页 |
| 3.4 讨论 | 第60-61页 |
| 3.5 小结 | 第61-62页 |
| 第四章 CNP/NPR2 在卵母细胞减数分裂过程中的作用研究 | 第62-78页 |
| 4.1 引言 | 第62页 |
| 4.2 材料与方法 | 第62-65页 |
| 4.2.1 仪器用具 | 第62页 |
| 4.2.2 材料试剂 | 第62-63页 |
| 4.2.3 试验动物 | 第63页 |
| 4.2.4 人卵泡液样品的收集 | 第63页 |
| 4.2.5 人卵巢壁层颗粒细胞的培养 | 第63-64页 |
| 4.2.6 小鼠排卵前卵泡的分离与培养 | 第64页 |
| 4.2.7 RNA提取和q PCR检测 | 第64页 |
| 4.2.8 CNP蛋白水平的RIA检测 | 第64-65页 |
| 4.2.9 cGMP水平的EIA检测 | 第65页 |
| 4.2.10 统计学分析 | 第65页 |
| 4.3 结果与分析 | 第65-75页 |
| 4.3.1 小鼠卵巢中FSH对NPPC表达有正调控作用而LH/hCG为负调控作用 | 第65-68页 |
| 4.3.2 促性腺激素对CNP受体NPR2 的表达调控 | 第68-69页 |
| 4.3.3 促性腺激素对CNP蛋白水平的表达调控 | 第69-71页 |
| 4.3.4 CNP对cGMP水平以及卵母细胞成熟的调控 | 第71-74页 |
| 4.3.5 LH/hCG信号降低壁层颗粒细胞对CNP诱导的敏感性 | 第74-75页 |
| 4.3.6 CNP/NPR2 信号在EGFR颗粒细胞特异性敲除小鼠中的表达 | 第75页 |
| 4.4 讨论 | 第75-77页 |
| 4.5 小结 | 第77-78页 |
| 第五章 卵泡中LH介导的CNP和EGF信号通路对CGMP和卵母细胞成熟的影响 | 第78-98页 |
| 5.1 引言 | 第78-79页 |
| 5.2 材料与方法 | 第79-81页 |
| 5.2.1 仪器用具 | 第79页 |
| 5.2.2 材料试剂 | 第79页 |
| 5.2.3 试验动物 | 第79页 |
| 5.2.4 cGMP水平的EIA检测 | 第79-80页 |
| 5.2.5 排卵前卵泡的分离与培养 | 第80页 |
| 5.2.6 卵丘卵母细胞复合体的体外培养 | 第80页 |
| 5.2.7 RNA提取与q PCR检测 | 第80页 |
| 5.2.8 Western Blot检测蛋白表达水平 | 第80-81页 |
| 5.2.9 统计学分析 | 第81页 |
| 5.3 结果与分析 | 第81-94页 |
| 5.3.1 LH/hCG体内和体外诱导卵泡内c GMP下降 | 第81-82页 |
| 5.3.2 LH处理后体外培养的排卵前卵泡中的NPPC mRNA水平 | 第82-83页 |
| 5.3.3 体外培养的排卵前卵泡中EGF信号通路对NPPC mRNA相对水平的影响 | 第83-85页 |
| 5.3.4 信号通路对LH依赖性cGMP抑制的影响 | 第85-87页 |
| 5.3.5 rLH处理Egfrdelta/fl Cyp19Cre/+小鼠排卵前卵泡对cGMP水平的影响 | 第87-91页 |
| 5.3.6 EGFR在野生型和Egfrdelta/flCyp19Cre/+小鼠中的表达和激活 | 第91-93页 |
| 5.3.7 LH/hCG对CNP依赖性cGMP产生的影响 | 第93-94页 |
| 5.4 讨论 | 第94-97页 |
| 5.5 小结 | 第97-98页 |
| 研究结论 | 第98-99页 |
| 创新点 | 第99-100页 |
| 下一步研究工作 | 第100-101页 |
| 参考文献 | 第101-113页 |
| 缩略词表 | 第113-115页 |
| 致谢 | 第115-116页 |
| 个人简介 | 第116页 |
| 发表学术论文 | 第116-117页 |
