摘要 | 第1-9页 |
ABSTRACT | 第9-11页 |
第1章 绪论 | 第11-23页 |
·金属硫蛋白 | 第11-15页 |
·金属硫蛋白的结构及其特性 | 第11-12页 |
·金属硫蛋白的种类和分布 | 第12-13页 |
·金属硫蛋白的生物学功能 | 第13-14页 |
·金属硫蛋白与疾病 | 第14-15页 |
·MT 与神经性疾病 | 第14页 |
·MT 与肿瘤癌症 | 第14-15页 |
·金属硫蛋白与肝缺血再灌注损伤 | 第15-21页 |
·缺血再灌注损伤 | 第15-16页 |
·肝缺血再灌注损伤机制 | 第16-20页 |
·氧自由基 | 第16页 |
·中性粒细胞 | 第16-17页 |
·Kupffer 细胞 | 第17页 |
·钙超载 | 第17页 |
·细胞因子 | 第17-20页 |
·金属硫蛋白在缺血再灌注损伤中的作用 | 第20-21页 |
·金属硫蛋白与缺血再灌注关系的最新进展 | 第21页 |
·本文构思 | 第21-23页 |
第2章 MT 对大鼠肝缺血再灌注损伤的作用 | 第23-31页 |
·材料及仪器 | 第23-24页 |
·材料 | 第23-24页 |
·实验动物 | 第23页 |
·试剂 | 第23-24页 |
·实验仪器 | 第24页 |
·方法 | 第24-25页 |
·动物分组 | 第24-25页 |
·大鼠缺血再灌注模型的的建立 | 第25页 |
·标本采集 | 第25页 |
·ALT、AST 和T-BIL 的测定 | 第25页 |
·肝组织病理形态变化的检测 | 第25页 |
·结果 | 第25-29页 |
·血清中ALT、AST 和T-BIL 的水平 | 第25-26页 |
·病理形态变化 | 第26-29页 |
·讨论 | 第29-31页 |
第3章 MT 在大鼠肝缺血再灌注损伤中作用机理的研究 | 第31-49页 |
·MT 对大鼠肝缺血再灌注损伤中氧化作用的影响 | 第31-36页 |
·方法 | 第31-33页 |
·肝匀浆的制备 | 第31页 |
·肝组织匀浆蛋白浓度的测定 | 第31页 |
·TBA 法检测丙二醛(MDA) | 第31-32页 |
·组织中谷胱甘肽(GSH)和超氧化物歧化酶(SOD)的检测 | 第32页 |
·肝组织羟自由基的检测 | 第32-33页 |
·数据处理 | 第33页 |
·结果 | 第33-34页 |
·MT 对肝组织中MDA 的含量的影响 | 第33页 |
·MT 对肝组织中GSH 的含量和SOD 活力的影响 | 第33-34页 |
·MT 对肝抑制羟自由基能力的影响 | 第34页 |
·讨论 | 第34-36页 |
·MT 对大鼠肝缺血再灌注损伤中细胞因子mRNA 水平的影响 | 第36-49页 |
·方法 | 第36-43页 |
·引物合成 | 第36-37页 |
·肝组织的研磨和匀浆 | 第37页 |
·肝组织总RNA 的提取 | 第37页 |
·RNA 纯度的检验 | 第37-38页 |
·RNA 浓度的计算 | 第38页 |
·总RNA 反转录 | 第38页 |
·电泳检验引物特异性 | 第38-39页 |
·常规PCR | 第38页 |
·聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第38-39页 |
·目的基因和内参照扩增效率的比较 | 第39-40页 |
·荧光定量PCR 检测NF-κB、ICAM-1 和TNF-α mRNA 水平 | 第40-42页 |
·NF-κB mRNA 水平的检测 | 第40-41页 |
·ICAM-1 mRNA 水平的检测 | 第41-42页 |
·TNF-α mRNA 水平的检测 | 第42页 |
·相对定量数据的处理 | 第42页 |
·统计学分析 | 第42-43页 |
·结果与分析 | 第43-47页 |
·RNA 纯度 | 第43页 |
·引物特异性 | 第43-44页 |
·电泳 | 第43页 |
·熔解曲线 | 第43-44页 |
·扩增效率的比较 | 第44-45页 |
·内参照(GAPDH)的标准曲线 | 第44页 |
·标准曲线斜率的比较 | 第44-45页 |
·MT 对NF-κB、TNF-α、ICAM-1 表达的影响 | 第45-47页 |
·扩增曲线 | 第45页 |
·荧光实时定量的△Ct 和2-△△Ct 值 | 第45-47页 |
·讨论 | 第47-49页 |
结论 | 第49-50页 |
参考文献 | 第50-56页 |
致谢 | 第56-57页 |
附录A 攻读学位期间所发表的学术论文目录 | 第57-58页 |
附录B 试剂盒测定原理 | 第58页 |