| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 第1章 绪论 | 第11-23页 |
| ·金属硫蛋白 | 第11-15页 |
| ·金属硫蛋白的结构及其特性 | 第11-12页 |
| ·金属硫蛋白的种类和分布 | 第12-13页 |
| ·金属硫蛋白的生物学功能 | 第13-14页 |
| ·金属硫蛋白与疾病 | 第14-15页 |
| ·MT 与神经性疾病 | 第14页 |
| ·MT 与肿瘤癌症 | 第14-15页 |
| ·金属硫蛋白与肝缺血再灌注损伤 | 第15-21页 |
| ·缺血再灌注损伤 | 第15-16页 |
| ·肝缺血再灌注损伤机制 | 第16-20页 |
| ·氧自由基 | 第16页 |
| ·中性粒细胞 | 第16-17页 |
| ·Kupffer 细胞 | 第17页 |
| ·钙超载 | 第17页 |
| ·细胞因子 | 第17-20页 |
| ·金属硫蛋白在缺血再灌注损伤中的作用 | 第20-21页 |
| ·金属硫蛋白与缺血再灌注关系的最新进展 | 第21页 |
| ·本文构思 | 第21-23页 |
| 第2章 MT 对大鼠肝缺血再灌注损伤的作用 | 第23-31页 |
| ·材料及仪器 | 第23-24页 |
| ·材料 | 第23-24页 |
| ·实验动物 | 第23页 |
| ·试剂 | 第23-24页 |
| ·实验仪器 | 第24页 |
| ·方法 | 第24-25页 |
| ·动物分组 | 第24-25页 |
| ·大鼠缺血再灌注模型的的建立 | 第25页 |
| ·标本采集 | 第25页 |
| ·ALT、AST 和T-BIL 的测定 | 第25页 |
| ·肝组织病理形态变化的检测 | 第25页 |
| ·结果 | 第25-29页 |
| ·血清中ALT、AST 和T-BIL 的水平 | 第25-26页 |
| ·病理形态变化 | 第26-29页 |
| ·讨论 | 第29-31页 |
| 第3章 MT 在大鼠肝缺血再灌注损伤中作用机理的研究 | 第31-49页 |
| ·MT 对大鼠肝缺血再灌注损伤中氧化作用的影响 | 第31-36页 |
| ·方法 | 第31-33页 |
| ·肝匀浆的制备 | 第31页 |
| ·肝组织匀浆蛋白浓度的测定 | 第31页 |
| ·TBA 法检测丙二醛(MDA) | 第31-32页 |
| ·组织中谷胱甘肽(GSH)和超氧化物歧化酶(SOD)的检测 | 第32页 |
| ·肝组织羟自由基的检测 | 第32-33页 |
| ·数据处理 | 第33页 |
| ·结果 | 第33-34页 |
| ·MT 对肝组织中MDA 的含量的影响 | 第33页 |
| ·MT 对肝组织中GSH 的含量和SOD 活力的影响 | 第33-34页 |
| ·MT 对肝抑制羟自由基能力的影响 | 第34页 |
| ·讨论 | 第34-36页 |
| ·MT 对大鼠肝缺血再灌注损伤中细胞因子mRNA 水平的影响 | 第36-49页 |
| ·方法 | 第36-43页 |
| ·引物合成 | 第36-37页 |
| ·肝组织的研磨和匀浆 | 第37页 |
| ·肝组织总RNA 的提取 | 第37页 |
| ·RNA 纯度的检验 | 第37-38页 |
| ·RNA 浓度的计算 | 第38页 |
| ·总RNA 反转录 | 第38页 |
| ·电泳检验引物特异性 | 第38-39页 |
| ·常规PCR | 第38页 |
| ·聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第38-39页 |
| ·目的基因和内参照扩增效率的比较 | 第39-40页 |
| ·荧光定量PCR 检测NF-κB、ICAM-1 和TNF-α mRNA 水平 | 第40-42页 |
| ·NF-κB mRNA 水平的检测 | 第40-41页 |
| ·ICAM-1 mRNA 水平的检测 | 第41-42页 |
| ·TNF-α mRNA 水平的检测 | 第42页 |
| ·相对定量数据的处理 | 第42页 |
| ·统计学分析 | 第42-43页 |
| ·结果与分析 | 第43-47页 |
| ·RNA 纯度 | 第43页 |
| ·引物特异性 | 第43-44页 |
| ·电泳 | 第43页 |
| ·熔解曲线 | 第43-44页 |
| ·扩增效率的比较 | 第44-45页 |
| ·内参照(GAPDH)的标准曲线 | 第44页 |
| ·标准曲线斜率的比较 | 第44-45页 |
| ·MT 对NF-κB、TNF-α、ICAM-1 表达的影响 | 第45-47页 |
| ·扩增曲线 | 第45页 |
| ·荧光实时定量的△Ct 和2-△△Ct 值 | 第45-47页 |
| ·讨论 | 第47-49页 |
| 结论 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-56页 |
| 致谢 | 第56-57页 |
| 附录A 攻读学位期间所发表的学术论文目录 | 第57-58页 |
| 附录B 试剂盒测定原理 | 第58页 |