| 摘要 | 第1-10页 |
| ABSTRACT | 第10-13页 |
| 英文缩写词表 | 第13-14页 |
| 第1章 绪论 | 第14-31页 |
| ·胰岛素结构与功能简介 | 第14-17页 |
| ·胰岛素制剂的生产方法 | 第17-18页 |
| ·胰岛素结构与功能的关系 | 第18页 |
| ·胰岛素突变体及类似物的研究进展 | 第18-20页 |
| ·口服胰岛素发展与产品举例 | 第20-22页 |
| ·生产胰岛素的不同表达系统 | 第22-24页 |
| ·大肠杆菌表达系统 | 第22-23页 |
| ·酵母表达系统 | 第23页 |
| ·其他表达系统举例 | 第23-24页 |
| ·农杆菌质粒载体对植物的转化 | 第24-27页 |
| ·植物茎尖的脱毒与转化 | 第27-29页 |
| ·真空渗透法的研究进展 | 第29-31页 |
| 第2章 人胰岛素突变体的分子设计与克隆 | 第31-56页 |
| ·材料 | 第31-34页 |
| ·菌株及质粒材料 | 第31页 |
| ·主要试剂 | 第31-32页 |
| ·主要仪器 | 第32页 |
| ·培养基与缓冲液 | 第32-34页 |
| ·方法 | 第34-44页 |
| ·胰岛素突变体InsM2 的分子设计 | 第34-37页 |
| ·合成 | 第37页 |
| ·产物扩增与TA 克隆 | 第37-41页 |
| ·表达载体的构建 | 第41-44页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第44页 |
| ·结果与分析 | 第44-50页 |
| ·实验设计产物 | 第44-45页 |
| ·设计片段的比对 | 第45-46页 |
| ·设计片段的结构预测 | 第46-47页 |
| ·套叠PCR 产物扩增结果 | 第47页 |
| ·克隆载体的鉴定与序列分析 | 第47-49页 |
| ·表达载体的构建 | 第49-50页 |
| ·讨论 | 第50-56页 |
| ·人胰岛素突变体的设计 | 第50-53页 |
| ·InsM2 的基因序列与引物设计 | 第53-54页 |
| ·延伸与扩增方法的选择 | 第54-55页 |
| ·表达载体的构建 | 第55-56页 |
| 第3章 农杆菌介导人胰岛素原基因对马铃薯遗传转化不同方法体系的建立 | 第56-69页 |
| ·材料 | 第56-57页 |
| ·植物材料 | 第56页 |
| ·农杆菌菌株 | 第56页 |
| ·抗生素及分子生物学试剂 | 第56-57页 |
| ·仪器设备 | 第57页 |
| ·常用溶液的配制 | 第57页 |
| ·培养基 | 第57页 |
| ·方法 | 第57-61页 |
| ·农杆菌工程菌对外植体转化条件的优化 | 第57-58页 |
| ·农杆菌工程菌转化外植体的方法 | 第58-61页 |
| ·结果与分析 | 第61-65页 |
| ·潮霉素选择压力的确定 | 第61-63页 |
| ·浸染时间对茎段转化的影响 | 第63页 |
| ·共培养时间对遗传转化的影响 | 第63-64页 |
| ·乙酰丁香酮对遗传转化的影响 | 第64页 |
| ·羧苄青霉素（Carb）浓度对遗传转化的影响 | 第64页 |
| ·真空渗透处理和超声处理的时间对遗传转化的影响 | 第64页 |
| ·抗性植株的获得 | 第64-65页 |
| ·讨论 | 第65-69页 |
| ·共培养时间对遗传转化的影响 | 第65页 |
| ·选择压力的确定 | 第65-66页 |
| ·抑菌剂的选择 | 第66页 |
| ·真空辅助转化对抗性苗率的影响 | 第66-67页 |
| ·共培养时间对抗性苗率的影响 | 第67页 |
| ·外植体转化材料的选择 | 第67页 |
| ·马铃薯块茎芽尖与马铃薯块茎萌发芽的污染问题 | 第67-69页 |
| 结论 | 第69-70页 |
| 参考文献 | 第70-74页 |
| 致谢 | 第74-75页 |
| 附录 A：攻读学位期间所发表的学术论文目录 | 第75页 |
| 附录 B | 第75-78页 |