| 摘要 | 第5-7页 |
| ABSTRACT | 第7-8页 |
| 第1章 绪论 | 第13-55页 |
| 1.1 纳米材料概述 | 第13-15页 |
| 1.1.1 纳米材料的定义及分类 | 第13页 |
| 1.1.2 纳米材料的理化特性 | 第13-15页 |
| 1.1.2.1 体积效应 | 第14页 |
| 1.1.2.2 表面效应 | 第14页 |
| 1.1.2.3 量子尺寸 | 第14页 |
| 1.1.2.4 量子隧道 | 第14页 |
| 1.1.2.5 介电限域 | 第14-15页 |
| 1.1.3 碳基类纳米材料 | 第15页 |
| 1.1.4 氧化石墨烯纳米材料 | 第15页 |
| 1.2 纳米材料在生物医学领域的应用 | 第15-23页 |
| 1.2.1 纳米材料在生物医学领域方面的优势 | 第16页 |
| 1.2.2 纳米材料在生物医学领域方面的应用研究 | 第16-23页 |
| 1.2.2.1 纳米材料应用于造影及诊断 | 第18-20页 |
| 1.2.2.2 纳米材料在组织工程方面的应用 | 第20页 |
| 1.2.2.3 纳米材料作为药物载体的应用 | 第20-23页 |
| 1.2.2.4 纳米材料直接用于疾病治疗 | 第23页 |
| 1.3 纳米材料的生物学效应 | 第23-50页 |
| 1.3.1 概述 | 第23页 |
| 1.3.2 纳米材料与细胞自噬 | 第23-41页 |
| 1.3.2.1 细胞自噬的定义与分类 | 第23-25页 |
| 1.3.2.2 细胞自噬的研究发展历程 | 第25-26页 |
| 1.3.2.3 细胞自噬体形成的分子生物学机制 | 第26-28页 |
| 1.3.2.4 细胞自噬的信号调控通路 | 第28-32页 |
| 1.3.2.5 病原体感染 | 第32-33页 |
| 1.3.2.6 细胞自噬的检测方法 | 第33-38页 |
| 1.3.2.8 纳米材料诱导的细胞自噬 | 第38-41页 |
| 1.3.3 纳米材料与神经退行性疾病 | 第41-50页 |
| 1.3.3.1 神经退行性疾病概述 | 第41-45页 |
| 1.3.3.2 神经退行性疾病的诊断及治疗方案 | 第45-48页 |
| 1.3.3.3 纳米材料在神经退行性疾病的诊疗中的应用潜能 | 第48-50页 |
| 1.3.4 纳米材料的其他生物学反应 | 第50页 |
| 1.4 纳米材料对蛋白质的作用 | 第50-55页 |
| 1.4.1 概述 | 第50-52页 |
| 1.4.2 纳米材料对蛋白质的影响 | 第52-55页 |
| 1.4.2.1 纳米材料对蛋白质构象及活性的改变 | 第52-53页 |
| 1.4.2.2 纳米材料对蛋白质的修饰作用 | 第53页 |
| 1.4.2.3 纳米材料使蛋白质产生新的抗原表位 | 第53页 |
| 1.4.2.4 纳米材料影响蛋白聚集 | 第53-55页 |
| 第2章 氧化石墨烯可促进病变亨廷顿病变蛋白聚集体的泛素化及自噬依赖性清除 | 第55-100页 |
| 2.1 引言 | 第55页 |
| 2.2 实验材料 | 第55-58页 |
| 2.2.1 生物及化学试剂 | 第55-56页 |
| 2.2.2 抗体及来源 | 第56页 |
| 2.2.3 实验用细胞系及来源 | 第56-57页 |
| 2.2.4 质粒及来源 | 第57页 |
| 2.2.5 实验耗材及来源 | 第57页 |
| 2.2.6 实验仪器与设备 | 第57-58页 |
| 2.3 实验方法 | 第58-66页 |
| 2.3.1 氧化石墨烯的合成方法 | 第58页 |
| 2.3.2 氧化石墨烯的物理化学性质表征 | 第58页 |
| 2.3.3 细胞培养 | 第58页 |
| 2.3.4 细胞转染 | 第58-59页 |
| 2.3.5 细胞活力检测 | 第59页 |
| 2.3.6 Western Blot检测及数据处理 | 第59-62页 |
| 2.3.6.1 Western Blot所用试剂及配方 | 第59-60页 |
| 2.3.6.2 Western Blot实施过程 | 第60-62页 |
| 2.3.6.3 Western Blot实验数据处理 | 第62页 |
| 2.3.7 GFP-LC3阳性细胞镜下观测及统计计数 | 第62页 |
| 2.3.8 自噬特异性标志物的染色及观测 | 第62-63页 |
| 2.3.9 透射电子显微镜(TEM)下自噬泡的观测 | 第63页 |
| 2.3.10 siRNA的转染方法 | 第63-64页 |
| 2.3.11 免疫荧光检测 | 第64-65页 |
| 2.3.12 免疫沉淀检测 | 第65-66页 |
| 2.3.13 材料与蛋白结合实验 | 第66页 |
| 2.3.14 实验数据的统计分析 | 第66页 |
| 2.4 实验结果与讨论 | 第66-96页 |
| 2.4.1 氧化石墨烯的合成与表征 | 第66-69页 |
| 2.4.2 氧化石墨烯的细胞毒性研究 | 第69页 |
| 2.4.3 小结 | 第69-70页 |
| 2.4.4 氧化石墨烯具有清除聚集体的能力 | 第70-72页 |
| 2.4.5 氧化石墨烯清除聚集体的能力具有浓度和时间依赖性 | 第72-73页 |
| 2.4.6 小尺寸的氧化石墨烯对蛋白聚集体具有更强的清除能力 | 第73-74页 |
| 2.4.7 氧化石墨烯对蛋白聚集体的清除是通过自噬途径而非蛋白酶体途径 | 第74-77页 |
| 2.4.8 ATG5敲除对氧化石墨烯清除蛋白聚集体的影响 | 第77-78页 |
| 2.4.9 小结 | 第78-79页 |
| 2.4.10 氧化石墨烯可引起细胞自噬现象 | 第79-83页 |
| 2.4.10.1 氧化石墨烯可引起GFP-LC3/HeLa细胞中荧光点状聚集的增多 | 第79页 |
| 2.4.10.2 氧化石墨烯引起GFP-LC3/HeLa细胞中的荧光点状聚集与溶酶体及细胞内酸性物质发生共定位现象 | 第79-80页 |
| 2.4.10.3 氧化石墨烯在HeLa细胞中诱导产生自噬泡 | 第80-81页 |
| 2.4.10.4 氧化石墨烯可引起细胞内内源性LC3-Ⅰ型向Ⅱ型的转化 | 第81-83页 |
| 2.4.10.5 氧化石墨烯可引起细胞内内源性LC3-Ⅰ型向Ⅱ型的转化具有浓度效应 | 第83页 |
| 2.4.11 氧化石墨烯诱导完整的自噬流 | 第83-86页 |
| 2.4.11.1 氧化石墨烯不影响底物蛋白p62/SQSTM1的降解 | 第84页 |
| 2.4.11.2 氧化石墨烯诱导细胞内自噬体的合成增多 | 第84-85页 |
| 2.4.11.3 氧化石墨烯可在GFP-LC3/HeLa细胞中诱导游离GFP释放的增多 | 第85-86页 |
| 2.4.12 氧化石墨烯引起的自噬是ERK依赖的及mTOR非依赖的 | 第86-89页 |
| 2.4.13 小结 | 第89页 |
| 2.4.14 氧化石墨烯可引起细胞内蛋白包括GFP-Htt(Q74)泛素化水平的增高 | 第89-92页 |
| 2.4.15 氧化石墨烯引起的泛素化水平的升高对蛋白聚集体的清除是必须的 | 第92-94页 |
| 2.4.16 氧化石墨烯具有更倾向于结合泛素化蛋白包括GFP-Htt(Q74)蛋白的能力 | 第94-96页 |
| 2.4.17 小结 | 第96页 |
| 2.5 总结与讨论 | 第96-100页 |
| 参考文献 | 第100-113页 |
| 致谢 | 第113-115页 |
| 缩略语 | 第115-117页 |
| 附录一 | 第117-119页 |
| 附录二 | 第119-121页 |
| 攻读博士学位期间已发表和待发表的学术论文及专利 | 第119-121页 |
| 攻读博士学位期间所获得的学术奖励 | 第121页 |
| 攻读博士学位期间所参加的学术会议 | 第121页 |
