| 摘要 | 第6-8页 |
| abstract | 第8-9页 |
| 1B英文缩略表 | 第15-16页 |
| 第一章 绪论 | 第16-24页 |
| 1.1 生物脱胶概论 | 第16-18页 |
| 1.1.1 生物脱胶的概念 | 第16页 |
| 1.1.2 生物菌脱胶 | 第16-17页 |
| 1.1.3 生物酶脱胶 | 第17-18页 |
| 1.2 生物脱胶的关键酶 | 第18页 |
| 1.2.1 果胶酶的研究 | 第18页 |
| 1.2.2 半纤维素酶的研究 | 第18页 |
| 1.2.3 木质素降解酶的研究 | 第18页 |
| 1.3 生物脱胶过程及机理 | 第18-19页 |
| 1.4 多基因共表达 | 第19-23页 |
| 1.4.1 多基因共表达系统 | 第19-20页 |
| 1.4.2 多基因共表达的载体构建策略 | 第20-21页 |
| 1.4.3 多基因表达的控制策略 | 第21-23页 |
| 1.5 研究目的和意义 | 第23-24页 |
| 第二章 生物脱胶关键酶基因的克隆与分析 | 第24-39页 |
| 2.1 材料和方法 | 第24-26页 |
| 2.1.1 试验材料 | 第24页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第24页 |
| 2.1.3 主要仪器设备 | 第24-25页 |
| 2.1.4 主要培养基 | 第25-26页 |
| 2.1.5 常用溶液及缓冲液 | 第26页 |
| 2.2 方法 | 第26-29页 |
| 2.2.1 菌株活化提纯 | 第26页 |
| 2.2.2 基因组DNA提取 | 第26-27页 |
| 2.2.3 关键酶基因的PCR扩增 | 第27-28页 |
| 2.2.4 目的片段回收 | 第28页 |
| 2.2.5 目的片段与载体连接 | 第28-29页 |
| 2.2.6 重组质粒转化 | 第29页 |
| 2.2.7 关键酶基因的生物信息学分析 | 第29页 |
| 2.3 结果与分析 | 第29-38页 |
| 2.3.1 基因组DNA提取 | 第29-30页 |
| 2.3.2 关键酶基因的扩增 | 第30-31页 |
| 2.3.3 关键酶基因的生物信息学分析 | 第31-38页 |
| 2.4 讨论 | 第38页 |
| 2.5 小结 | 第38-39页 |
| 第三章 关键酶多基因共表达载体构建与表达 | 第39-63页 |
| 3.1 材料和方法 | 第39-41页 |
| 3.1.1 试验材料 | 第39页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第39页 |
| 3.1.3 主要仪器设备 | 第39-40页 |
| 3.1.4 主要培养基 | 第40页 |
| 3.1.5 常用溶液与缓冲液 | 第40-41页 |
| 3.2 方法 | 第41-49页 |
| 3.2.1 引物设计 | 第41-43页 |
| 3.2.2 关键酶基因的获得 | 第43页 |
| 3.2.3 关键酶多基因共表达载体的构建 | 第43-46页 |
| 3.2.4 重组子筛选与鉴定 | 第46页 |
| 3.2.5 SDS-PAGE分析 | 第46-47页 |
| 3.2.6 酶活力测定 | 第47-49页 |
| 3.2.7 表达条件优化 | 第49页 |
| 3.2.8 平板法检测 | 第49页 |
| 3.3 结果与分析 | 第49-59页 |
| 3.3.1 关键酶基因的扩增 | 第49-50页 |
| 3.3.2 重组质粒检验 | 第50-51页 |
| 3.3.3 SDS-PAGE电泳结果与分析 | 第51-52页 |
| 3.3.4 酶活测定 | 第52-59页 |
| 3.4 讨论 | 第59-61页 |
| 3.4.1 重组质粒构建的方法与策略 | 第59-60页 |
| 3.4.2 多基因表达规律 | 第60页 |
| 3.4.3 多基因相互作用 | 第60-61页 |
| 3.4.4 检测方法分析 | 第61页 |
| 3.5 小结 | 第61-63页 |
| 第四章 关键酶共表达载体表达产物的酶学性质研究 | 第63-72页 |
| 4.1 材料和仪器 | 第63页 |
| 4.1.1 工程菌株 | 第63页 |
| 4.1.2 主要试剂 | 第63页 |
| 4.1.3 主要仪器设备 | 第63页 |
| 4.1.4 主要培养基 | 第63页 |
| 4.2 方法 | 第63-64页 |
| 4.2.1 重组工程菌株的诱导 | 第63页 |
| 4.2.2 酶学特性分析 | 第63-64页 |
| 4.3 实验结果 | 第64-70页 |
| 4.3.1 胞内酶与胞外酶酶活测定 | 第64-65页 |
| 4.3.2 金属离子对酶活影响 | 第65-66页 |
| 4.3.3 酶活热稳定性测定 | 第66-68页 |
| 4.3.4 酶活酸碱稳定性测定 | 第68-69页 |
| 4.3.5 动力学参数测定 | 第69-70页 |
| 4.4 讨论 | 第70页 |
| 4.4.1 胞内与胞外酶的分泌 | 第70页 |
| 4.4.2 酶学性质变化 | 第70页 |
| 4.5 小结 | 第70-72页 |
| 第五章 重组质粒 28PXM(91X)在DCE-01 中的表达 | 第72-79页 |
| 5.1 材料和仪器 | 第72页 |
| 5.1.1 菌株与纤维原料 | 第72页 |
| 5.1.2 主要试剂 | 第72页 |
| 5.1.3 主要仪器设备 | 第72页 |
| 5.1.4 主要培养基 | 第72页 |
| 5.2 方法 | 第72-73页 |
| 5.2.1 菌株培养与提纯 | 第72页 |
| 5.2.2 DCE-01 感受态细胞的制备 | 第72-73页 |
| 5.2.3 重组质粒转化 | 第73页 |
| 5.2.4 酶活力测定 | 第73页 |
| 5.2.5 脱胶实验 | 第73页 |
| 5.2.6 脱胶效果检测 | 第73页 |
| 5.3 试验结果 | 第73-77页 |
| 5.3.1 DCE-01 重组质粒检验 | 第73-74页 |
| 5.3.2 DCE-01 重组菌SDS-PAGE电泳检验 | 第74页 |
| 5.3.3 DCE-01 重组菌酶活测定结果 | 第74-76页 |
| 5.3.4 DCE-01 重组菌脱胶功能检验 | 第76-77页 |
| 5.4 讨论 | 第77-78页 |
| 5.4.1 DCE-01 菌株转化体系 | 第77页 |
| 5.4.2 工程菌生物脱胶应用 | 第77-78页 |
| 5.5 小结 | 第78-79页 |
| 第六章 结论 | 第79-81页 |
| 参考文献 | 第81-88页 |
| 致谢 | 第88-89页 |
| 作者简历 | 第89页 |