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番鸭小鹅瘟病免疫荧光诊断方法的建立及应用

摘要第1-9页
ABSTRACT第9-10页
综述第10-23页
 1 GPV 病原学第11-15页
   ·GPV 的分类学地位第11页
   ·GPV 形态与理化特性第11-12页
   ·GPV 的培养特性第12页
   ·GPV 的分子生物学第12-14页
   ·GPV 的流行病学第14页
   ·GPV 的临床症状第14页
   ·GPV 病理剖检第14-15页
 2 GPV 的防治第15-17页
   ·GPV 弱毒苗第15页
   ·GPV 灭活苗第15-16页
   ·GPV 基因工程疫苗第16页
   ·GPV 抗血清第16页
   ·GPV 卵黄抗体第16页
   ·GPV 单抗第16-17页
 3 小鹅瘟病诊断技术第17-19页
   ·免疫学诊断法第17-19页
   ·分子生物学诊断方法第19页
 4 以单克隆抗体为核心建立的免疫荧光技术在GPV 检测中的应用第19-22页
   ·单克隆抗体技术第19-21页
   ·免疫荧光技术检测方面的优势第21-22页
 5 研究目的和研究内容第22-23页
第一章 抗GPV 杂交瘤细胞的复苏和单抗制备第23-30页
 1 材料与方法第23-25页
   ·病毒和杂交瘤细胞株第23页
   ·实验动物第23-24页
   ·主要试剂第24页
   ·常用试剂的配制(见附录1)第24页
   ·主要仪器和设备(见附录2)第24页
   ·杂交瘤细胞株的复苏第24页
   ·细胞的冻存第24页
   ·小鼠腹水的制备第24-25页
   ·冰冻切片的准备第25页
   ·间接免疫荧光试验(IFA)第25页
   ·腹水特性分析第25页
 2 结果第25-27页
   ·杂交瘤细胞株的复苏第25-26页
   ·GPV 单抗IFA 效价测定第26页
   ·GPV 单抗特异性第26-27页
 3 结论第27页
 4 讨论第27-30页
   ·影响杂交瘤细胞复苏的因素第27-28页
   ·影响腹水产量和质量的因素第28-30页
第二章 GPV 单抗的荧光标记及直接荧光诊断方法的建立第30-39页
 1 材料与方法第30-32页
   ·病毒和单抗第30-31页
   ·主要试剂及其配制第31页
   ·FITC 单抗的研制第31页
   ·病毒感染细胞板的制备第31页
   ·感染组织冰冻切片的制备第31页
   ·间接免疫荧光试验(IFA)第31-32页
   ·直接免疫荧光试验(DFA)第32页
   ·GPV 荧光抗体的特性测定第32页
   ·DFA 与IFA 符合率比较第32页
 2 结果第32-35页
   ·单抗的蛋白浓度第32-33页
   ·荧光抗体的鉴定第33-35页
   ·保存期测定第35页
 3. 结论第35-36页
 4 讨论第36-39页
   ·影响标记的因素第36-37页
   ·直接荧光法与其它检测小鹅瘟常用方法的比较第37-39页
第三部分 应用DFA 检测GPV 在番鸭体内的动态分布第39-45页
 1 材料与方法第39-40页
   ·病毒和试剂第39-40页
   ·常用试剂的配制(见附录1)第40页
   ·主要仪器和设备(见附录2)第40页
   ·GPV 人工感染试验第40页
   ·感染组织冰冻切片的制备第40页
   ·直接免疫荧光(DFA)试验第40页
 2 结果第40-44页
   ·临床症状与病理剖检第40-41页
   ·DFA 检测GPV 在番鸭体内的动态分布第41-42页
   ·DFA 检测GPV 在病死番鸭体内的分布第42-43页
   ·DFA 检测GPV 在番鸭各个器官中的分布率第43-44页
 3 结论与讨论第44-45页
   ·GPV 在各个组织中的分布规律第44页
   ·DFA 检测 GPV 最佳靶器官第44-45页
第四章 DFA、IFA 和VI 三种检测GPV 方法的比较第45-54页
 1 材料与方法第45-47页
   ·病毒和抗体第45-46页
   ·常用试剂的配制(见附录1)第46页
   ·主要仪器和设备(见附录2)第46页
   ·人工感染试验第46页
   ·感染组织冰冻切片的制备第46页
   ·间接免疫荧光试验(IFA)第46页
   ·直接免疫荧光试验(DFA)第46页
   ·病毒分离(VI)第46-47页
 2 结果第47-52页
   ·病毒分离(VI)结果第47页
   ·DFA 和IFA 检测结果第47-48页
   ·DFA、IFA 与VI 符合率的比较第48-52页
 3 讨论与分析第52页
   ·DFA 和IFA 两种方法的比较第52页
   ·DFA 和VI 两种方法的比较第52页
 4 结论第52-54页
参考文献第54-60页
附录1:常用试剂配制第60-63页
 1 HANK’S 液第60-61页
 2 0.8%生理盐水第61页
 3 PBS 溶液(0.02M PH7.4)第61页
 4 4%EDTA 溶液(抗凝剂)第61页
 5 CB 溶液(0.025M PH 9.0)第61-62页
 6 CB 溶液(0. 5M PH 9.5)第62页
 7 1%N_AN_3第62页
 8 冻存液的配制第62页
 9 考马斯亮兰G-250 染液第62-63页
附录2:主要仪器设备第63-64页
附录3 英文缩写词表第64-66页
致谢第66页

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