符号说明 | 第4-8页 |
中文摘要 | 第8-10页 |
英文摘要 | 第10-11页 |
1 前言 | 第12-24页 |
1.1 小麦白粉病概况 | 第12-18页 |
1.1.1 白粉病病原菌及防治 | 第12-13页 |
1.1.2 小麦白粉病的危害 | 第13-15页 |
1.1.3 抗小麦白粉病相关基因的研究进展 | 第15-18页 |
1.2 天冬氨酸蛋白酶的研究进展 | 第18-19页 |
1.3 柯巴基焦磷酸合酶基因的研究进展 | 第19-21页 |
1.4 小麦转基因技术及其应用 | 第21-22页 |
1.4.1 转基因技术的发展 | 第21页 |
1.4.2 基因枪技术的发展 | 第21-22页 |
1.4.3 基因枪技术的优缺点 | 第22页 |
1.5 大麦条斑花叶病毒诱导的基因沉默 | 第22-23页 |
1.6 本研究的目的与意义 | 第23-24页 |
2 材料与方法 | 第24-45页 |
2.1 植物材料 | 第24页 |
2.2 菌株与载体 | 第24页 |
2.3 生化试剂 | 第24-25页 |
2.4 主要溶液配方 | 第25-26页 |
2.5 主要仪器 | 第26页 |
2.6 主要培养基 | 第26-27页 |
2.7 引物的设计与合成 | 第27-28页 |
2.8 方法 | 第28-45页 |
2.8.1 TiASP基因的基因枪转化 | 第28-32页 |
2.8.2 小麦TaCPS1基因的克隆及序列分析 | 第32-38页 |
2.8.3 小麦TaCPS1基因的表达分析 | 第38-39页 |
2.8.4 水杨酸和茉莉酸甲酯诱导后的表达情况 | 第39-40页 |
2.8.5 小麦TaCPS1基因功能的初步分析 | 第40-45页 |
3 结果与分析 | 第45-59页 |
3.1 表达载体质粒的获得和检测 | 第45页 |
3.2 小麦成熟胚植株再生的影响因素 | 第45-48页 |
3.2.1 小麦成熟胚诱导愈伤 | 第45-47页 |
3.2.2 小麦成熟胚分化培养基植物生长调节剂 | 第47-48页 |
3.3 基因枪介导的小麦TiASP基因的小麦遗传转化 | 第48-51页 |
3.3.1 小麦成熟胚的遗传转化 | 第48-49页 |
3.3.2 转基因植株的PCR检测 | 第49-50页 |
3.3.3 转基因植株的表现型鉴定 | 第50-51页 |
3.4 小麦TaCPS1基因的克隆与功能的初步分析 | 第51-57页 |
3.4.1 TaCPS1基因的cDNA序列克隆 | 第51页 |
3.4.2 TaCPS1基因的生物信息学分析 | 第51-56页 |
3.4.3 TaCPS1基因表达的荧光定量分析 | 第56页 |
3.4.4 TaCPS1基因在水杨酸和茉莉酸甲酯诱导后的表达情况分析 | 第56-57页 |
3.5 小麦TaCPS1基因VIGS载体的构建 | 第57-59页 |
3.5.1 基因TaCPS1部分序列的获得 | 第57页 |
3.5.2 pCa-γbLIC载体的单酶切及鉴定 | 第57-58页 |
3.5.3 LIC及阳性重组子的鉴定 | 第58页 |
3.5.4 农杆菌阳性重组子鉴定 | 第58-59页 |
4 讨论 | 第59-61页 |
4.1 基因枪介导的遗传转化 | 第59-60页 |
4.2 小麦TiASP基因抗白粉病菌的功能验证 | 第60页 |
4.3 TaCPS1基因的克隆与功能分析 | 第60-61页 |
5 结论 | 第61-63页 |
参考文献 | 第63-70页 |
致谢 | 第70-71页 |
攻读硕士学位期间发表论文 | 第71页 |