| 符号说明 | 第4-10页 |
| 中文摘要 | 第10-12页 |
| Abstract | 第12-13页 |
| 1 前言 | 第14-28页 |
| 1.1 烟草及其经济价值 | 第14页 |
| 1.2 烟田肥料利用 | 第14-15页 |
| 1.2.1 烟田施肥的必要性 | 第14页 |
| 1.2.2 烟草对肥料的吸收 | 第14-15页 |
| 1.3 化学肥料对烟草产业的影响 | 第15页 |
| 1.3.1 化肥的积极影响 | 第15页 |
| 1.3.2 化肥的不良影响 | 第15页 |
| 1.4 我国烟田化肥使用中存在的问题 | 第15-16页 |
| 1.4.1 破坏土壤生态 | 第15页 |
| 1.4.2 对环境造成污染 | 第15-16页 |
| 1.4.3 肥料利用率低 | 第16页 |
| 1.5 植物根际促生细菌 | 第16-18页 |
| 1.5.1 植物根际促生细菌的基本概念 | 第16页 |
| 1.5.2 植物根际促生细菌的种类 | 第16-17页 |
| 1.5.3 植物根际促生细菌的促生作用 | 第17-18页 |
| 1.5.3.1 提供营养物质 | 第17-18页 |
| 1.5.3.2 产生植物生长调节物质 | 第18页 |
| 1.6 氮对于烟草种植的重要性及解氮菌 | 第18-21页 |
| 1.6.1 氮素对烟草种植的意义 | 第18-20页 |
| 1.6.1.1 烟草对氮的吸收 | 第18-19页 |
| 1.6.1.2 不同形态氮肥影响烟草对钾的吸收 | 第19页 |
| 1.6.1.3 不同形态氮肥影响烟草对磷和钙的吸收 | 第19页 |
| 1.6.1.4 氮肥对烟叶的影响 | 第19-20页 |
| 1.6.2 土壤中的含氮有机物及其利用 | 第20-21页 |
| 1.6.2.1 土壤中含氮有机物的种类 | 第20页 |
| 1.6.2.2 蛋白酶概述 | 第20页 |
| 1.6.2.3 产蛋白酶的PGPR菌株 | 第20-21页 |
| 1.6.2.4 几丁质酶概述 | 第21页 |
| 1.6.2.5 产几丁质酶的菌株 | 第21页 |
| 1.7 烟草对土壤中磷的利用 | 第21-22页 |
| 1.7.1 土壤中的磷 | 第21-22页 |
| 1.7.2 解磷菌及其种类 | 第22页 |
| 1.8 烟草对土壤中钾的利用 | 第22-23页 |
| 1.8.1 土壤中的钾 | 第22页 |
| 1.8.2 钾对烟叶的影响 | 第22页 |
| 1.8.3 解钾菌及其种类 | 第22-23页 |
| 1.9 微生物肥料 | 第23-25页 |
| 1.9.1 微生物肥料的概念 | 第23页 |
| 1.9.2 微生物肥料的特点 | 第23页 |
| 1.9.3 微生物肥料的种类 | 第23-24页 |
| 1.9.4 我国微生物肥料的发展现状 | 第24页 |
| 1.9.5 我国微生物肥料使用中存在的问题 | 第24-25页 |
| 1.10 本研究的立项依据、研究内容、技术路线 | 第25-28页 |
| 1.10.1 立项依据 | 第25-26页 |
| 1.10.2 研究内容 | 第26-27页 |
| 1.10.3 技术路线 | 第27-28页 |
| 2 材料与方法 | 第28-40页 |
| 2.1 材料 | 第28-31页 |
| 2.1.1 样品 | 第28页 |
| 2.1.1.1 土壤样品 | 第28页 |
| 2.1.1.2 待测菌株 | 第28页 |
| 2.1.2 培养基 | 第28-30页 |
| 2.1.2.1 牛肉膏蛋白胨液体培养基 | 第28页 |
| 2.1.2.2 牛肉膏蛋白胨固体培养基 | 第28页 |
| 2.1.2.3 高氏一号培养基 | 第28页 |
| 2.1.2.4 PDA培养基 | 第28-29页 |
| 2.1.2.5 脱脂奶粉培养基 | 第29页 |
| 2.1.2.6 几丁质培养基 | 第29页 |
| 2.1.2.7 氨化细菌分离培养基 | 第29页 |
| 2.1.2.8 R2A液体培养基 | 第29页 |
| 2.1.2.9 LB培养基 | 第29页 |
| 2.1.2.10 解磷能力测定所用培养基 | 第29页 |
| 2.1.2.11 测定解钾能力所用培养基 | 第29页 |
| 2.1.2.12 豆芽汁培养基 | 第29-30页 |
| 2.1.3 主要仪器和设备 | 第30页 |
| 2.1.4 主要溶液的配置 | 第30-31页 |
| 2.1.4.1 细菌总DNA提取试剂的配制 | 第30-31页 |
| 2.1.4.2 生理生化试剂的配制 | 第31页 |
| 2.1.4.3 产生长素能力测定试剂 | 第31页 |
| 2.1.4.4 解磷效果测定试剂 | 第31页 |
| 2.2 方法 | 第31-40页 |
| 2.2.1 产蛋白酶菌株的筛选 | 第31-33页 |
| 2.2.1.1 土壤细菌的富集 | 第31-32页 |
| 2.2.1.2 系列梯度稀释 | 第32页 |
| 2.2.1.3 涂布平板 | 第32页 |
| 2.2.1.4 细菌分离 | 第32页 |
| 2.2.1.5 复筛 | 第32-33页 |
| 2.2.1.6 细菌分离物的纯化 | 第33页 |
| 2.2.2 产几丁质酶菌株的筛选 | 第33-34页 |
| 2.2.2.1 胶体几丁质制备 | 第33页 |
| 2.2.2.2 土壤细菌的富集 | 第33页 |
| 2.2.2.3 系列梯度稀释 | 第33页 |
| 2.2.2.4 涂布平板 | 第33-34页 |
| 2.2.2.5 细菌分离纯化 | 第34页 |
| 2.2.3 氨化细菌的筛选 | 第34页 |
| 2.2.3.1 细菌初筛 | 第34页 |
| 2.2.3.2 复筛 | 第34页 |
| 2.2.4 细菌总DNA的提取 | 第34页 |
| 2.2.5 16S rRNA基因片段的扩增 | 第34-35页 |
| 2.2.5.1 PCR加样步骤 | 第35页 |
| 2.2.5.2 PCR仪程序设定 | 第35页 |
| 2.2.5.3 琼脂糖凝胶电泳 | 第35页 |
| 2.2.6 细菌分泌生长素含量的测定 | 第35-36页 |
| 2.2.6.1 IAA产生菌初筛 | 第35页 |
| 2.2.6.2 细菌分泌IAA定量测定 | 第35-36页 |
| 2.2.7 细菌分泌细胞分裂素情况测定 | 第36页 |
| 2.2.7.1 小麦种子的播种与培养 | 第36页 |
| 2.2.7.2 细菌发酵液的制备 | 第36页 |
| 2.2.7.3 细胞分裂素产生情况的测定 | 第36页 |
| 2.2.8 解磷能力测定 | 第36-37页 |
| 2.2.8.1 溶磷圈测定 | 第36页 |
| 2.2.8.2 速效磷测定 | 第36-37页 |
| 2.2.9 解钾能力测定 | 第37页 |
| 2.2.9.1 钾矿石处理 | 第37页 |
| 2.2.9.2 种子液制备 | 第37页 |
| 2.2.9.3 发酵液制备 | 第37页 |
| 2.2.9.4 发酵液的处理 | 第37页 |
| 2.2.10 培养基优化 | 第37-38页 |
| 2.2.10.1 种子液制备 | 第37页 |
| 2.2.10.2 碳源优化 | 第37-38页 |
| 2.2.10.3 氮源优化 | 第38页 |
| 2.2.10.4 无机盐优化 | 第38页 |
| 2.2.10.5 正交试验 | 第38页 |
| 2.2.11 平板菌落计数 | 第38-40页 |
| 2.2.11.1 种子液制备 | 第38页 |
| 2.2.11.2 制备计数样品 | 第38页 |
| 2.2.11.3 菌落计数 | 第38-40页 |
| 3 结果与分析 | 第40-56页 |
| 3.1 蛋白酶产生菌的筛选鉴定结果 | 第40-42页 |
| 3.1.1 筛选结果 | 第40-41页 |
| 3.1.2 蛋白酶产生菌的鉴定 | 第41-42页 |
| 3.2 几丁质酶产生菌的筛选鉴定结果 | 第42-43页 |
| 3.2.1 几丁质酶产生菌的筛选结果 | 第42-43页 |
| 3.2.2 几丁质酶产生菌的鉴定结果 | 第43页 |
| 3.3 氨化细菌的筛选鉴定结果 | 第43-45页 |
| 3.3.1 氨化细菌的筛选结果 | 第43-44页 |
| 3.3.2 氨化细菌的鉴定结果 | 第44-45页 |
| 3.4 烟草根际促生菌产植物激素和解磷解钾功能的测定 | 第45-48页 |
| 3.4.1 菌株产生长素的细胞分裂素能力的测定 | 第45-46页 |
| 3.4.2 菌株解磷解钾能力的测定 | 第46-48页 |
| 3.5 菌株发酵培养基优化 | 第48-56页 |
| 3.5.1 碳源优化 | 第48页 |
| 3.5.2 氮源优化 | 第48-49页 |
| 3.5.2.1 有机氮源优化 | 第48-49页 |
| 3.5.2.2 无机氮源优化 | 第49页 |
| 3.5.3 无机盐优化 | 第49-50页 |
| 3.5.4 正交试验 | 第50-56页 |
| 3.5.4.1 PRI正交试验 | 第50-52页 |
| 3.5.4.2 PR10正交试验 | 第52页 |
| 3.5.4.3 JP6正交试验 | 第52-53页 |
| 3.5.4.4 JP9正交试验 | 第53-54页 |
| 3.5.4.5 JX9正交试验 | 第54-56页 |
| 4 讨论 | 第56-58页 |
| 5 结论 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-69页 |
| 致谢 | 第69页 |