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αB-crystallin:一新心脏钠离子通道Na_v1.5作用蛋白质

摘要第4-6页
Abstract第6-7页
1 绪论第10-25页
    1.1 心肌细胞动作电位第10-12页
    1.2 遗传性心律失常的分子遗传学研究进展第12-17页
    1.3 钠离子通道Na_v1.5概述第17-22页
    1.4 αB-crystallin蛋白相关研究进展及现状第22-24页
    1.5 本研究主要研究内容以及主要技术路线第24-25页
2 实验材料和方法第25-49页
    2.1 实验材料第25页
    2.2 主要仪器第25-26页
    2.3 主要试剂,耗材及试剂盒第26-29页
    2.4 载体的构建第29-34页
    2.5 GST融合蛋白的诱导表达和纯化第34-35页
    2.6 细胞培养以及转染第35-38页
    2.7 免疫沉淀和蛋白质免疫印迹第38-42页
    2.8 组织切片的免疫荧光标记实验第42页
    2.9 膜蛋白的提取以及膜蛋白稳定性实验第42-44页
    2.10 膜片钳细胞电生理技术对离子通道电流的检测第44-49页
3 实验结果第49-72页
    3.1 通过酵母双杂交技术寻找新的Na_v1.5作用候选蛋白第49页
    3.2 GST-pull down验证LoopⅡ片段与αB-crystallin存在相互作用第49-51页
    3.3 细胞体内验证Na_v1.5与αB-crystallin存在相互作用第51-54页
    3.4 Na_v1.5和αB-crystallin在心脏组织中的共定位第54-55页
    3.5 αB-crystallin对钠通道电生理功能的影响第55-59页
    3.6 αB-crystallin对钠通道Na_v1.5在细胞膜上表达的影响第59-62页
    3.7 αB-crystallin对钠通道Na_v1.5泛素化的影响第62-63页
    3.8 αB-crystallin对钠通道Na_v1.5在细胞膜上稳定性的影响第63-64页
    3.9 αB-crystallin与Nedd4-2之间存在相互作用第64-66页
    3.10 αB-crystallin对Nedd4-2与Na_v1.5以及Nedd4-2对Na_v1.5与αB-crystallin之间相互作用的影响第66-68页
    3.11 αB-crystallin增大钠通道电流密度是通过影响自身与Nedd4-2的相互作用以及Nedd4-2介导的Na_v1.5泛素化第68-70页
    3.12 αB-crystallin突变对Na_v1.5钠通道电流密度的影响第70-72页
4 讨论第72-76页
5 全文总结与展望第76-78页
致谢第78-80页
参考文献第80-92页
附录1 攻读博士学位期间发表的学术论文目录第92-94页
附录2 20种常见氨基酸的中英文名称第94-95页
附录3 本文所用到的主要英文缩略词对照表第95页

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