中文摘要 | 第8-10页 |
英文摘要 | 第10-12页 |
1 前言 | 第13-22页 |
1.1 棉花雄性不育系的类型 | 第13-14页 |
1.1.1 细胞核雄性不育(GMS) | 第13页 |
1.1.2 细胞质雄性不育(CMS) | 第13-14页 |
1.2 棉花核雄性不育的形态学研究 | 第14页 |
1.3 棉花核雄性不育的细胞学特征 | 第14-15页 |
1.4 棉花核雄性不育的生理生化研究 | 第15-16页 |
1.4.1 淀粉合成 | 第15页 |
1.4.2 蛋白质合成和氨基酸含量 | 第15-16页 |
1.4.3 酶和内源激素 | 第16页 |
1.5 棉花雄性不育分子机理 | 第16-19页 |
1.5.1 核雄性不育形成的分子机理研究 | 第16-19页 |
1.5.1.1 核雄性不育系的基因类型 | 第17页 |
1.5.1.2 核雄性不育基因的定位与克隆 | 第17-18页 |
1.5.1.3 基因差异表达分析 | 第18-19页 |
1.6 蛋白质组学 | 第19-21页 |
1.6.1 蛋白质组学的概念及内容 | 第19-20页 |
1.6.2 差异蛋白质组学研究技术 | 第20-21页 |
1.6.2.1 双向凝胶电泳技术 | 第20页 |
1.6.2.2 同位素标记相对和绝对定量技术 | 第20-21页 |
1.7 本研究的目的和意义 | 第21-22页 |
2 材料与方法 | 第22-31页 |
2.1 材料 | 第22页 |
2.1.1 植物材料 | 第22页 |
2.1.2 棉花花蕾的取样 | 第22页 |
2.2 方法 | 第22-31页 |
2.2.1 鉴定不育株和可育株 | 第22页 |
2.2.2 鉴定不育花粉败育时期 | 第22-23页 |
2.2.3 iTRAQ定量蛋白质组实验方法 | 第23-27页 |
2.2.3.1 蛋白质提取和浓度检测 | 第23-24页 |
2.2.3.2 蛋白质酶解 | 第24页 |
2.2.3.3 iTRAQ标记 | 第24页 |
2.2.3.4 SCX分离 | 第24-25页 |
2.2.3.5 基于Q Exactive的液相色谱-质谱联用分析 | 第25页 |
2.2.3.6 质谱鉴定及数据分析 | 第25-26页 |
2.2.3.7 生物信息学分析 | 第26-27页 |
2.2.4 qRT-PCR验证 | 第27-31页 |
2.2.4.1 引物设计及合成 | 第27-28页 |
2.2.4.2 RNA提取 | 第28-29页 |
2.2.4.3 qRT-PCR | 第29-31页 |
2.2.4.3.1 反转录反应 | 第29-30页 |
2.2.4.3.2 Real Time PCR反应 | 第30-31页 |
3 结果与分析 | 第31-48页 |
3.1 不育株与可育株细胞学和形态学观察 | 第31-32页 |
3.2 蛋白质的提取及检测 | 第32页 |
3.3 初级质谱数据分析和蛋白质鉴定基本信息 | 第32-35页 |
3.4 蛋白功能注释 | 第35-36页 |
3.5 不育株与可育株花药差异表达蛋白分析 | 第36-47页 |
3.5.1 差异表达蛋白的鉴定 | 第36-40页 |
3.5.2 差异表达蛋白的GO富集分析 | 第40-42页 |
3.5.3 差异表达蛋白的COG功能分类 | 第42页 |
3.5.4 差异表达蛋白的Pathway富集分析 | 第42-47页 |
3.5.4.1 不育株和可育株在相同发育时期的Pathway富集分析 | 第43-45页 |
3.5.4.2 同种材料在不同发育时期的Pathway富集分析 | 第45页 |
3.5.4.3 不育株与可育株中特异表达蛋白的Pathway富集分析 | 第45-47页 |
3.6 qRT-PCR验证 | 第47-48页 |
4 讨论 | 第48-50页 |
4.1 影响棉花发育的转录因子 | 第48-49页 |
4.2 花粉壁形成途径 | 第49页 |
4.3 淀粉和蔗糖代谢途径 | 第49-50页 |
5 结论 | 第50-52页 |
参考文献 | 第52-58页 |
附录 | 第58-63页 |
致谢 | 第63页 |