| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 第一章 绪论 | 第10-20页 |
| 1.1 猪圆环病毒概况 | 第10-12页 |
| 1.1.1 猪圆环病毒2型的特征与结构 | 第10-11页 |
| 1.1.2 PCV2的致病性和危害 | 第11-12页 |
| 1.2 病毒样颗粒的研究现状 | 第12-16页 |
| 1.2.1 病毒样颗粒的概况 | 第12页 |
| 1.2.2 病毒样颗粒作为疫苗的优势 | 第12-13页 |
| 1.2.3 VLPs疫苗的研究现状 | 第13-15页 |
| 1.2.4 PCV2 VLPs的制备与应用现状 | 第15-16页 |
| 1.3 VLPs稳定性的研究 | 第16-19页 |
| 1.3.1 温度对VLPs稳定性的影响 | 第17页 |
| 1.3.2 pH值对VLPs稳定性的影响 | 第17-18页 |
| 1.3.3 稳定剂在提高VLPs稳定性中的研究 | 第18-19页 |
| 1.4 本研究的目的与意义 | 第19-20页 |
| 第二章 猪圆环病毒2型病毒样颗粒的制备 | 第20-32页 |
| 2.1 实验材料 | 第20-21页 |
| 2.1.1 质粒、血清和菌株 | 第20页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第20-21页 |
| 2.1.3 主要仪器设备 | 第21页 |
| 2.2 实验方法 | 第21-26页 |
| 2.2.1 重组质粒转化E.coli DH5α感受态 | 第21页 |
| 2.2.2 重组质粒的提取 | 第21-22页 |
| 2.2.3 重组质粒的鉴定 | 第22-23页 |
| 2.2.4 重组Cap蛋白的表达与纯化 | 第23-24页 |
| 2.2.5 PCV2 VLP的制备与鉴定 | 第24-26页 |
| 2.3 结果 | 第26-30页 |
| 2.3.1 重组质粒pET100-FL的鉴定 | 第26-27页 |
| 2.3.2 重组Cap蛋白的表达 | 第27-28页 |
| 2.3.3 重组Cap蛋白的纯化以及western blot分析 | 第28页 |
| 2.3.4 PCV2 VLPs的制备和细胞入侵分析 | 第28-29页 |
| 2.3.5 PCV2 VLPs排阻色谱 | 第29页 |
| 2.3.6 利用间接ELISA检测PCV2 VLPs的体外抗原性 | 第29-30页 |
| 2.4 讨论 | 第30-32页 |
| 第三章 PCV2 VLPs稳定性初步研究 | 第32-42页 |
| 3.1 实验材料 | 第32页 |
| 3.1.1 实验试剂 | 第32页 |
| 3.1.2 实验仪器 | 第32页 |
| 3.2 实验方法 | 第32-35页 |
| 3.2.1 BCA法测定VLPs浓度 | 第32-33页 |
| 3.2.2 PCV2 VLPs形态学观察和颗粒大小的测定 | 第33-34页 |
| 3.2.3 间接ELISA检测VLPs抗原性 | 第34页 |
| 3.2.4 PCV2 VLP稳定性 | 第34-35页 |
| 3.3 结果 | 第35-40页 |
| 3.3.1 PCV2 VLPs的制备 | 第35页 |
| 3.3.2 PCV2 VLPs形状结构和大小检测方法的建立 | 第35-36页 |
| 3.3.3 不同储存缓冲液对PCV2 VLPs的影响 | 第36-37页 |
| 3.3.4 NaCl浓度对PCV2 VLPs的影响 | 第37-39页 |
| 3.3.5 不同温度对PCV2 VLPs的影响 | 第39-40页 |
| 3.4 讨论 | 第40-42页 |
| 结论与创新点 | 第42-44页 |
| 参考文献 | 第44-53页 |
| 致谢 | 第53-54页 |
| 作者简历 | 第54页 |
