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桃果实中类胡萝卜素合成基因的克隆及其对蓝光的响应机制研究

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-9页
英文缩略词第9-15页
第一章 桃果实中类胡萝卜素合成和调控研究概述第15-21页
   ·引言第15-16页
   ·类胡萝卜素组成及性质第16-17页
   ·类胡萝卜素合成及调控第17-19页
   ·蓝光诱导效应第19-20页
   ·本文工作简介第20-21页
第二章 桃果实中类胡萝卜素合成相关酶基因的克隆及生物学分析第21-42页
   ·引言第21-22页
   ·材料与方法第22-29页
     ·实验材料第22页
     ·桃果实总RNA的提取第22页
     ·总RNA完整性、含量和纯度检测第22页
     ·桃果实类胡萝卜素合成相关酶基因的克隆第22-28页
       ·反转录第一链cDNA的合成第22页
       ·类胡萝卜素合成相关基因cDNA片段的扩增和检测第22-23页
       ·目的基因片段回收第23页
       ·连接反应第23-24页
       ·转化第24页
       ·阳性克隆的鉴定和测序第24页
       ·类胡萝卜素合成相关基因cDNA 3’末端克隆第24-26页
       ·类胡萝卜素合成相关基因cDNA 5’末端克隆第26-28页
       ·相关基因编码区cDNA序列的验证第28页
     ·类胡萝卜素合成相关基因及其编码蛋白生物信息学分析第28-29页
   ·结果与分析第29-40页
     ·桃果实类胡萝卜素合成相关酶基因的RACE全长扩增和编码区cDNA序列分离第29-31页
     ·类胡萝卜素合成相关基因及其所编码蛋白生物信息学的分析第31-40页
       ·相关酶蛋白的基本理化性质预测第31页
       ·氨基酸序列同源性比较与系统进化树分析第31-40页
       ·相关酶蛋白亚细胞定位及二、三级结构预测第40页
   ·讨论与结论第40-42页
第三章 类胡萝卜素合成相关酶基因在不同桃果实发育组织中的表达特性分析第42-50页
   ·引言第42页
   ·材料与方法第42-45页
     ·实验材料第42页
     ·类胡萝卜素测定第42-44页
       ·类胡萝卜素的提取第43页
       ·类胡萝卜素总量的测定第43页
       ·类胡萝卜素各成分含量的测定第43-44页
     ·相关基因的Real-Time定量PCR(qRT-PCR)分析第44-45页
       ·总RNA的提取第44页
       ·总RNA完整性、含量和纯度检测第44页
       ·反转录第一链cDNA的合成第44页
       ·相关基因荧光定量PCR测定第44-45页
   ·结果与分析第45-48页
     ·类胡萝卜素总量及各成分含量的变化第45-47页
     ·相关基因的组织特异性表达第47-48页
   ·讨论与结论第48-50页
第四章 类胡萝卜素合成相关酶基因在果实成熟期间的表达特性分析第50-57页
   ·引言第50-51页
   ·材料与方法第51-52页
     ·实验材料第51页
     ·颜色指数的测定第51页
     ·类胡萝卜素测定第51页
       ·类胡萝卜素的提取第51页
       ·类胡萝卜素总量的测定第51页
       ·类胡萝卜素各成分含量的测定第51页
     ·相关基因的Real-Time定量PCR(qRT-PCR)分析第51-52页
       ·桃果实总RNA的提取第51页
       ·总RNA完整性、含量和纯度检测第51-52页
       ·反转录第一链cDNA的合成第52页
       ·相关基因荧光定量PCR测定第52页
   ·结果与分析第52-55页
     ·桃果实成熟期间颜色的变化第52页
     ·不同成熟度黄肉桃果实中类胡萝卜素总量及各成分含量的变化第52-54页
     ·相关基因在黄肉桃果实成熟过程中的表达特性第54-55页
   ·讨论与结论第55-57页
第五章 蓝光处理对桃果实采后类胡萝卜素积累和合成基因表达的影响第57-89页
   ·引言第57-58页
   ·材料与方法第58-60页
     ·材料与处理第58-59页
     ·颜色指数的测定第59页
     ·可溶性固形物含量的测定第59页
     ·外果皮叶绿体荧光测定第59-60页
     ·中果皮硬度测定第60页
     ·类胡萝卜素测定第60页
       ·类胡萝卜素的提取第60页
       ·类胡萝卜素总量的测定第60页
       ·类胡萝卜素各成分含量的测定第60页
     ·相关基因的Real-Time定量PCR(qRT-PCR)分析第60页
       ·桃果实总RNA的提取第60页
       ·总RNA完整性、含量和纯度检测第60页
       ·反转录第一链cDNA的合成第60页
       ·相关基因荧光定量PCR测定第60页
   ·结果与分析第60-86页
     ·桃果实颜色的变化第60-62页
     ·桃果实总可溶性固形物含量的变化第62-63页
     ·外果皮叶绿体荧光的变化第63页
     ·中果皮硬度的变化第63-65页
     ·桃果实类胡萝卜素总量及各成分含量的变化第65-71页
     ·不同贮藏处理对桃果实中类胡萝卜素合成相关酶基因表达的影响第71-86页
   ·讨论与结论第86-89页
第六章 桃果实向光素基因PpPHOT1 和隐花色素基因PpCRY2 的克隆与表达分析第89-105页
   ·引言第89-90页
   ·材料与方法第90-93页
     ·材料与处理第90页
     ·桃果实总RNA的提取第90页
     ·总RNA完整性、含量和纯度检测第90页
     ·桃果实PpPHOT1 和PpCRY2 基因的克隆第90-92页
       ·反转录第一链cDNA的合成第90页
       ·PpPHOT1 和PpCRY2 cDNA片段的扩增和检测第90-91页
       ·目的基因片段回收第91页
       ·连接反应第91页
       ·转化第91页
       ·阳性克隆的鉴定和测序第91页
       ·PpPHOT1 和PpCRY2 cDNA 3’末端克隆第91页
       ·PpPHOT1 和PpCRY2 cDNA 5’末端克隆第91-92页
       ·PpPHOT1 和PpCRY2 编码区cDNA序列的验证第92页
     ·桃果实PpPHOT1 和PpCRY2 基因及其编码蛋白生物信息学分析第92页
     ·桃果实PpPHOT1 和PpCRY2 基因的荧光定量 PCR 测定第92-93页
   ·结果与分析第93-103页
     ·桃果实PpPHOT1 和PpCRY2 基因RACE全长扩增和编码区序列分离第93-94页
     ·桃果实PpPHOT1 和PpCRY2 基因及其所编码蛋白生物信息学的分析第94-98页
       ·PpPHOT1 和PpCRY2 编码蛋白的基本理化性质预测第94-95页
       ·氨基酸序列同源性比较与系统进化树分析第95-97页
       ·亚细胞定位及二、三级结构预测第97-98页
     ·不同桃果实发育组织和不同贮藏处理对桃果实中PpPHOT1 和PpCRY2 的表达影响第98-103页
   ·讨论与结论第103-105页
第七章 总结与展望第105-108页
   ·总结第105-107页
   ·展望第107-108页
参考文献第108-122页
致谢第122-123页
攻读硕士学位期间发表的学术成果第123页

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