| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 缩略词及其英汉对照 | 第10-11页 |
| 引言 | 第11-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-27页 |
| 第—节 植物抗虫基因工程研究 | 第13-20页 |
| 1 主要抗虫基因 | 第14-15页 |
| ·Bt基因 | 第14页 |
| ·蛋白酶抑制剂基因 | 第14页 |
| ·植物凝集素基因 | 第14-15页 |
| 2 植物抗虫基因工程研究进展 | 第15-18页 |
| ·Bt基因研究进展 | 第15-16页 |
| ·蛋白酶抑制剂基因的研究进展 | 第16-17页 |
| ·植物凝集素基因的研究进展 | 第17-18页 |
| 3 植物抗虫基因工程主要存在的问题及解决方案 | 第18-20页 |
| 第二节 植物蛋白酶抑制剂研究进展 | 第20-27页 |
| 1 蛋白酶抑制剂的类型 | 第20-22页 |
| ·丝氨酸蛋白酶抑制剂家族 | 第21页 |
| ·巯基蛋白酶抑制剂家族 | 第21页 |
| ·金属蛋白酶抑制剂 | 第21-22页 |
| ·天冬氨酸蛋白酶抑制剂 | 第22页 |
| 2 蛋白酶抑制剂的作用机制及其在植物中的分布 | 第22-24页 |
| 3 植物巯基蛋白酶抑制剂研究进展 | 第24-25页 |
| 4. PCYS基因 | 第25-27页 |
| 第二章 SPCYS基因的表达载体构建和遗传转化 | 第27-41页 |
| 1 材料方法 | 第27-34页 |
| ·实验材料 | 第27-28页 |
| ·生化试剂 | 第28页 |
| ·培养基 | 第28页 |
| ·总RNA的提取 | 第28页 |
| ·总RNA定量与完整性检测 | 第28页 |
| ·cDNA第一链的合成 | 第28-29页 |
| ·SpCYS基因的获得 | 第29-30页 |
| ·SpCYS过表达载体的构建 | 第30页 |
| ·SpCYS反义抑制载体的构建 | 第30-31页 |
| ·农杆菌感受态的制备与农杆菌转化 | 第31-32页 |
| ·农杆菌菌液的制备 | 第32页 |
| ·1304-SpCYS与1304-FSpCYS转化马铃薯Desiree | 第32-33页 |
| ·转基因植株的PCR检测 | 第33-34页 |
| 2 实验结果 | 第34-39页 |
| ·pCMBIA1304-SpCYS过表达载体的构建 | 第34-35页 |
| ·pCMBIA1304-FSpCYS反义抑制载体的构建 | 第35-36页 |
| ·转化农杆菌及验证 | 第36-37页 |
| ·转SpCYS基因马铃薯植株的获得 | 第37-38页 |
| ·转基因马铃薯植株的PCR检测 | 第38-39页 |
| 3 讨论 | 第39-41页 |
| 第三章 转基因马铃薯SPCYS基因的表达分析 | 第41-47页 |
| 1 材料与方法 | 第41-44页 |
| ·半定量表达分析 | 第41-43页 |
| ·实时荧光定量PCR | 第43页 |
| ·转基因马铃薯蛋白表达分析 | 第43-44页 |
| 2 实验结果 | 第44-46页 |
| ·转基因植株的半定量和荧光定量表达分析 | 第44-45页 |
| ·转SpCYS基因马铃薯蛋白表达分析 | 第45-46页 |
| 3 讨论 | 第46-47页 |
| 第四章 转SPCYS基因马铃薯的抗虫性分析 | 第47-55页 |
| 1 材料与方法 | 第47-48页 |
| ·植物材料 | 第47页 |
| ·实验用虫 | 第47页 |
| ·斜纹夜蛾幼虫饲养准备 | 第47页 |
| ·幼虫饲喂实验 | 第47-48页 |
| ·幼虫取食选择性实验 | 第48页 |
| ·统计分析 | 第48页 |
| 2 实验结果 | 第48-53页 |
| ·幼虫饲喂实验 | 第48-51页 |
| ·幼虫取食选择性实验 | 第51-53页 |
| 3 讨论 | 第53-55页 |
| 全文结论 | 第55-57页 |
| 参考文献 | 第57-69页 |
| 附录 | 第69-75页 |
| 致谢 | 第75页 |
