| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 缩略语说明 | 第11-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-21页 |
| 1 植物基因启动子的概述 | 第13-15页 |
| ·植物启动子的基本结构 | 第13页 |
| ·植物启动子的分类 | 第13-15页 |
| 2 植物基因启动子的研究方法 | 第15-16页 |
| ·植物启动子的克隆方法 | 第15-16页 |
| ·植物启动子的功能分析方法 | 第16页 |
| 3 细胞壁关联蛋白激酶的概述 | 第16-19页 |
| ·植物细胞壁关联蛋白激酶的结构 | 第16-17页 |
| ·细胞壁关联蛋白激酶的分类 | 第17页 |
| ·细胞壁关联蛋白激酶的生理功能 | 第17-18页 |
| ·细胞壁关联蛋白激酶的作用机制 | 第18-19页 |
| 4 研究意义 | 第19-21页 |
| 第二章 水稻细胞壁关联蛋白激酶基因启动子的克隆及序列分析 | 第21-33页 |
| 1 实验材料 | 第21-23页 |
| ·植物材料 | 第21页 |
| ·菌株与质粒 | 第21-22页 |
| ·主要试剂盒及酶 | 第22页 |
| ·其他试剂 | 第22页 |
| ·主要仪器设备 | 第22-23页 |
| 2 实验方法 | 第23-28页 |
| ·植物材料准备 | 第23页 |
| ·水稻幼苗总RNA的提取 | 第23页 |
| ·RT-PCR反转录合成cDNA | 第23-24页 |
| ·水稻基因组DNA提取 | 第24-25页 |
| ·启动子片段的获得 | 第25-26页 |
| ·启动子片段的克隆 | 第26-27页 |
| ·阳性克隆检测 | 第27-28页 |
| ·测序 | 第28页 |
| ·测序结果进行生物信息学分析 | 第28页 |
| 3 结果与分析 | 第28-31页 |
| ·水稻细胞壁关联蛋白激酶启动子片段获得 | 第29页 |
| ·克隆载体的连接及验证 | 第29-30页 |
| ·目的片段序列测定与结构分析 | 第30-31页 |
| 4 讨论 | 第31-33页 |
| 第三章 OsWAK基因启动子植物表达载体构建及组织表达 | 第33-45页 |
| 1 实验材料 | 第33-34页 |
| ·植物材料 | 第33页 |
| ·菌株与质粒 | 第33页 |
| ·主要试剂盒及酶 | 第33-34页 |
| ·其他试剂 | 第34页 |
| ·主要实验设备 | 第34页 |
| 2 实验方法 | 第34-37页 |
| ·植物真核表达载体构建 | 第34-35页 |
| ·感受态农杆菌制备及转化 | 第35-36页 |
| ·农杆菌介导侵染烟草植株 | 第36页 |
| ·转基因烟草的检测 | 第36页 |
| ·GUS组织化学染色 | 第36-37页 |
| 3 结果与分析 | 第37-42页 |
| ·pBI121-OsWAKpro-GUS植物表达载体构建 | 第37页 |
| ·转基因烟草的获得 | 第37-38页 |
| ·水稻总RNA获得 | 第38-39页 |
| ·PCR方法鉴定阳性转基因烟草 | 第39页 |
| ·GUS组织化学染色结果分析 | 第39-42页 |
| ·转基因植物的物理损伤胁迫 | 第42页 |
| 4 讨论 | 第42-45页 |
| 第四章 信号物质和金属处理下水稻细胞壁关联蛋白激酶基因启动子的表达活性 | 第45-53页 |
| 1 实验材料 | 第45-46页 |
| 2 实验方法 | 第46-48页 |
| ·烟草的培养和处理 | 第46-47页 |
| ·GUS活性定量检测 | 第47-48页 |
| 3 结果与分析 | 第48-50页 |
| ·金属离子处理下OsWAKpro表达活性 | 第48页 |
| ·梯度浓度金属处理下OsWAKpro表达活性 | 第48-49页 |
| ·信号物质处理下OsWAKpro表达活性 | 第49-50页 |
| 4 讨论 | 第50-53页 |
| 第五章 OsWAK激酶域的体外活性测定 | 第53-61页 |
| 1 实验材料 | 第53页 |
| ·纯化蛋白 | 第53页 |
| ·试剂盒及试剂 | 第53页 |
| ·主要设备 | 第53页 |
| 2 实验方法 | 第53-56页 |
| ·试剂的准备 | 第53-54页 |
| ·滴定试验确定激酶反应量 | 第54页 |
| ·激酶动态活性分析 | 第54-56页 |
| 3 实验结果 | 第56-59页 |
| ·激酶反应浓度的确定 | 第56页 |
| ·底物肽磷酸化水平检测 | 第56-57页 |
| ·标准曲线 | 第57-59页 |
| ·双倒数作图法(Hanes plot)分析Km和Vm | 第59页 |
| 4 讨论 | 第59-61页 |
| 全文总结与创新之处 | 第61-63页 |
| 参考文献 | 第63-71页 |
| 附录 | 第71-73页 |
| 攻读硕士学位期间发表(待发表)的研究论文 | 第73-75页 |
| 致谢 | 第75页 |
