摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-8页 |
第一章 绪论 | 第8-13页 |
·线粒体 | 第8页 |
·细胞凋亡 | 第8-9页 |
·细胞凋亡的生物学意义 | 第9页 |
·模式生物——粟酒裂殖酵母 | 第9-10页 |
·酵母细胞凋亡研究的进展 | 第10-11页 |
·核酸内切酶tRNase Z | 第11-13页 |
第二章 yDH1的线粒体转录谱分析 | 第13-36页 |
·实验材料 | 第13-14页 |
·菌种 | 第13页 |
·培养基 | 第13页 |
·仪器与试剂 | 第13-14页 |
·实验方法 | 第14-24页 |
·菌体培养 | 第14页 |
·线粒体提取 | 第14-16页 |
·线粒体浓度及纯度的检测 | 第16-18页 |
·线粒体RNA的提取 | 第18-19页 |
·线粒体RNA纯度及完整性检测 | 第19-20页 |
·Western blot检测温敏型突变株线粒体蛋白的表达量 | 第20页 |
·环化PCR(CR-RT-PCR) | 第20-24页 |
·实验结果 | 第24-33页 |
·线粒体的浓度及纯度鉴定 | 第24-26页 |
·线粒体RNA浓度及完整性的检测 | 第26-27页 |
·转录组的数据分析 | 第27-33页 |
·Western blot检测温敏菌株yDH1的线粒体蛋白 | 第33页 |
·讨论 | 第33-36页 |
第三章 高表达Trz2介导的细胞凋亡的研究 | 第36-61页 |
·材料 | 第36-38页 |
·菌种与质粒 | 第36页 |
·培养基 | 第36-37页 |
·仪器与试剂 | 第37-38页 |
·实验方法 | 第38-48页 |
·粟酒裂殖酵母的醋酸锂转化 | 第38-39页 |
·野生型菌株及突变菌株生长曲线的测定 | 第39-40页 |
·存活率测定 | 第40页 |
·野生型菌株及突变菌株的点圈实验 | 第40页 |
·野生型菌株及突变菌株细胞形态的观察 | 第40页 |
·粟酒裂殖酵母细胞染色体凝聚的观察 | 第40-41页 |
·粟酒裂殖酵母细胞磷酯酰丝氨酸外翻情况的检测 | 第41-42页 |
·粟酒裂殖酵母细胞线粒体片段化的检测 | 第42页 |
·粟酒裂殖酵母细胞内活性氧含量的检测 | 第42页 |
·粟酒裂殖酵母RNA的提取 | 第42-43页 |
·RNA的质量检测 | 第43-45页 |
·基因敲除 | 第45-48页 |
·实验结果 | 第48-59页 |
·高表达Trz2影响了粟酒裂殖酵母的生长和形态 | 第48-50页 |
·高表达Trz2引起细胞凋亡 | 第50-56页 |
·高表达Trz2引起的细胞凋亡不依赖caspase途径 | 第56页 |
·高表达Trz2引起的细胞凋亡依赖其线粒体定位 | 第56-59页 |
·讨论 | 第59-61页 |
第四章 全文总结 | 第61-63页 |
参考文献 | 第63-68页 |
附录 本实验所用的菌株与质粒 | 第68-69页 |
致谢 | 第69页 |