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粟酒裂殖酵母Trz2参与线粒体RNA加工和细胞凋亡的功能研究

摘要第1-4页
Abstract第4-8页
第一章 绪论第8-13页
   ·线粒体第8页
   ·细胞凋亡第8-9页
   ·细胞凋亡的生物学意义第9页
   ·模式生物——粟酒裂殖酵母第9-10页
   ·酵母细胞凋亡研究的进展第10-11页
   ·核酸内切酶tRNase Z第11-13页
第二章 yDH1的线粒体转录谱分析第13-36页
   ·实验材料第13-14页
     ·菌种第13页
     ·培养基第13页
     ·仪器与试剂第13-14页
   ·实验方法第14-24页
     ·菌体培养第14页
     ·线粒体提取第14-16页
     ·线粒体浓度及纯度的检测第16-18页
     ·线粒体RNA的提取第18-19页
     ·线粒体RNA纯度及完整性检测第19-20页
     ·Western blot检测温敏型突变株线粒体蛋白的表达量第20页
     ·环化PCR(CR-RT-PCR)第20-24页
   ·实验结果第24-33页
     ·线粒体的浓度及纯度鉴定第24-26页
     ·线粒体RNA浓度及完整性的检测第26-27页
     ·转录组的数据分析第27-33页
     ·Western blot检测温敏菌株yDH1的线粒体蛋白第33页
   ·讨论第33-36页
第三章 高表达Trz2介导的细胞凋亡的研究第36-61页
   ·材料第36-38页
     ·菌种与质粒第36页
     ·培养基第36-37页
     ·仪器与试剂第37-38页
   ·实验方法第38-48页
     ·粟酒裂殖酵母的醋酸锂转化第38-39页
     ·野生型菌株及突变菌株生长曲线的测定第39-40页
     ·存活率测定第40页
     ·野生型菌株及突变菌株的点圈实验第40页
     ·野生型菌株及突变菌株细胞形态的观察第40页
     ·粟酒裂殖酵母细胞染色体凝聚的观察第40-41页
     ·粟酒裂殖酵母细胞磷酯酰丝氨酸外翻情况的检测第41-42页
     ·粟酒裂殖酵母细胞线粒体片段化的检测第42页
     ·粟酒裂殖酵母细胞内活性氧含量的检测第42页
     ·粟酒裂殖酵母RNA的提取第42-43页
     ·RNA的质量检测第43-45页
     ·基因敲除第45-48页
   ·实验结果第48-59页
     ·高表达Trz2影响了粟酒裂殖酵母的生长和形态第48-50页
     ·高表达Trz2引起细胞凋亡第50-56页
     ·高表达Trz2引起的细胞凋亡不依赖caspase途径第56页
     ·高表达Trz2引起的细胞凋亡依赖其线粒体定位第56-59页
   ·讨论第59-61页
第四章 全文总结第61-63页
参考文献第63-68页
附录 本实验所用的菌株与质粒第68-69页
致谢第69页

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