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卷枝毛霉二酰甘油酰基转移酶的基因鉴定与功能分析

摘要第1-5页
Abstract第5-9页
缩略词表第9-10页
1 绪论第10-18页
   ·二酰甘油酰基转移酶(DGAT)的研究背景第10-14页
     ·DGAT第10-11页
     ·DGAT亚型与定位第11-12页
     ·DGAT表达特性第12页
     ·DGAT序列与结构第12-13页
     ·DGAT底物偏好性第13页
     ·DGAT功能与应用第13-14页
   ·产油真菌卷枝毛霉的研究简介第14-15页
     ·卷枝毛霉的生理特性第14-15页
     ·卷枝毛霉脂质代谢第15页
   ·受体菌株缺陷型酿酒酵母H1246 简介第15-16页
   ·立题依据及意义第16页
   ·主要研究内容第16-18页
2 材料与方法第18-26页
   ·实验材料第18-20页
     ·菌种和质粒第18页
     ·主要仪器第18-19页
     ·主要试剂第19页
     ·主要试剂的配制第19页
     ·培养基及其配方第19-20页
   ·实验方法第20-26页
     ·卷枝毛霉发酵培养第20页
     ·上清液残留组分分析和生物量测定第20页
     ·卷枝毛霉McDGAT基因表达水平分析第20-21页
     ·卷枝毛霉McDGAT结构与功能的生物信息学分析第21页
     ·卷枝毛霉McDGAT基因表达载体的构建第21-23页
     ·醋酸锂转化法转化卷枝毛霉McDGAT基因第23页
     ·重组酵母菌株McDGAT基因的表达第23-24页
     ·重组酵母菌株McDGAT的诱导表达和生长曲线测定第24页
     ·重组酵母菌株McDGAT催化活性的鉴定第24-25页
     ·重组酵母菌株总脂、TAG含量及TAG脂肪酸组成分析第25-26页
3 结果与讨论第26-48页
   ·卷枝毛霉生长和产脂特性分析第26-27页
   ·卷枝毛霉McDGAT基因表达水平分析第27-28页
   ·卷枝毛霉McDGAT结构与功能的生物信息学分析第28-35页
     ·氨基酸序列比对及同源性分析第28-34页
     ·卷枝毛霉McDGAT理化性质预测第34页
     ·卷枝毛霉McDGAT二级结构和跨膜结构分析第34-35页
   ·卷枝毛霉McDGAT基因在酵母中的异源表达第35-39页
     ·二元表达载体的构建第35-36页
     ·重组酵母菌株的PCR验证第36-37页
     ·重组酵母菌株McDGAT基因的表达第37-38页
     ·重组酵母菌株生长特性的描述第38-39页
   ·重组酵母菌株McDGAT催化活性的鉴定第39-43页
     ·尼罗红(Nile Red)染色观察第40-41页
     ·薄层色谱法(TLC)定性分析第41-42页
     ·薄层色谱-气相色谱联用(TLC-GC)定量分析第42-43页
   ·异源表达McDGAT4 基因的重组酵母菌株产脂特点第43-48页
     ·无外源添加脂肪酸时重组酵母菌株产脂特点第43-44页
     ·外源添加LA时重组酵母菌株产脂特点第44-45页
     ·外源添加GLA时重组酵母菌株产脂特点第45-48页
主要结论与展望第48-49页
致谢第49-50页
参考文献第50-55页
附录:作者在攻读硕士学位期间发表的论文第55页

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