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柞蚕新型转基因载体构建和精子介导转化研究

摘要第1-6页
Abstract第6-12页
CONTENTS第12-16页
图表目录第16-19页
引言第19-20页
1 柞蚕转基因研究进展第20-40页
   ·柞蚕第20-23页
     ·柞蚕概况第20-22页
     ·柞蚕的转基因研究进展第22-23页
   ·昆虫转基因元件第23-29页
     ·启动子第23-25页
     ·转座子第25-27页
     ·报告基因第27-29页
   ·昆虫转基因方法第29-32页
     ·显微注射法第29页
     ·基因枪法第29-30页
     ·电穿孔法第30-31页
     ·精子介导法第31页
     ·其他方法第31-32页
   ·精子介导转基因途径第32-38页
     ·动物精子介导的转基因第32-33页
     ·昆虫精子介导的转基因第33-34页
     ·精子介导途径的机理研究第34-38页
   ·本文主要研究目的与内容第38-40页
     ·研究目的第38页
     ·研究内容第38-39页
     ·技术路线第39-40页
2 柞蚕肌动蛋白A1基因启动子的克隆与分析第40-62页
   ·引言第40页
   ·材料与设备第40-41页
     ·实验材料第40-41页
     ·实验试剂第41页
     ·实验设备第41页
   ·实验方法第41-52页
     ·柞蚕肌动蛋白A1基因启动子片段的克隆第41-47页
     ·启动子的结构分析第47页
     ·启动子的功能分析第47-52页
   ·实验结果第52-60页
     ·柞蚕肌动蛋白A1启动子片段第52-53页
     ·启动子区域的结构分析第53-57页
     ·启动子区域的功能分析第57-60页
   ·讨论第60-61页
   ·小结第61-62页
3 柞蚕新型基因转移载体的构建与验证研究第62-78页
   ·引言第62-63页
   ·材料与设备第63页
     ·实验材料第63页
     ·实验试剂第63页
     ·实验设备第63页
   ·实验方法第63-71页
     ·柞蚕转移载体与辅助质粒的构建第63-66页
     ·柞蚕双元基因转移载体的构建第66-67页
     ·柞蚕转移载体在Sf9细胞中的转化实验第67-71页
   ·实验结果第71-76页
     ·柞蚕基因转移载体和辅助载体系统第71-73页
     ·柞蚕双元基因转移载体第73页
     ·柞蚕两种基因转移载体在Sf9细胞中的表达第73-76页
   ·讨论第76-77页
   ·小结第77-78页
4 柞蚕精子介导转基因途径观察第78-91页
   ·引言第78-79页
   ·材料与设备第79页
     ·实验材料第79页
     ·实验试剂第79页
     ·实验设备第79页
   ·实验方法第79-84页
     ·雌蛾解剖与生殖器官观察第79页
     ·FITC标记外源DNA及在雌蛾生殖系统中的运动轨迹观察第79-81页
     ·GFP基因导入蚕卵的观察与分子鉴定第81-84页
   ·实验结果第84-89页
     ·雌蛾的生殖系统第84-85页
     ·FITC标记的外源DNA与精子的体外结合第85-86页
     ·FITC标记的外源DNA进入雌蛾生殖器官的途径第86页
     ·蚕卵的GFP荧光第86-87页
     ·分子鉴定第87-89页
   ·讨论第89页
   ·小结第89-91页
5 蛛丝蛋白基因的克隆与转蛛丝蛋白基因柞蚕的初步研究第91-113页
   ·引言第91页
   ·材料与设备第91-92页
     ·实验材料第91页
     ·实验试剂第91-92页
     ·实验设备第92页
   ·实验方法第92-99页
     ·蜘蛛丝蛋白基因的克隆第92-94页
     ·蛛丝蛋白基因在大肠杆菌中的表达第94页
     ·蛛丝蛋白基因在昆虫细胞中的表达第94-95页
     ·蛛丝蛋白基因转移载体的构建第95-96页
     ·柞蚕转基因条件的优化第96页
     ·转基因柞蚕的鉴定第96-99页
   ·实验结果第99-110页
     ·蜘蛛拖牵丝蛋白基因片段的克隆第99-101页
     ·蛛丝蛋白基因的体外表达第101-103页
     ·含蛛丝蛋白基因的双元基因转移载体第103-104页
     ·精子介导转基因条件的优化结果第104-105页
     ·转蛛丝蛋白基因柞蚕的检测鉴定第105-110页
   ·讨论第110-112页
   ·小结第112-113页
6 结论与展望第113-115页
   ·结论第113-114页
   ·创新点摘要第114页
   ·有待进一步开展的工作第114页
   ·展望第114-115页
参考文献第115-124页
附录A 缩略词第124-125页
作者简介第125页
攻读博士学位期间科研项目及科研成果第125-127页
致谢第127-128页

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