符号说明 | 第1-8页 |
中文摘要 | 第8-10页 |
Abstract | 第10-12页 |
1 前言 | 第12-29页 |
·细胞分裂素影响植物发育 | 第12页 |
·细胞分裂素的生物合成 | 第12-14页 |
·细胞分裂素的运输 | 第14-15页 |
·细胞分裂素的信号转导 | 第15-19页 |
·信号转导中的受体 | 第16-17页 |
·信号转导中的磷酸转运蛋白AHP和反应调节因子ARR | 第17-19页 |
·生长素影响植物发育 | 第19-23页 |
·生长素的生物合成 | 第20页 |
·生长素合成酶相关基因YUCCAs | 第20-23页 |
·生长素和细胞分裂素的相互作用 | 第23-28页 |
·本研究的目的意义 | 第28-29页 |
2 材料与方法 | 第29-43页 |
·实验材料 | 第29-30页 |
·植物材料及生长条件 | 第29页 |
·菌株和质粒 | 第29页 |
·工具酶及生化试剂 | 第29页 |
·主要实验仪器 | 第29-30页 |
·PCR引物 | 第30页 |
·实验方法 | 第30-43页 |
·拟南芥幼苗培养及种植 | 第30页 |
·拟南芥离体再生芽的培养 | 第30页 |
·植物组织总RNA的提取 | 第30-32页 |
·Trizol法提取总RNA | 第30-31页 |
·RNA中基因组DNA的去除 | 第31-32页 |
·反转录cDNA第一链的合成 | 第32页 |
·实时定量PCR | 第32-33页 |
·植物基因组DNA的提取及纯化 | 第33-34页 |
·表达载体的构建及其转化拟南芥 | 第34-36页 |
·PCR扩增 | 第34页 |
·连接反应 | 第34页 |
·大肠杆菌感受态细胞的制备转化及碱法小量DNA的提取 | 第34页 |
·质粒DNA的酶切鉴定 | 第34-35页 |
·DNA序列测定 | 第35页 |
·pBA002myc-ARR1标记过表达表达载体的构建 | 第35-36页 |
·拟南芥的转化与转基因植株的分析 | 第36-38页 |
·根癌农杆菌GV3101感受态细胞的制备与转化 | 第36-37页 |
·拟南芥的转化 | 第37页 |
·转基因植株的分析 | 第37-38页 |
·GUS组织化学染色分析 | 第38-39页 |
·GUS染色后的石蜡切片 | 第39页 |
·取材固定 | 第39页 |
·脱水、透明、浸蜡、包埋 | 第39页 |
·钌红染色 | 第39页 |
·染色质免疫沉淀(ChIP)步骤及其检测 | 第39-43页 |
·染色质免疫共沉淀(ChIP)步骤 | 第39-42页 |
·染色质免疫共沉淀(ChIP)结果检测及分析 | 第42-43页 |
3 结果与分析 | 第43-56页 |
·B类ARRs在芽再生过程中具有重要作用 | 第43-48页 |
·B类ARRs调控芽的再生 | 第43-45页 |
·B类ARRs在芽再生过程中的表达模式 | 第45-46页 |
·B类ARRs调控YUCCA1,YUCCA2,YUCCA4,YUCCA6基因的表达 | 第46-47页 |
·YUCCA4在B类arr.突变体中特异的表达模式 | 第47-48页 |
·生长素合成酶基因对芽的再生是必需的 | 第48-53页 |
·YUCCAs对芽的再生具有重要作用 | 第48-49页 |
·arr1,10,2和功能获得型突变体yucca1幼苗发育早期茎端分生组织变小 | 第49-50页 |
·arr1,10,12三突变体和功能获得型突变体yucca1胚胎发育滞后 | 第50-51页 |
·YUCCA4和ARR10在拟南芥茎端的表达模式 | 第51-52页 |
·B类ARRs通过调控生长素合成酶相关基因YUCCAs维持茎端分生组织 | 第52-53页 |
·B类ARRs与生长素合成酶相关基因YUCCA的相互作用 | 第53-56页 |
·生长素相关基因启动子上细胞分裂素响应元件序列分析 | 第53-54页 |
·染色质免疫共沉淀(ChIP) | 第54-56页 |
4 讨论 | 第56-59页 |
·细胞分裂素与生长素相互作用调节芽的再生 | 第56-57页 |
·B类ARRs对生长素合成酶相关基因的表达具有重要的调节作用 | 第57页 |
·B类ARRs对生长素相关基因的调节 | 第57-59页 |
5 结论 | 第59-60页 |
参考文献 | 第60-69页 |
附录 | 第69-71页 |
致谢 | 第71页 |