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细胞分裂素B类ARRs通过负调节生长素合成酶基因YUCCAs的表达参与拟南芥茎端分生组织的形成

符号说明第1-8页
中文摘要第8-10页
Abstract第10-12页
1 前言第12-29页
   ·细胞分裂素影响植物发育第12页
   ·细胞分裂素的生物合成第12-14页
   ·细胞分裂素的运输第14-15页
   ·细胞分裂素的信号转导第15-19页
     ·信号转导中的受体第16-17页
     ·信号转导中的磷酸转运蛋白AHP和反应调节因子ARR第17-19页
   ·生长素影响植物发育第19-23页
     ·生长素的生物合成第20页
     ·生长素合成酶相关基因YUCCAs第20-23页
   ·生长素和细胞分裂素的相互作用第23-28页
   ·本研究的目的意义第28-29页
2 材料与方法第29-43页
   ·实验材料第29-30页
     ·植物材料及生长条件第29页
     ·菌株和质粒第29页
     ·工具酶及生化试剂第29页
     ·主要实验仪器第29-30页
     ·PCR引物第30页
   ·实验方法第30-43页
     ·拟南芥幼苗培养及种植第30页
     ·拟南芥离体再生芽的培养第30页
     ·植物组织总RNA的提取第30-32页
       ·Trizol法提取总RNA第30-31页
       ·RNA中基因组DNA的去除第31-32页
     ·反转录cDNA第一链的合成第32页
     ·实时定量PCR第32-33页
     ·植物基因组DNA的提取及纯化第33-34页
     ·表达载体的构建及其转化拟南芥第34-36页
       ·PCR扩增第34页
       ·连接反应第34页
       ·大肠杆菌感受态细胞的制备转化及碱法小量DNA的提取第34页
       ·质粒DNA的酶切鉴定第34-35页
       ·DNA序列测定第35页
       ·pBA002myc-ARR1标记过表达表达载体的构建第35-36页
     ·拟南芥的转化与转基因植株的分析第36-38页
       ·根癌农杆菌GV3101感受态细胞的制备与转化第36-37页
       ·拟南芥的转化第37页
       ·转基因植株的分析第37-38页
     ·GUS组织化学染色分析第38-39页
     ·GUS染色后的石蜡切片第39页
       ·取材固定第39页
       ·脱水、透明、浸蜡、包埋第39页
       ·钌红染色第39页
     ·染色质免疫沉淀(ChIP)步骤及其检测第39-43页
       ·染色质免疫共沉淀(ChIP)步骤第39-42页
       ·染色质免疫共沉淀(ChIP)结果检测及分析第42-43页
3 结果与分析第43-56页
   ·B类ARRs在芽再生过程中具有重要作用第43-48页
     ·B类ARRs调控芽的再生第43-45页
     ·B类ARRs在芽再生过程中的表达模式第45-46页
     ·B类ARRs调控YUCCA1,YUCCA2,YUCCA4,YUCCA6基因的表达第46-47页
     ·YUCCA4在B类arr.突变体中特异的表达模式第47-48页
   ·生长素合成酶基因对芽的再生是必需的第48-53页
     ·YUCCAs对芽的再生具有重要作用第48-49页
     ·arr1,10,2和功能获得型突变体yucca1幼苗发育早期茎端分生组织变小第49-50页
     ·arr1,10,12三突变体和功能获得型突变体yucca1胚胎发育滞后第50-51页
     ·YUCCA4和ARR10在拟南芥茎端的表达模式第51-52页
     ·B类ARRs通过调控生长素合成酶相关基因YUCCAs维持茎端分生组织第52-53页
   ·B类ARRs与生长素合成酶相关基因YUCCA的相互作用第53-56页
     ·生长素相关基因启动子上细胞分裂素响应元件序列分析第53-54页
     ·染色质免疫共沉淀(ChIP)第54-56页
4 讨论第56-59页
   ·细胞分裂素与生长素相互作用调节芽的再生第56-57页
   ·B类ARRs对生长素合成酶相关基因的表达具有重要的调节作用第57页
   ·B类ARRs对生长素相关基因的调节第57-59页
5 结论第59-60页
参考文献第60-69页
附录第69-71页
致谢第71页

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