| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 目录 | 第8-10页 |
| 1 引言 | 第10-18页 |
| ·基因治疗 | 第10-12页 |
| ·基因治疗的研究背景 | 第10-11页 |
| ·基因治疗在肿瘤治疗中的应用 | 第11-12页 |
| ·肿瘤基因治疗的载体 | 第12-14页 |
| ·基因载体的选择 | 第12-13页 |
| ·基因载体的表面修饰 | 第13-14页 |
| ·纳米基因载体的生物安全性评价 | 第14页 |
| ·抗肿瘤基因的选择 | 第14-16页 |
| ·本研究的目的及意义 | 第16-18页 |
| 2 材料和方法 | 第18-29页 |
| ·细胞株 | 第18页 |
| ·实验动物 | 第18页 |
| ·主要试剂 | 第18-19页 |
| ·仪器与设备 | 第19页 |
| ·载体构建 | 第19-20页 |
| ·载体构建过程 | 第19-20页 |
| ·无内毒素质粒 DNA 的制备 | 第20-21页 |
| ·粒径与电势检测 | 第21页 |
| ·凝胶阻滞分析 | 第21页 |
| ·细胞转染 | 第21页 |
| ·安全性评价 | 第21-24页 |
| ·细胞活力检测 | 第21-22页 |
| ·溶血反应 | 第22页 |
| ·组织毒性 | 第22-23页 |
| ·炎症反应 | 第23页 |
| ·脏器损伤 | 第23页 |
| ·热原质检测 | 第23-24页 |
| ·遗传毒性 | 第24页 |
| ·冰冻切片的制备 | 第24页 |
| ·荧光素酶活性分析 | 第24页 |
| ·流式细胞术 | 第24-25页 |
| ·细胞凋亡检测 | 第24-25页 |
| ·细胞周期检测 | 第25页 |
| ·免疫印迹 | 第25-26页 |
| ·RIPA 细胞裂解液配制 | 第25页 |
| ·蛋白提取 | 第25页 |
| ·蛋白电泳与杂交 | 第25-26页 |
| ·裸鼠模型的建立及治疗 | 第26页 |
| ·人宫颈癌裸鼠模型的建立及治疗 | 第26页 |
| ·人肝癌裸鼠模型的建立及治疗 | 第26页 |
| ·石蜡切片免疫组化 | 第26-27页 |
| ·免疫组织化学染色 | 第26-27页 |
| ·Ki-67 指数计算、cleaved PARP1 阳性率计算 | 第27页 |
| ·TUNEL 染色 | 第27-28页 |
| ·数据分析 | 第28-29页 |
| 3 结果与分析 | 第29-51页 |
| ·PEI-Phe（PP80）介导的基因转染效率评价 | 第29-30页 |
| ·PP80-基因复合物生物安全性评价 | 第30-37页 |
| ·细胞活力检测 | 第30-31页 |
| ·溶血反应 | 第31-32页 |
| ·组织毒性 | 第32-33页 |
| ·炎症反应 | 第33-34页 |
| ·脏器损伤 | 第34-35页 |
| ·热原质检测 | 第35页 |
| ·遗传毒性 | 第35-37页 |
| ·PP80 介导的报告基因在裸鼠移植瘤内表达 | 第37-40页 |
| ·凝胶阻滞实验 | 第37-38页 |
| ·PP80-DNA 粒径及电位检测 | 第38页 |
| ·PP80 介导的报告基因在肿瘤内表达 | 第38-40页 |
| ·PP80 介导的抗肿瘤基因抑制移植瘤的生长 | 第40-47页 |
| ·pKH3-rev-casp-3 载体的构建 | 第40页 |
| ·PP80 介导的 pKH3-rev-casp-3 抑制肿瘤生长 | 第40-41页 |
| ·PP80 介导的 rev-casp-3 诱导肿瘤细胞凋亡 | 第41-43页 |
| ·PP80 介导的 rev-casp-3 抑制肿瘤细胞增殖 | 第43-44页 |
| ·PP80 介导的 rev-casp-3 诱导 HeLa 细胞凋亡的机制分析 | 第44-47页 |
| ·PP80 介导 scFv1C9 基因抑制肝癌 HepG2 移植瘤的生长 | 第47-51页 |
| ·scFv1C9 诱导细胞 G0/G1 期阻滞 | 第47页 |
| ·scFv1C9 通过上调 p21 的表达进而负调控 CDK2 的表达引起细胞 G0/G1 期阻滞 | 第47-49页 |
| ·PP80 介导的 scFv1C9 抑制肝癌 HepG2 移植瘤的生长 | 第49-51页 |
| 4 讨论 | 第51-55页 |
| 5 结论与主要创新点 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-68页 |
| 致谢 | 第68-69页 |
| 在学期间公开发表论文情况 | 第69页 |
