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拟南芥两个胞质果糖-1,6-二磷酸醛缩酶基因的新功能初探

符号说明第1-10页
中文摘要第10-12页
Abstract第12-14页
1 前言第14-26页
   ·植物果糖-1, 6-二磷酸醛缩酶的研究进展第14-21页
     ·植物体中果糖-1, 6-二磷酸醛缩酶的类型第15页
     ·植物果糖-1, 6-二磷酸醛缩酶与植物激素的关系第15-18页
       ·ABA第16页
       ·GA第16-17页
       ·SA第17-18页
     ·植物中果糖-1, 6-二磷酸醛缩酶与胁迫响应的关系第18-21页
       ·盐胁迫第18-19页
       ·高温胁迫第19-20页
       ·低温胁迫第20-21页
   ·植物体果糖-1, 6-二磷酸醛缩酶对光合作用的影响第21-22页
   ·果糖-1, 6-二磷酸醛缩酶功能的多样性第22-25页
     ·果糖-1, 6-二磷酸醛缩酶与 V-ATP 酶的相互作用第22-23页
     ·果糖-1, 6-二磷酸醛缩酶与线粒体膜的相互作用第23页
     ·果糖-1, 6-二磷酸醛缩酶与细胞骨架的相互作用第23-24页
     ·果糖-1, 6-二磷酸醛缩酶与病原菌的致病力第24-25页
   ·本实验的目的意义第25-26页
2 材料与方法第26-40页
   ·实验材料第26-27页
     ·植物材料第26页
     ·菌株与质粒第26页
     ·酶与各种生化试剂第26页
     ·实验中用的引物第26-27页
   ·实验方法第27-40页
     ·植物基因组的提取与纯化第27-28页
       ·植物基因组的提取第27-28页
       ·植物基因组的纯化第28页
     ·PCR 鉴定突变体纯合植株第28页
     ·载体构建第28-30页
       ·PCR 扩增第28-29页
       ·连接反应第29-30页
       ·酶切和回收第30页
       ·超表达 AtFBA6 表达载体的构建第30页
       ·AtFBA6 和 GFP 融合蛋白表达载体的构建第30页
     ·大肠杆菌感受态细胞的制备和转化第30-31页
       ·大肠杆菌感受态细胞的制备第30页
       ·大肠杆菌细胞的转化第30-31页
     ·大肠杆菌中质粒的提取第31-32页
     ·农杆菌感受态细胞的制备和转化第32页
       ·根癌农杆菌 GV3101 感受态细胞的制备第32页
       ·冻融法转化农杆菌细胞第32页
     ·拟南芥的转化及转基因拟南芥的鉴定第32-33页
       ·拟南芥的转化第32-33页
       ·转基因拟南芥的鉴定第33页
     ·RNA 的提取纯化与反转录第33-34页
       ·TRIZOL 法提取 RNA第33页
       ·RNA 的纯化第33-34页
       ·RNA 中基因组 DNA 的去除第34页
       ·RNA 的反转录第34页
     ·半定量 RT-PCR(Semiquantitative RT-PCR)第34-35页
     ·实时定量反转录 PCR第35-36页
     ·拟南芥原生质体的制备第36页
     ·拟南芥总糖含量的测定第36-37页
       ·葡萄糖标准曲线的制作第36页
       ·样品中总糖的提取与测定第36-37页
       ·结果与计算第37页
     ·体外拟南芥花粉萌发和观察第37页
     ·叶片细胞的铺展和透明化处理第37-38页
     ·ATP 含量测定原理及方法第38页
       ·ATP 含量测定的原理第38页
       ·ATP 含量的测定步骤第38页
     ·激光共聚焦扫描显微镜观察 GFP 定位第38-39页
     ·花药的 Alexander 染色第39页
     ·花粉细胞核的 DAPI(4,6-二氨基-2-苯基吲哚)染色第39-40页
3 结果与分析第40-51页
   ·GFP 融合蛋白转基因植株的获得和亚细胞定位第40页
     ·GFP 融合蛋白转基因植株的获得第40页
     ·AtFBA6 的亚细胞定位第40页
   ·AtFBA6 T-DNA 突变体的获得和表达分析第40-42页
   ·转基因株系的获得和表型鉴定第42-44页
     ·AtFBA6 的超表达转基因株系的获得及表达量鉴定第42-43页
     ·超表达转基因株系的表型鉴定第43-44页
   ·AtFBA6 促进拟南芥生长的机制探究第44-46页
     ·AtFBA6 超表达转基因植株细胞个体变大第44-46页
     ·AtFBA6 超表达转基因植株代谢水平提高第46页
   ·AtFBA8 T-DNA 突变体的获得和表型分析第46-48页
     ·AtFBA8 突变体的鉴定和表达量分析第46-47页
     ·AtFBA8 突变体的表型分析第47-48页
   ·AtFBA8 基因功能的探究第48-51页
     ·AtFBA8 基因表达量的下调并未影响花器官的正常发育第48页
     ·花粉的发育和活力的鉴定第48-49页
     ·AtFBA8 基因参与了花粉的萌发过程第49-51页
4 讨论第51-53页
5 结论第53-54页
参考文献第54-64页
致谢第64-65页
攻读学位期间发表论文情况第65页

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