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拟南芥VLN1和VLN5的时空表达及参与响应非生物胁迫机理的初步研究

中文摘要第1-9页
Abstract第9-11页
1 前言第11-24页
   ·微丝第11-14页
     ·微丝的结构第11-12页
     ·微丝的功能第12-14页
       ·微丝参与细胞内吞第12页
       ·微丝参与胞质分裂第12页
       ·微丝参与细胞和细胞器运动第12-14页
   ·动物中的 Villin第14-20页
     ·Villin 的结构第15页
     ·Villin 的功能第15-18页
       ·Villin 是一种表皮特异性肌动蛋白结合蛋白第16页
       ·Villin 调节微绒毛的动态第16-17页
       ·Villin 对细胞凋亡的作用第17-18页
     ·Villin 对微丝的调节第18-20页
       ·Villin 与微丝的结合位点第18页
       ·Villin 调节微丝动态的作用因子第18-20页
   ·植物中的 Villin第20-21页
     ·植物中 Villin 的结构和功能第20页
     ·植物中 Villin 与微丝的关系第20-21页
   ·拟南芥中 Villin 的研究进展第21-23页
   ·本实验的目的意义第23-24页
2 材料与方法第24-36页
   ·实验材料第24-25页
     ·植物材料第24页
     ·菌株与载体第24页
     ·酶与各种生化试剂第24-25页
     ·引物第25页
   ·实验方法第25-36页
     ·植物基因组的提取第25-26页
     ·载体构建第26-30页
       ·PCR 扩增目的片段第26-27页
       ·连接反应第27页
       ·大肠杆菌感受态 TOP10 的制备和转化第27-28页
       ·菌落 PCR 检测第28页
       ·大肠杆菌中质粒的提取第28页
       ·酶切和回收第28-29页
       ·启动子驱动 GUS 报告基因表达载体的构建第29页
       ·根癌农杆菌 GV3101 感受态细胞的制备和转化第29-30页
     ·拟南芥的转化及转基因拟南芥的鉴定第30页
       ·拟南芥的转化第30页
       ·转基因拟南芥阳性植株的筛选第30页
     ·转基因植物 GUS 组织化学染色分析第30-31页
       ·GUS 基因简介第30-31页
       ·转基因植物 GUS 组织化学染色方法步骤第31页
     ·PCR 鉴定突变体纯合植株第31-32页
     ·半定量 PCR 鉴定突变体的基因表达量第32页
     ·Villin 对非生物胁迫的响应第32-33页
       ·Villin 对 NaCl 和 MV 胁迫响应的表型分析第32-33页
       ·Villin 对干旱胁迫响应的表型分析第33页
       ·Villin 对非生物胁迫响应的基因表达量分析第33页
     ·RNA 的提取纯化与反转录第33-34页
       ·RNA 的提取及纯化第33-34页
       ·RNA 的反转录第34页
     ·实时荧光定量 PCR第34-35页
     ·拟南芥杂交第35-36页
3 结果与分析第36-59页
   ·拟南芥 Villin 家族成员的同源性分析第36页
   ·拟南芥 Villin 基因的时空表达分析第36-45页
     ·拟南芥 Villin 基因在营养器官中的表达第37-41页
     ·拟南芥 Villin 基因在花器官中的表达第41-43页
     ·Villin 基因在拟南芥中时空表达综合分析第43-45页
   ·Villin 响应拟南芥非生物逆境胁迫的研究第45-55页
     ·VLN1 和 VLN5 的表达受盐和氧化胁迫的调控第46页
     ·盐胁迫诱导 VLN1 和 VLN5 的表达变化第46-48页
     ·VLN1 和 VLN5 相应突变体内的基因表达第48-49页
     ·VLN1 和 VLN5 突变体植株在盐和氧化胁迫下表型分析第49-52页
       ·VLN1 突变体种子在盐和氧化胁迫下萌发率的分析第49-50页
       ·VLN1 突变体幼苗在盐和氧化胁迫下根长的分析第50-51页
       ·VLN5 突变体种子在盐和氧化胁迫下萌发率的分析第51页
       ·VLN5 突变体幼苗在盐和氧化胁迫下根长分析第51-52页
     ·VLN1、VLN5 突变体植株在干旱胁迫下的表型分析第52-54页
       ·VLN1 突变体植株在干旱胁迫下的表型分析第52-53页
       ·VLN5 突变体植株在干旱胁迫下的表型分析第53-54页
     ·NaCl 对 VLN1、VLN5 突变体植株根中 ROS 的影响第54-55页
   ·拟南芥 Villin 与微丝作用关系机理的研究第55-59页
     ·VLN1、VLN5 突变体植株根成熟区和下胚轴中的微丝变化第55-56页
     ·VLN1、VLN5 突变体植株叶表皮细胞中的微丝变化第56-57页
     ·VLN5 突变体植株胁迫条件下保卫细胞中的微丝变化第57-59页
4 讨论第59-65页
5 结论第65-66页
参考文献第66-74页
致谢第74-75页
攻读学位期间发表论文情况第75页

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