摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-9页 |
1 绪论 | 第9-16页 |
·引言 | 第9-10页 |
·锰过氧化物酶研究进展 | 第10-13页 |
·锰过氧化物酶的酶学性质 | 第10-12页 |
·锰过氧化物酶的应用 | 第12页 |
·锰过氧化物酶基因的表达 | 第12-13页 |
·丝状真菌表达系统研究进展 | 第13-15页 |
·丝状真菌宿主与选择性标记 | 第13-14页 |
·丝状真菌转化方法 | 第14页 |
·丝状真菌表达载体 | 第14-15页 |
·研究目的和意义 | 第15页 |
·研究的主要内容 | 第15页 |
·课题来源 | 第15-16页 |
2 偏肿革裥菌三个锰过氧化物酶基因重组质粒的构建 | 第16-35页 |
·材料 | 第16-18页 |
·试验菌种 | 第16页 |
·主要试剂 | 第16页 |
·质粒 | 第16-17页 |
·主要培养基 | 第17-18页 |
·主要仪器设备 | 第18页 |
·方法 | 第18-25页 |
·偏肿革裥菌的培养和菌丝收集 | 第18页 |
·偏肿革裥菌锰过氧化物酶Lg-mnp1、Lg-mnp2和Lg-mnp3的完整CDS全长序列扩增 | 第18-22页 |
·偏肿革裥菌锰过氧化物酶Lg-mnp1、Lg-mnp2和Lg-mnp3的重组质粒的构建 | 第22-25页 |
·结果与分析 | 第25-34页 |
·偏肿革裥菌锰过氧化物酶Lg-mnp1、Lg-mnp2和Lg-mnp3的完整CDS全长序列扩增 | 第25-30页 |
·偏肿革裥菌锰过氧化物酶Lg-mnp1、Lg-mnp2和Lg-mnp3的重组质粒的构建 | 第30-34页 |
·本章小结 | 第34-35页 |
3 构巢曲霉原生质体制备与偏肿革裥菌MnP基因的表达 | 第35-52页 |
·材料 | 第35-37页 |
·菌种 | 第35页 |
·质粒 | 第35页 |
·主要培养基 | 第35-36页 |
·转化使用试剂 | 第36页 |
·主要仪器设备 | 第36-37页 |
·方法 | 第37-40页 |
·构巢曲霉原生质体制备 | 第37-38页 |
·CaCl_2/PEG介导的构巢曲霉转化 | 第38页 |
·转化子的鉴定 | 第38-39页 |
·重组菌株的诱导表达和酶活测定 | 第39-40页 |
·结果与分析 | 第40-50页 |
·构巢曲霉原生质体制备 | 第40-42页 |
·CaCl_2/PEG介导的构巢曲霉转化 | 第42-43页 |
·转化子的筛选鉴定 | 第43-47页 |
·重组菌株的诱导表达 | 第47-50页 |
·本章小结 | 第50-52页 |
结论 | 第52-54页 |
参考文献 | 第54-60页 |
附录1 质粒pMD~(TM) 18-T/Lg-mnp1、pMD~(TM) 18-T/Lg-mnp2和pMD~(TM) 18-T/Lg-mnp3验证结果 | 第60-69页 |
附录2 转化子TN02A7-Lg-mnp1、TN02A7-Lg-mnp2和TN02A7-Lg-mnp3的PCR扩增结果 | 第69-76页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第76-77页 |
致谢 | 第77-78页 |