| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-12页 |
| 1. 前言 | 第12-17页 |
| ·研究背景 | 第12-14页 |
| ·本研究的目的 | 第14-17页 |
| 2. 模拟体液中纳米羟基磷灰石合成及转染效率研究 | 第17-38页 |
| ·理论分析 | 第17-18页 |
| ·材料与方法 | 第18-27页 |
| ·主要试剂与设备 | 第18页 |
| ·质粒的转化、抽提及鉴定 | 第18-21页 |
| ·仿生HA纳米颗粒的制备 | 第21-23页 |
| ·HA纳米颗粒的表征研究 | 第23-24页 |
| ·HA纳米颗粒/质粒DNA复合体的制备 | 第24-25页 |
| ·HA纳米载体的体外细胞转染性研究 | 第25-26页 |
| ·统计分析 | 第26-27页 |
| ·结果 | 第27-34页 |
| ·质粒DNA的限制性内切酶酶切及电泳分析测定 | 第27页 |
| ·质粒浓度及纯度的测定 | 第27页 |
| ·纳米HA颗粒的X-射线衍射分析 | 第27-28页 |
| ·纳米HA颗粒的FTIR分析 | 第28-29页 |
| ·透射电镜(TEM)下的HA纳米颗粒形态学观察 | 第29页 |
| ·HA纳米粒的化学成分分析 | 第29-30页 |
| ·近生理环境下HA纳米颗粒的Zeta电位分析 | 第30页 |
| ·不同浓度的HA与pDNA结合性实验 | 第30-32页 |
| ·HA纳米对pDNA的保护实验结果 | 第32页 |
| ·HA纳米介导的体外细胞转染实验结果分析 | 第32-33页 |
| ·HA纳米载体体外转染细胞的定量分析 | 第33-34页 |
| ·讨论 | 第34-37页 |
| ·结论 | 第37-38页 |
| 3. 纳米HA载体长期稳定性及保存技术研究 | 第38-46页 |
| ·理论分析 | 第38-39页 |
| ·材料与方法 | 第39-41页 |
| ·主要材料和设备 | 第39页 |
| ·质粒的扩增和抽提 | 第39页 |
| ·纳米HA/pDNA复合体的合成与制备 | 第39页 |
| ·纳米HA/pDNA复合体的冷冻干燥 | 第39-40页 |
| ·经冷冻干燥的HA纳米颗粒的体外转染研究 | 第40-41页 |
| ·使用动态光散射(DLS)评估颗粒大小形态 | 第41页 |
| ·统计分析 | 第41页 |
| ·结果 | 第41-43页 |
| ·冷冻干燥对纳米HA/pDNA复合体转染效率的影响 | 第41-43页 |
| ·冷冻干燥对纳米颗粒大小的影响 | 第43页 |
| ·讨论 | 第43-45页 |
| ·结论 | 第45-46页 |
| 4. 基于HA纳米和纤维蛋白基因传递控释系统的构建 | 第46-54页 |
| ·理论分析 | 第46-47页 |
| ·材料与方法 | 第47-49页 |
| ·主要材料与设备 | 第47页 |
| ·纤维蛋白凝胶的制备 | 第47页 |
| ·扫描电镜(SEM)对纤维蛋白凝胶形貌学观察 | 第47-48页 |
| ·三维纤维蛋白凝胶HA基因载体的构建 | 第48-49页 |
| ·结果 | 第49-51页 |
| ·扫描电镜(SEM)对纤维蛋白凝胶形貌学观察情况 | 第49-50页 |
| ·纤维蛋白凝胶中pSEAP质粒表达的碱性磷酸酶活性 | 第50-51页 |
| ·讨论 | 第51-52页 |
| ·结论 | 第52-54页 |
| 5. HA纳米基因载体的细胞跨膜及胞内转运机制研究 | 第54-70页 |
| ·理论分析 | 第54-55页 |
| ·材料与方法 | 第55-59页 |
| ·主要材料与设备 | 第55页 |
| ·质粒的抽提、转化和扩增 | 第55-56页 |
| ·纳米HA/pDNA颗粒的合成 | 第56页 |
| ·特异性抑制剂处理后细胞的转染效率研究 | 第56-57页 |
| ·特异性抑制剂对细胞活性的研究 | 第57-58页 |
| ·特异性抑制剂后细胞的摄取量研究 | 第58页 |
| ·pDNA的荧光标记 | 第58-59页 |
| ·激光共聚显微镜的观察细胞转染研究 | 第59页 |
| ·统计分析 | 第59页 |
| ·结果 | 第59-67页 |
| ·经特异性抑制剂处理后的细胞转染效率的影响 | 第59-61页 |
| ·特异性抑制剂对细胞毒性作用 | 第61-62页 |
| ·特异性抑制剂对细胞摄取量的影响 | 第62-64页 |
| ·荧光共聚显微镜观察纳米HA/pDNA复合物的细胞摄取情况 | 第64-67页 |
| ·共定位程度的定量测定 | 第67页 |
| ·讨论 | 第67-69页 |
| ·结论 | 第69-70页 |
| 6. 全文总结 | 第70-71页 |
| 参考文献 | 第71-80页 |
| 综述 | 第80-117页 |
| 参考文献 | 第103-117页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第117-118页 |
| 致谢 | 第118页 |
