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山羊卵巢间质细胞体外功能研究及其对小腔卵泡发育的影响

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-15页
第一章 卵泡发育研究进展第15-22页
   ·卵泡的发育第15-16页
     ·腔前卵泡阶段第15页
     ·腔前卵泡向有腔卵泡转化第15-16页
     ·有腔卵泡至排卵前卵泡的发育第16页
   ·卵泡生长发育的调控第16-20页
     ·促性腺激素第16页
     ·生长激素第16-17页
     ·胰岛素和胰岛素样生长因子第17页
     ·雄激素第17页
     ·抗缪勒氏管激素第17页
     ·酪氨酸蛋白激酶受体及其配基第17-18页
     ·激活素和卵泡抑素第18页
     ·生长分化因子 9 和骨形态发生蛋白 15第18-19页
       ·生长分化因子 9 (GDF9)第18-19页
       ·骨形态发生蛋白 15 (BMP15)第19页
       ·其他 BMP 和 BMP 受体第19页
     ·其他生长因子第19-20页
       ·角质细胞生长因子第19页
       ·转化生长因子-β第19-20页
       ·碱性成纤维细胞生长因子第20页
       ·上皮生长因子第20页
   ·卵巢间质细胞与卵泡发育第20-22页
第二章 卵巢间质细胞研究进展第22-28页
   ·卵巢间质细胞的来源与结构第22-23页
     ·卵巢间质细胞的来源第22页
     ·卵巢间质细胞的结构第22-23页
   ·卵巢间质细胞的功能第23页
   ·卵巢间质细胞的命运第23-24页
   ·影响卵巢间质细胞生长发育的主要因子第24-28页
     ·胰岛素样生长因子第24页
     ·Kit 配基第24-25页
     ·碱性成纤维细胞生长因子第25页
     ·TGF-β超家族第25-27页
       ·激活素和抑制素第25-26页
       ·骨形态发生蛋白第26页
       ·生长分化因子 9第26-27页
       ·转化生长因子-β第27页
     ·Hedgehog 蛋白第27-28页
第三章 不同部位卵巢间质细胞的分离培养与鉴定第28-35页
   ·材料与试剂第28-29页
     ·材料第28页
     ·主要试剂与配制第28-29页
     ·主要仪器与设备第29页
   ·试验方法第29-30页
     ·卵巢间质细胞分离纯化第29页
       ·不同部位卵巢间质分离第29页
       ·卵巢间质细胞的分离第29页
       ·卵巢间质细胞的纯化第29页
     ·卵巢间质细胞传代培养第29-30页
     ·卵巢间质细胞生长曲线的测定第30页
     ·卵巢间质细胞的鉴定第30页
   ·试验结果第30-33页
     ·卵巢间质细胞的形态和特征第30-31页
     ·卵巢间质细胞生长曲线第31-32页
     ·卵巢间质细胞鉴定结果第32-33页
   ·讨论第33-34页
   ·本章小结第34-35页
第四章 颗粒细胞对卵巢间质细胞雄激素分泌、生长和凋亡的影响第35-49页
   ·材料与试剂第35-36页
     ·材料第35页
     ·主要试剂与配制第35页
     ·主要试剂盒与器材第35-36页
     ·主要仪器与设备第36页
   ·试验方法第36-39页
     ·小腔卵泡颗粒细胞分离第36页
     ·不同部位卵巢间质细胞的分离第36-37页
     ·小腔卵泡颗粒细胞与不同卵巢间质细胞共培养第37页
     ·共培养后卵巢间质细胞细胞 LH 处理第37页
     ·透射电镜检测第37页
     ·雄激素测定第37-38页
     ·实时定量 PCR第38页
     ·WST-1 检测第38页
     ·TUNEL 检测第38-39页
     ·数据统计第39页
   ·试验结果第39-46页
     ·电镜结果第39-40页
     ·雄激素浓度第40-41页
     ·类固醇合成酶基因表达第41-42页
     ·LH 反应性第42-43页
     ·细胞生长与凋亡第43-45页
     ·凋亡相关基因表达第45-46页
   ·讨论第46-48页
     ·颗粒细胞对卵巢间质细胞雄激素合成与分泌能力的影响第46-47页
     ·颗粒细胞对卵巢间质细胞 LH 反应性的影响第47页
     ·颗粒细胞在卵巢间质细胞增殖与凋亡中的作用第47-48页
     ·颗粒细胞对卵巢皮质间质细胞与卵巢髓质间质细胞的不同作用第48页
   ·本章小结第48-49页
第五章 卵巢间质细胞对颗粒细胞雌激素分泌、生长和凋亡的影响第49-59页
   ·材料与试剂第49-50页
     ·材料第49页
     ·主要试剂第49页
     ·主要试剂盒与器材第49页
     ·主要仪器与设备第49-50页
   ·试验方法第50-52页
     ·小腔卵泡颗粒细胞分离第50页
     ·不同部位卵巢间质细胞的分离第50页
     ·小腔卵泡颗粒细胞与不同卵巢间质细胞共培养第50-51页
     ·雌激素测定第51页
     ·实时定量 PCR第51页
     ·WST-1 检测第51页
     ·数据统计第51-52页
   ·结果第52-56页
     ·雌二醇和孕酮浓度第52-53页
     ·类固醇合成酶基因和 LHR 基因表达第53-54页
     ·细胞增殖第54-55页
     ·凋亡相关基因表达第55-56页
   ·讨论第56-58页
     ·不同部位卵巢间质细胞对颗粒细胞雌二醇和孕酮分泌功能的影响第56-57页
     ·不同部位卵巢间质细胞对颗粒细胞增殖与凋亡的影响第57页
     ·不同部位卵巢间质细胞对颗粒细胞作用能力的差异第57-58页
   ·本章小结第58-59页
第六章 卵巢间质细胞对小腔卵泡发育的影响第59-68页
   ·材料与试剂第59-60页
     ·材料第59页
     ·使用的有关培养液及试剂第59页
     ·主要试剂盒与器材第59页
     ·主要仪器与设备第59-60页
   ·试验方法第60-61页
     ·不同部位卵巢间质细胞的分离第60页
     ·小腔卵泡分离第60页
     ·小腔卵泡和不同类型卵巢间质细胞共培养第60-61页
     ·卵泡直径测定第61页
     ·雌二醇和孕酮水平测定第61页
     ·实时荧光定量 PCR第61页
     ·统计分析第61页
   ·结果第61-65页
     ·不同卵巢间质细胞与小腔卵泡共培养前后小腔卵泡直径变化第61-62页
     ·共培养后培养液中雌二醇和孕酮量的测定结果第62-63页
     ·小腔卵泡与卵巢间质细胞共培养后收集到的卵母细胞 GDF9 与 BMP15 基因表达第63-64页
     ·小腔卵泡共培养后收集到的卵母细胞凋亡基因与抗凋亡基因表达第64-65页
   ·讨论第65-67页
     ·不同部位卵巢间质细胞对卵泡生长的影响第65-66页
     ·不同部位卵巢间质细胞对卵泡雌激素分泌的影响第66页
     ·不同部位卵巢间质细胞对卵泡 GDF9 和 BMP15 基因表达的影响第66-67页
     ·不同部位卵巢间质细胞对卵泡抗凋亡能力的影响第67页
   ·本章小结第67-68页
全文结论第68-69页
创新点和后续研究的主要课题第69-70页
 创新点第69页
 后续研究的主要课题第69-70页
参考文献第70-81页
附表 目的基因引物序列第81-82页
缩略词表第82-84页
致谢第84-85页
作者简介第85页

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