淹水胁迫下活性氧及抗氧化酶活性变化对小麦胚乳细胞编程性死亡进程的影响
| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-13页 |
| 1 前言 | 第13-26页 |
| ·细胞编程性死亡 | 第13-14页 |
| ·胚乳细胞的PCD及其检测方法 | 第14-16页 |
| ·胚乳细胞的PCD | 第14-15页 |
| ·PCD的检测方法 | 第15-16页 |
| ·淹水胁迫对植物发育的影响 | 第16-18页 |
| ·淹水胁迫对植物生理生化的影响 | 第16-17页 |
| ·淹水胁迫诱导的植物细胞PCD | 第17-18页 |
| ·ROS产生机制及其在PCD中的作用 | 第18-23页 |
| ·ROS产生机制 | 第18-19页 |
| ·ROS在PCD中的作用 | 第19-21页 |
| ·在细胞中定位ROS的方法 | 第21-23页 |
| ·PCD过程中的Ca~(2+)、激素等信号 | 第23页 |
| ·植物细胞中的ROS清除系统 | 第23-25页 |
| ·抗氧化酶系统 | 第23-25页 |
| ·非酶促系统 | 第25页 |
| ·本研究的目的及意义 | 第25-26页 |
| 2 材料与方法 | 第26-31页 |
| ·材料培养与处理 | 第26-27页 |
| ·材料培养 | 第26页 |
| ·淹水处理 | 第26页 |
| ·淹水条件下喷施抗坏血酸和甘露醇 | 第26-27页 |
| ·外源H_2O_2处理 | 第27页 |
| ·胚乳细胞PCD检测 | 第27-28页 |
| ·Evans Blue染色 | 第27页 |
| ·DNA laddering条带检测 | 第27-28页 |
| ·ROS检测 | 第28-29页 |
| ·超氧阴离子(O_2~-)的光学检测 | 第28页 |
| ·ROS的荧光检测 | 第28页 |
| ·H_2O_2的超微细胞化学定位 | 第28-29页 |
| ·O_2~-的超微细胞化学定位 | 第29页 |
| ·抗氧化酶活性测定 | 第29-30页 |
| ·抗氧化酶基因表达量检测 | 第30-31页 |
| ·胚乳细胞RNA的提取 | 第30页 |
| ·cDNA第一链的合成 | 第30页 |
| ·实时定量PCR反应 | 第30-31页 |
| 3 结果 | 第31-42页 |
| ·胚乳细胞PCD检测 | 第31-33页 |
| ·Evans Blue染色检测PCD | 第31-32页 |
| ·DNA laddering检测 | 第32-33页 |
| ·ROS的显微和超微细胞化学定位 | 第33-35页 |
| ·超氧阴离子(O_2~-)的显微定位 | 第33页 |
| ·ROS荧光检测 | 第33-34页 |
| ·H_2O_2超微细胞化学定位 | 第34-35页 |
| ·O_2~-超微细胞化学定位 | 第35页 |
| ·抗氧化酶活性 | 第35-38页 |
| ·SOD活性 | 第35-36页 |
| ·CAT活性 | 第36-38页 |
| ·抗氧化酶系统关键酶基因的相对表达量 | 第38-42页 |
| ·MnSOD基因相对表达量 | 第38-39页 |
| ·CAT基因相对表达量 | 第39-41页 |
| ·NTR基因相对表达量 | 第41-42页 |
| 4. 讨论 | 第42-51页 |
| ·ROS在胚乳细胞PCD中的作用 | 第42-47页 |
| ·ROS参与了正常发育胚乳细胞的PCD过程 | 第42-43页 |
| ·淹水胁迫下胚乳细胞ROS的积累导致PCD加剧 | 第43-45页 |
| ·ROS调控PCD的模式 | 第45-46页 |
| ·ROS与乙烯、Ca~(2+)协同作用调控PCD | 第46-47页 |
| ·耐湿性不同的品种间淹水胁迫生理效应比较 | 第47-48页 |
| ·本研究方法上的创新和不足 | 第48-49页 |
| ·PCD检测 | 第48页 |
| ·ROS超微定位 | 第48-49页 |
| ·实时定量PCR检测抗氧化关键酶基因表达量 | 第49页 |
| ·展望 | 第49-51页 |
| 参考文献 | 第51-62页 |
| 附录1 在读期间发表和拟发表的论文 | 第62-63页 |
| 附录2 论文图版 | 第63-82页 |
| 致谢 | 第82页 |
