| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 缩略语表 | 第10-11页 |
| 1 前言 | 第11-28页 |
| ·豆科植物-根瘤菌的共生固氮 | 第11-13页 |
| ·豆科植物中共生固氮相关基因研究进展 | 第13-16页 |
| ·结瘤信号传导相关基因研究进展 | 第14-16页 |
| ·豆科植物中参与共生固氮的基因 | 第16页 |
| ·紫色酸性磷酸酶(Purple acid phosphatase,PAP) | 第16-20页 |
| ·PAP家族 | 第17-18页 |
| ·PPD亚家族 | 第18-20页 |
| ·植物转脂蛋白LTP(Lid transfer protein) | 第20-21页 |
| ·植物共生固氮基因的研究方法 | 第21-24页 |
| ·RNA沉默技术 | 第22-23页 |
| ·基因表达定位 | 第23-24页 |
| ·紫云英共生固氮相关基因研究进展 | 第24-27页 |
| ·紫云英转化方法 | 第24-25页 |
| ·紫云英相关基因研究进展 | 第25-27页 |
| ·研究目的和意义 | 第27-28页 |
| 2 材料和方法 | 第28-38页 |
| ·植物及微生物材料 | 第28-32页 |
| ·植物材料 | 第28页 |
| ·微生物材料 | 第28页 |
| ·培养基 | 第28-30页 |
| ·常用试剂及缓冲液 | 第30-31页 |
| ·引物 | 第31页 |
| ·植物转化及分子生物学相关试剂 | 第31-32页 |
| ·主要耗材 | 第32页 |
| ·实验方法 | 第32-38页 |
| ·分子生物学基本操作 | 第32页 |
| ·紫云英总RNA的提取及纯化 | 第32-33页 |
| ·目标基因在紫云英中的表达检测 | 第33-34页 |
| ·胁迫处理实验方法 | 第34-35页 |
| ·洋葱表皮亚细胞定位 | 第35页 |
| ·转化植株根瘤细胞中的亚细胞定位 | 第35-36页 |
| ·转基因植物的GUS组织染色 | 第36页 |
| ·紫云英毛根转化 | 第36-37页 |
| ·发根的结瘤实验 | 第37-38页 |
| 3 结果与分析 | 第38-61页 |
| ·AsIA257在共生固氮中的功能研究 | 第38-56页 |
| ·AsIA257基因克隆 | 第38-39页 |
| ·AsIA257蛋白结构特点及功能预测 | 第39-41页 |
| ·AsIA257在紫云英共生体系中的表达特征 | 第41-47页 |
| ·紫云英植株RNA样品的提取 | 第42-43页 |
| ·实时荧光定量PCR标准曲线的制作 | 第43-44页 |
| ·AsIA257的组织器官表达特性 | 第44-45页 |
| ·AsIA257在根瘤发育和固氮过程中的表达特性 | 第45-46页 |
| ·AsIA257胁迫处理后的表达情况 | 第46-47页 |
| ·AsIA257蛋白的亚细胞定位 | 第47-52页 |
| ·重组质粒pBRed的制备 | 第47-48页 |
| ·AsIA257融合蛋白载体的构建 | 第48-49页 |
| ·AsIA257蛋白在洋葱表皮细胞的定位 | 第49-51页 |
| ·AsIA257蛋白在紫云英根瘤细胞的定位 | 第51-52页 |
| ·AsIA257在根瘤发育和固氮过程中的功能研究 | 第52-56页 |
| ·AsIA257超表达载体的构建 | 第52-53页 |
| ·发根农杆菌K599转化复合型超表达植株的获得 | 第53-56页 |
| ·AsIA257超表达效率的检测 | 第53-54页 |
| ·AsIA257超表达发根结瘤数量减少 | 第54-56页 |
| ·紫云英共生固氮转脂蛋白基因-AsIB259功能的初步研究 | 第56-61页 |
| ·AsIB259基因的克隆和3’非编码区的扩增 | 第56-58页 |
| ·AsIB259基因的克隆 | 第56-57页 |
| ·AsIB259基因的3’非编码区扩增 | 第57-58页 |
| ·AsIB259在根瘤发育和固氮过程中的功能研究 | 第58-61页 |
| ·AsIB259超表达载体的构建 | 第58页 |
| ·AsIB259超表达植株的获得 | 第58-61页 |
| ·AsIB259超表达效率的检测 | 第59页 |
| ·AsIB259超表达发根结瘤数量增加 | 第59-61页 |
| 4. 讨论 | 第61-64页 |
| ·AsIA257可能通过调节根瘤细胞ADP的水平在固氮调控过程中发挥作用. | 第61-62页 |
| ·AsIA257可能在早期结瘤过程中发挥作用 | 第62-63页 |
| ·LTP可能通过与脂肪酸衍生物结合调节共生固氮 | 第63-64页 |
| 参考文献 | 第64-68页 |
| 致谢 | 第68页 |
