| 摘要 | 第1-9页 |
| 文献综述 | 第9-21页 |
| 1 IL-18系统组成、信号通路及生物学功能 | 第9-13页 |
| ·IL-18系统的组成 | 第9-11页 |
| ·IL-18信号通路 | 第11-12页 |
| ·IL-18的生物学功能 | 第12-13页 |
| 2 鸡白介素18(ChIL-18)研究进展 | 第13-16页 |
| 3 其他物种IL-18研究进展 | 第16-19页 |
| 4 IL-18的应用前景 | 第19-21页 |
| 前言 | 第21-22页 |
| 实验一 鸡IL-18基因的克隆及序列分析 | 第22-36页 |
| 1 材料 | 第22-23页 |
| ·实验动物 | 第22页 |
| ·菌株与载体 | 第22页 |
| ·主要试剂 | 第22页 |
| ·主要仪器 | 第22-23页 |
| 2 方法 | 第23-29页 |
| ·鸡脾脏组织总RNA的提取 | 第23-24页 |
| ·总RNA的电泳检测 | 第24页 |
| ·引物设计与合成 | 第24页 |
| ·鸡IL-18基因的PCR扩增 | 第24-25页 |
| ·PCR产物的纯化回收 | 第25-26页 |
| ·鸡IL-18基因与pMD-18-T的连接 | 第26页 |
| ·pMD-18-T-ChIL-18的转化 | 第26-27页 |
| ·pMD-18-T-ChIL-18菌液的PCR鉴定 | 第27页 |
| ·pMD-18-T-ChIL-18质粒DNA的提取 | 第27-28页 |
| ·pMD-18-T-ChIL-18质粒的鉴定 | 第28-29页 |
| 3 结果与分析 | 第29-35页 |
| ·鸡脾脏组织总RNA的提取结果 | 第29-30页 |
| ·鸡IL-18基因的PCR结果 | 第30页 |
| ·pMD-18-T-ChIL-18的阳性克隆鉴定 | 第30-31页 |
| ·pMD-18-T-ChIL-18菌液PCR鉴定 | 第31页 |
| ·pMD-18-T-ChIL-18质粒鉴定 | 第31-35页 |
| 4 讨论 | 第35-36页 |
| 实验二 鸡IL-18基因原核表达载体的构建及其表达 | 第36-47页 |
| 1 材料 | 第36-37页 |
| ·菌株与载体 | 第36页 |
| ·主要试剂 | 第36页 |
| ·主要仪器 | 第36-37页 |
| 2 方法 | 第37-42页 |
| ·鸡IL-18基因原核表达载体的构建 | 第37-39页 |
| ·诱导表达 | 第39页 |
| ·表达产物的SDS-PAGE | 第39-40页 |
| ·从包涵体中纯化表达蛋白 | 第40-42页 |
| 3 结果与分析 | 第42-46页 |
| ·pET-32a的双酶切鉴定 | 第42-43页 |
| ·pET-32a-ChIL-18的鉴定 | 第43-44页 |
| ·pET-32a-ChIL-18的PCR鉴定 | 第43-44页 |
| ·pET-32a-ChIL-18的双酶切鉴定 | 第44页 |
| ·融合蛋白的表达及其纯化产物 | 第44-46页 |
| ·pET-32a-ChIL-18融合表达蛋白的SDS-PAGE | 第44-45页 |
| ·pFJ-32a-ChIL-18融合表达蛋白纯化后的SDS-PAGE | 第45-46页 |
| 4 讨论 | 第46-47页 |
| 实验三 鸡IL-18原核表达蛋白对鸡免疫功能的影响 | 第47-62页 |
| 1 材料 | 第47-48页 |
| ·主要材料 | 第47页 |
| ·主要试剂 | 第47-48页 |
| 2 方法 | 第48-50页 |
| ·动物分组与处理 | 第48-49页 |
| ·红细胞C3b受体花环率及红细胞免疫复合物花环率的检测 | 第49页 |
| ·外周血液中活性T淋巴细胞百分率的测定 | 第49页 |
| ·外周血液中活性B淋巴细胞百分率的测定 | 第49-50页 |
| ·鸡脾脏系数的测定 | 第50页 |
| ·鸡肾传支抗体的测定--ELISA试验 | 第50页 |
| ·鸡新城疫抗体的测定--血凝抑制试验 | 第50页 |
| ·攻毒试验 | 第50页 |
| ·数据统计分析 | 第50页 |
| 3 结果与分析 | 第50-59页 |
| ·临床观察 | 第50页 |
| ·原核表达蛋白ChIL-18对雏鸡红细胞免疫功能的影响 | 第50-52页 |
| ·原核表达蛋白ChIL-18对鸡外周血液中活性T淋巴细胞百分率的影响 | 第52-53页 |
| ·原核表达蛋白ChIL-18对鸡外周血液中活性B淋巴细胞百分率的影响 | 第53-54页 |
| ·原核表达蛋白ChIL-18对鸡脾脏系数的影响 | 第54-55页 |
| ·原核表达蛋白ChIL-18对鸡体重的影响 | 第55-56页 |
| ·原核表达蛋白ChIL-18对鸡肾传支抗体的影响 | 第56-57页 |
| ·原核表达蛋白ChIL-18对鸡新城疫HI抗体效价的影响 | 第57-58页 |
| ·原核表达蛋白ChIL-18对攻毒鸡只体重、免疫器官系数的影响 | 第58页 |
| ·原核表达蛋白ChIL-18对攻毒鸡只死亡率和免疫保护率的影响 | 第58-59页 |
| 4 讨论 | 第59-62页 |
| ·原核表达蛋白ChIL-18对鸡免疫功能的影响 | 第59-60页 |
| ·原核表达蛋白ChIL-18对疫苗免疫效果的影响 | 第60-62页 |
| 结论 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-69页 |
| 附录 | 第69-71页 |
| Abstract | 第71-73页 |
| 致谢 | 第73页 |
