摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-7页 |
1 绪论 | 第7-12页 |
·木材白腐菌概况及其对木质素的降解 | 第7-8页 |
·白腐菌木质素降解酶类 | 第8页 |
·锰过氧化物酶 | 第8页 |
·锰过氧化物酶基因的研究进展 | 第8-10页 |
·MnP同工酶基因克隆 | 第8-9页 |
·MnP同工酶基因的基因组、转录组水平研究概况 | 第9-10页 |
·染色体步移技术原理 | 第10页 |
·研究内容 | 第10-11页 |
·课题来源 | 第11-12页 |
2 偏肿革裥菌MnP同工酶基因的克隆与分析 | 第12-39页 |
·材料 | 第12-13页 |
·试验菌种 | 第12页 |
·主要试剂 | 第12页 |
·主要仪器设备 | 第12-13页 |
·试验引物 | 第13页 |
·方法 | 第13-21页 |
·培养基 | 第13-14页 |
·菌种活化及扩大培养 | 第14页 |
·提取偏肿革裥菌菌丝体基因组DNA | 第14页 |
·偏肿革裥菌总RNA的提取 | 第14-15页 |
·5’RACE | 第15-16页 |
·PCR产物的胶回收、T载体克隆及测序 | 第16-17页 |
·3’RACE | 第17-19页 |
·偏肿革裥菌MnP同工酶DNA片段的获取 | 第19页 |
·染色体步移 | 第19-21页 |
·偏肿革裥菌MnP 3个同工酶基因的序列分析 | 第21页 |
·结果与分析 | 第21-37页 |
·偏肿革裥菌基因组DNA的提取 | 第21-22页 |
·偏肿革裥菌总RNA的提取 | 第22页 |
·5’RACE | 第22-23页 |
·3’RACE | 第23页 |
·偏肿革裥菌MnP同工酶DNA片段的获取 | 第23-24页 |
·染色体步移获得偏肿革裥菌MnP同工酶基因全长 | 第24-29页 |
·偏肿革裥菌MnP 3个同工酶基因的序列分析 | 第29-37页 |
·本章小结 | 第37-39页 |
3 偏肿革裥菌MnP同工酶基因相对表达量分析 | 第39-45页 |
·材料 | 第39-40页 |
·供试菌种 | 第39页 |
·主要试剂 | 第39页 |
·主要培养基 | 第39页 |
·试验引物 | 第39-40页 |
·主要仪器设备 | 第40页 |
·方法 | 第40-41页 |
·偏肿革裥菌gpd内参基因扩增 | 第40页 |
·偏肿革裥菌菌丝的Mn~(2+)诱导处理 | 第40页 |
·偏肿革裥菌总RNA的制备及质量检测 | 第40-41页 |
·偏肿革裥菌3个mnp及内参gpd cDNA片段RT-PCR扩增 | 第41页 |
·Real-time PCR | 第41页 |
·偏肿革裥菌漆酶基因荧光定量数据分析方法 | 第41页 |
·结果与分析 | 第41-44页 |
·偏肿革裥菌内参基因gpd DNA片段的扩增 | 第41-42页 |
·偏肿革裥菌MnP基因荧光定量引物验证 | 第42页 |
·Lgmnp1,Lgmnp2,Lgmnp3基因表达分析 | 第42-44页 |
·本章小结 | 第44-45页 |
结论 | 第45-47页 |
参考文献 | 第47-50页 |
附录 偏肿革裥菌3’RACE两条片段的比较 | 第50-51页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第51-52页 |
致谢 | 第52-53页 |