H9N2亚型禽流感病毒生物学特性分析及PR8八质粒反向遗传操作系统的构建与候选疫苗株的制备
| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-11页 |
| 第一章 引言 | 第11-19页 |
| ·禽流感病毒概述 | 第11页 |
| ·H9N2 的流行现状和致病特征 | 第11-12页 |
| ·疫苗研究进展 | 第12-15页 |
| ·灭活疫苗 | 第12-13页 |
| ·基因载体疫苗 | 第13-14页 |
| ·DNA 疫苗 | 第14-15页 |
| ·禽流感病毒的主要致病因素 | 第15-18页 |
| ·血凝素 HA 基因 | 第15-16页 |
| ·聚合酶 PB2 基因 | 第16-17页 |
| ·PB1-F2 蛋白 | 第17页 |
| ·非结构蛋白 NS1 基因 | 第17-18页 |
| ·神经氨酸酶 NA 基因 | 第18页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第18-19页 |
| 第二章 H9N2 亚型禽流感病毒的生物学特性分析 | 第19-27页 |
| ·实验材料和试剂 | 第19页 |
| ·病毒分离株 | 第19页 |
| ·SPF 鸡胚、细胞及实验动物 | 第19页 |
| ·主要试剂 | 第19页 |
| ·方法 | 第19-21页 |
| ·病毒纯化 | 第19-20页 |
| ·病毒 RNA 提取、反转录 | 第20页 |
| ·PCR 扩增及目的片段的回收 | 第20页 |
| ·全基因组序列分析 | 第20页 |
| ·鸡胚半数感染量（EID50）测定 | 第20-21页 |
| ·病毒对小鼠的致病性试验 | 第21页 |
| ·结果 | 第21-25页 |
| ·病毒的序列测定及分析 | 第21-24页 |
| ·鸡胚半数感染量（EID50）测定结果 | 第24页 |
| ·病毒对小鼠的致病性 | 第24-25页 |
| ·讨论 | 第25-27页 |
| 第三章 PR8 八质粒反向遗传操作系统的构建 | 第27-31页 |
| ·实验材料和方法 | 第27-29页 |
| ·毒株、细胞和鸡胚 | 第27页 |
| ·主要试剂和仪器 | 第27页 |
| ·引物设计 | 第27-28页 |
| ·RNA 提取及内部基因扩增 | 第28页 |
| ·PR8 内部基因重组质粒的构建与鉴定 | 第28-29页 |
| ·重组病毒的拯救与八质粒反向遗传操作系统的验证 | 第29页 |
| ·结果 | 第29-30页 |
| ·PR8 八质粒反向遗传操作系统的构建 | 第29页 |
| ·重组病毒 rPR8-GD322 的拯救 | 第29-30页 |
| ·讨论 | 第30-31页 |
| 第四章 候选疫苗株的构建 | 第31-36页 |
| ·实验材料和方法 | 第31-33页 |
| ·毒株 | 第31页 |
| ·主要试剂和仪器 | 第31页 |
| ·引物设计 | 第31-32页 |
| ·RNA 提取及表面基因扩增 | 第32页 |
| ·表面基因的重组质粒的构建与鉴定 | 第32-33页 |
| ·两株候选疫苗株的拯救 | 第33页 |
| ·结果 | 第33-35页 |
| ·重组质粒的构建 | 第33-34页 |
| ·两株候选疫苗株的拯救 | 第34-35页 |
| ·讨论 | 第35-36页 |
| 第五章 全文结论 | 第36-37页 |
| 参考文献 | 第37-44页 |
| 附录 | 第44-47页 |
| 致谢 | 第47-48页 |
| 作者简介 | 第48页 |
