| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-23页 |
| ·朊蛋白研究现状 | 第13-16页 |
| ·朊蛋白的结构特征 | 第13-14页 |
| ·朊蛋白的生理功能 | 第14-15页 |
| ·朊蛋白介导的信号转导 | 第15-16页 |
| ·浮舰蛋白研究现状 | 第16-20页 |
| ·浮舰蛋白的结构特征 | 第16-18页 |
| ·浮舰蛋白的生理功能 | 第18-19页 |
| ·朊蛋白与浮舰蛋白相互作用对细胞信号转导的影响 | 第19-20页 |
| ·酵母双杂交技术 | 第20-22页 |
| ·酵母启动子 | 第20-21页 |
| ·酵母顺式调控元件 | 第21页 |
| ·GAL4 酵母双杂交系统优缺点 | 第21-22页 |
| ·本研究的目的和技术路线 | 第22-23页 |
| 第二章 酵母双杂交诱饵载体、捕获载体的构建 | 第23-33页 |
| ·实验材料 | 第23-24页 |
| ·载体、模板及菌株 | 第23页 |
| ·工具酶及主要生化试剂 | 第23页 |
| ·实验所需试剂及其配制 | 第23-24页 |
| ·仪器 | 第24页 |
| ·试验方法 | 第24-28页 |
| ·引物设计 | 第24-25页 |
| ·PCR 扩增 PrP25-241、PrP102-241、Flotillins 和 Flotillin-1 突变体基因 | 第25-26页 |
| ·PCR 产物回收与纯化 | 第26页 |
| ·胶回收产物与载体连接 | 第26-27页 |
| ·连接产物转化感受态细胞 | 第27-28页 |
| ·重组质粒提取 | 第28页 |
| ·重组质粒 PCR、双酶切鉴定 | 第28页 |
| ·重组质粒双酶切鉴定 | 第28页 |
| ·实验结果 | 第28-31页 |
| ·PrP25-241、PrP102-241、Flotillins 和 Flotillin-1 突变体基因 PCR 结果 | 第28-29页 |
| ·重组质粒 PCR 鉴定结果 | 第29-30页 |
| ·双酶切鉴定结果 | 第30-31页 |
| ·质粒测序结果 | 第31页 |
| ·讨论 | 第31-33页 |
| 第三章 酵母双杂交诱饵蛋白、捕获蛋白相互作用 | 第33-49页 |
| ·实验材料 | 第33-34页 |
| ·菌株及主要生化试剂 | 第33页 |
| ·实验所需试剂及其配制 | 第33-34页 |
| ·仪器 | 第34页 |
| ·实验方法 | 第34-38页 |
| ·酵母感受态的制备 | 第34-35页 |
| ·诱饵载体、捕获载体转化酵母感受态 | 第35页 |
| ·诱饵载体、捕获载体自激活性检测 | 第35页 |
| ·诱饵载体、捕获载体毒性检测 | 第35-36页 |
| ·诱饵蛋白、捕获蛋白相互作用检测 | 第36页 |
| ·双杂交阳性克隆质粒提取及 PCR 检测 | 第36-37页 |
| ·重复验证阳性菌落 | 第37页 |
| ·免疫印迹检测融合蛋白的表达 | 第37-38页 |
| ·实验结果 | 第38-46页 |
| ·诱饵载体、捕获载体无自激活性 | 第38-39页 |
| ·诱饵载体、捕获载体对 AH109 无毒性 | 第39-40页 |
| ·诱饵蛋白、捕获蛋白相互作用结果 | 第40-45页 |
| ·诱饵载体、捕获载体 PCR 检测结果 | 第45-46页 |
| ·诱饵载体、捕获载体融合蛋白的表达 | 第46页 |
| ·讨论 | 第46-49页 |
| 第四章 全文结论 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-57页 |
| 致谢 | 第57-58页 |
| 作者简历 | 第58页 |