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水稻OsEXPB2基因的功能研究

摘要第1-5页
ABSTRACT第5-11页
1 绪论第11-21页
   ·前言第11-12页
   ·膨胀素家族的研究进展第12-19页
     ·膨胀素的发现及命名第12-13页
     ·膨胀素的结构与功能第13-15页
     ·膨胀素对根系生长发育的调控第15-19页
   ·课题研究的目的、意义第19页
   ·课题研究的内容及技术路线第19-20页
     ·研究内容第19页
     ·研究技术路线第19-20页
   ·本研究的创新点第20-21页
2 OsEXPB2 生物信息学分析第21-31页
   ·实验方法第21页
   ·结果分析第21-29页
     ·初级结构分析第21页
     ·二级结构分析第21-22页
     ·疏水性分析第22-23页
     ·跨膜区域分析第23页
     ·信号肽分析第23-24页
     ·亚细胞定位分析第24-25页
     ·生理功能分析第25-26页
     ·氨基酸序列同源性比对第26-28页
     ·系统进化树分析第28-29页
   ·讨论第29-31页
3 OsEXPB2 亚细胞定位第31-37页
   ·实验用品第31页
     ·材料与试剂第31页
     ·仪器第31页
     ·培养基第31页
   ·实验方法第31-32页
     ·35S::OsEXPB2-GFP 载体的构建第31-32页
     ·定位载体转化农杆菌第32页
     ·定位载体转化洋葱表皮细胞第32页
   ·结果分析第32-35页
     ·亚细胞定位载体的克隆第32-33页
     ·定位载体的 PCR 鉴定及酶切鉴定第33-34页
     ·定位载体转化农杆菌的 PCR 鉴定第34页
     ·亚细胞定位载体转化洋葱表皮细胞的检测第34-35页
   ·讨论第35-37页
4 OsEXPB2 互作蛋白研究第37-47页
   ·实验用品第37-38页
     ·材料与试剂第37页
     ·仪器第37页
     ·培养基第37-38页
   ·实验方法第38-41页
     ·酵母双杂交第38-39页
     ·转化子鉴定第39页
     ·共转化第39页
     ·酵母载体的构建第39-40页
     ·BiFC 载体的构建第40-41页
     ·BiFC 共转化及荧光检测第41页
   ·结果分析第41-46页
     ·目的片段的克隆第41-42页
     ·酵母载体转 DH5α的 PCR 鉴定第42页
     ·转化子鉴定及共转化结果第42-43页
     ·BiFC 目的片段的克隆第43-44页
     ·BiFC 目的片段的酶切鉴定第44-45页
     ·BiFC 载体的 PCR 鉴定第45页
     ·BiFC 载体转农杆菌的 PCR 鉴定第45-46页
     ·BiFC 验证蛋白互作第46页
   ·讨论第46-47页
5 OsEXPB2 干扰载体的构建及转基因水稻的功能鉴定第47-69页
   ·实验用品第47-49页
     ·材料与试剂第47页
     ·仪器第47-48页
     ·培养基第48-49页
   ·实验方法第49-57页
     ·干扰载体(RNAi-OsEXPB2)的构建第49-50页
     ·OsEXPB2 片段的回收第50页
     ·OsEXPB2 与 pENTR-TOPO 载体的连接第50页
     ·OsEXPB2 与 pENTR-TOPO 载体的转化第50-51页
     ·质粒的提取第51页
     ·阳性克隆的鉴定及测序第51页
     ·载体重组第51-52页
     ·干扰载体转化农杆菌第52页
     ·农杆菌介导的水稻转化方法第52-53页
     ·干扰植株的 qPCR 检测第53-55页
     ·相关生理生化指标的检测第55-57页
   ·结果分析第57-68页
     ·干扰载体的构建第57-58页
     ·干扰载体转化农杆菌的 PCR 鉴定第58-59页
     ·转基因水稻 RNAi 阳性植株的鉴定第59页
     ·实时荧光定量检测第59-61页
     ·形态学分析第61-64页
     ·组织解剖学分析第64-67页
     ·冷冻扫描电镜观察第67页
     ·傅立叶红外光谱分析细胞壁成分第67-68页
   ·讨论第68-69页
6 转录调控分析第69-87页
   ·实验用品第69页
     ·材料与试剂第69页
     ·仪器第69页
   ·实验方法第69-71页
     ·启动子生物信息学分析第69页
     ·水稻 OsEXPB2 基因启动子的克隆第69-70页
     ·水稻 POsEXPB2::GUS 载体的构建第70-71页
     ·POsEXPB2::GUS 与 pMD-19T 载体的连接第71页
     ·CaCl_2法大肠杆菌感受态的制备与转化第71页
   ·实验结果第71-84页
     ·启动子生物信息学分析第71-77页
     ·时空表达模式分析第77-80页
     ·非生物胁迫分析第80-81页
     ·启动子的克隆第81-83页
     ·启动子 GUS 活性检测第83-84页
   ·讨论第84-87页
7 主要结论、后续工作和展望第87-89页
   ·主要结论第87-88页
   ·后续工作和展望第88-89页
致谢第89-91页
参考文献第91-97页
附录第97-107页

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