摘要 | 第1-5页 |
ABSTRACT | 第5-11页 |
1 绪论 | 第11-21页 |
·前言 | 第11-12页 |
·膨胀素家族的研究进展 | 第12-19页 |
·膨胀素的发现及命名 | 第12-13页 |
·膨胀素的结构与功能 | 第13-15页 |
·膨胀素对根系生长发育的调控 | 第15-19页 |
·课题研究的目的、意义 | 第19页 |
·课题研究的内容及技术路线 | 第19-20页 |
·研究内容 | 第19页 |
·研究技术路线 | 第19-20页 |
·本研究的创新点 | 第20-21页 |
2 OsEXPB2 生物信息学分析 | 第21-31页 |
·实验方法 | 第21页 |
·结果分析 | 第21-29页 |
·初级结构分析 | 第21页 |
·二级结构分析 | 第21-22页 |
·疏水性分析 | 第22-23页 |
·跨膜区域分析 | 第23页 |
·信号肽分析 | 第23-24页 |
·亚细胞定位分析 | 第24-25页 |
·生理功能分析 | 第25-26页 |
·氨基酸序列同源性比对 | 第26-28页 |
·系统进化树分析 | 第28-29页 |
·讨论 | 第29-31页 |
3 OsEXPB2 亚细胞定位 | 第31-37页 |
·实验用品 | 第31页 |
·材料与试剂 | 第31页 |
·仪器 | 第31页 |
·培养基 | 第31页 |
·实验方法 | 第31-32页 |
·35S::OsEXPB2-GFP 载体的构建 | 第31-32页 |
·定位载体转化农杆菌 | 第32页 |
·定位载体转化洋葱表皮细胞 | 第32页 |
·结果分析 | 第32-35页 |
·亚细胞定位载体的克隆 | 第32-33页 |
·定位载体的 PCR 鉴定及酶切鉴定 | 第33-34页 |
·定位载体转化农杆菌的 PCR 鉴定 | 第34页 |
·亚细胞定位载体转化洋葱表皮细胞的检测 | 第34-35页 |
·讨论 | 第35-37页 |
4 OsEXPB2 互作蛋白研究 | 第37-47页 |
·实验用品 | 第37-38页 |
·材料与试剂 | 第37页 |
·仪器 | 第37页 |
·培养基 | 第37-38页 |
·实验方法 | 第38-41页 |
·酵母双杂交 | 第38-39页 |
·转化子鉴定 | 第39页 |
·共转化 | 第39页 |
·酵母载体的构建 | 第39-40页 |
·BiFC 载体的构建 | 第40-41页 |
·BiFC 共转化及荧光检测 | 第41页 |
·结果分析 | 第41-46页 |
·目的片段的克隆 | 第41-42页 |
·酵母载体转 DH5α的 PCR 鉴定 | 第42页 |
·转化子鉴定及共转化结果 | 第42-43页 |
·BiFC 目的片段的克隆 | 第43-44页 |
·BiFC 目的片段的酶切鉴定 | 第44-45页 |
·BiFC 载体的 PCR 鉴定 | 第45页 |
·BiFC 载体转农杆菌的 PCR 鉴定 | 第45-46页 |
·BiFC 验证蛋白互作 | 第46页 |
·讨论 | 第46-47页 |
5 OsEXPB2 干扰载体的构建及转基因水稻的功能鉴定 | 第47-69页 |
·实验用品 | 第47-49页 |
·材料与试剂 | 第47页 |
·仪器 | 第47-48页 |
·培养基 | 第48-49页 |
·实验方法 | 第49-57页 |
·干扰载体(RNAi-OsEXPB2)的构建 | 第49-50页 |
·OsEXPB2 片段的回收 | 第50页 |
·OsEXPB2 与 pENTR-TOPO 载体的连接 | 第50页 |
·OsEXPB2 与 pENTR-TOPO 载体的转化 | 第50-51页 |
·质粒的提取 | 第51页 |
·阳性克隆的鉴定及测序 | 第51页 |
·载体重组 | 第51-52页 |
·干扰载体转化农杆菌 | 第52页 |
·农杆菌介导的水稻转化方法 | 第52-53页 |
·干扰植株的 qPCR 检测 | 第53-55页 |
·相关生理生化指标的检测 | 第55-57页 |
·结果分析 | 第57-68页 |
·干扰载体的构建 | 第57-58页 |
·干扰载体转化农杆菌的 PCR 鉴定 | 第58-59页 |
·转基因水稻 RNAi 阳性植株的鉴定 | 第59页 |
·实时荧光定量检测 | 第59-61页 |
·形态学分析 | 第61-64页 |
·组织解剖学分析 | 第64-67页 |
·冷冻扫描电镜观察 | 第67页 |
·傅立叶红外光谱分析细胞壁成分 | 第67-68页 |
·讨论 | 第68-69页 |
6 转录调控分析 | 第69-87页 |
·实验用品 | 第69页 |
·材料与试剂 | 第69页 |
·仪器 | 第69页 |
·实验方法 | 第69-71页 |
·启动子生物信息学分析 | 第69页 |
·水稻 OsEXPB2 基因启动子的克隆 | 第69-70页 |
·水稻 POsEXPB2::GUS 载体的构建 | 第70-71页 |
·POsEXPB2::GUS 与 pMD-19T 载体的连接 | 第71页 |
·CaCl_2法大肠杆菌感受态的制备与转化 | 第71页 |
·实验结果 | 第71-84页 |
·启动子生物信息学分析 | 第71-77页 |
·时空表达模式分析 | 第77-80页 |
·非生物胁迫分析 | 第80-81页 |
·启动子的克隆 | 第81-83页 |
·启动子 GUS 活性检测 | 第83-84页 |
·讨论 | 第84-87页 |
7 主要结论、后续工作和展望 | 第87-89页 |
·主要结论 | 第87-88页 |
·后续工作和展望 | 第88-89页 |
致谢 | 第89-91页 |
参考文献 | 第91-97页 |
附录 | 第97-107页 |