| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-11页 |
| 第1章 引言 | 第11-23页 |
| 1. 细胞骨架的结构与功能 | 第11-20页 |
| ·微丝的结构与功能 | 第11-12页 |
| ·微管的结构与功能 | 第12-18页 |
| ·微管的结构特点 | 第12-13页 |
| ·微管的动态性 | 第13-15页 |
| ·微管蛋白的修饰 | 第15-16页 |
| ·微管的成核 | 第16-18页 |
| ·中间纤维的结构与功能 | 第18-20页 |
| 2. 非受体酪氨酸激酶c-Abl的结构与功能 | 第20-22页 |
| 3. 本课题研究的科学问题 | 第22-23页 |
| 第2章 材料与方法 | 第23-31页 |
| 1. 细胞株、菌种及质粒 | 第23页 |
| 2. 分子生物学工具酶、抗体及主要试剂 | 第23-24页 |
| ·分子生物学工具酶 | 第23页 |
| ·抗体 | 第23页 |
| ·细胞培养相关试剂 | 第23-24页 |
| ·试剂盒 | 第24页 |
| ·其他试剂 | 第24页 |
| 3. 主要耗材 | 第24页 |
| 4. 引物合成、质粒构建及序列测定 | 第24-26页 |
| ·α-tubulin编码基因的获得及Flag-α-tubulin表达载体的构建 | 第25页 |
| ·γ-tubulin编码基因的获得及Flag-γ-tubulin表达载体的构建 | 第25页 |
| ·Flag-γ-tubulin突变体表达质粒的构建 | 第25-26页 |
| 5. 细胞培养、冻存及转染 | 第26-27页 |
| ·细胞培养与冻存 | 第26页 |
| ·转染质粒的制备及细胞转染 | 第26-27页 |
| 6. 免疫沉淀及免疫印迹 | 第27-28页 |
| 7. 蛋白浓度的测定 | 第28页 |
| 8. c-Abl/Arg double knockdown A549稳定细胞系的建立 | 第28页 |
| 9. 细胞免疫荧光染色技术 | 第28-29页 |
| 10. 解离状态微管蛋白的分离 | 第29页 |
| 11. 细胞周期同步化实验 | 第29页 |
| 12. Duolink实验 | 第29-30页 |
| 13. 细胞侵袭实验 | 第30-31页 |
| 第3章 结果 | 第31-50页 |
| 1. c-Abl酪氨酸激酶对微管细胞骨架的调节作用 | 第31-46页 |
| ·c-Abl与细胞内三种主要微管蛋白存在相互作用 | 第31-34页 |
| ·c-Abl与α/β/γ-tubulin在细胞内形成复合物 | 第31-32页 |
| ·c-Abl的激活可增强其与γ-tubulin的相互作用 | 第32-33页 |
| ·c-Abl与γ-tubulin的相互作用受细胞周期调节 | 第33-34页 |
| ·c-Abl激酶可使微管蛋白酪氨酸磷酸化 | 第34-41页 |
| ·c-Abl可使微管蛋白酪氨酸磷酸化 | 第34-36页 |
| ·γ-tubulin酪氨酸磷酸化受c-Abl激酶活性调节 | 第36-38页 |
| ·γ-tubulin酪氨酸磷酸化受细胞周期调节 | 第38页 |
| ·质谱确定γ-tubulin酪氨酸磷酸化位点 | 第38-40页 |
| ·γ-tubulin磷酸化修饰位点的验证 | 第40-41页 |
| ·c-Abl可增强γ-tubulin的稳定性 | 第41-43页 |
| ·c-Abl缺失可抑制γ-tubulin的表达 | 第41-42页 |
| ·c-Abl可抑制γ-tubulin的泛素化 | 第42-43页 |
| ·c-Abl影响微管细胞骨架的形成 | 第43-46页 |
| ·c-Abl可抑制微管解聚 | 第43-44页 |
| ·c-Abl缺失导致微管对药物的敏感性增加 | 第44-46页 |
| 2. c-Abl酪氨酸激酶对中间纤维的调节作用 | 第46-50页 |
| ·c-Abl激酶可使cytokeratin酪氨酸磷酸化 | 第46-47页 |
| ·c-Abl缺失可抑制vimentin的表达 | 第47-48页 |
| ·c-Abl缺失可抑制肿瘤细胞的侵袭 | 第48-50页 |
| 第4章 讨论 | 第50-52页 |
| 1. c-Abl酪氨酸激酶对微管细胞骨架的调节作用 | 第50-51页 |
| 2. c-Abl酪氨酸激酶对中间纤维的调节作用 | 第51-52页 |
| 第5章 结论 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-58页 |
| 致谢 | 第58-59页 |
| 硕士期间发表论文 | 第59页 |
